精子核蛋白染色液.docx

精子核蛋白染色液（苯胺蓝法）产品简介：正常情况下，与精核DNA结合的碱性蛋白（核蛋白）将经历从组蛋白到鱼精蛋白的 自然成熟过程，这种成熟后的鱼精蛋白对精子基因（DNA ）具有特殊保护作用组蛋白被 鱼精蛋白逐渐取代的过程称之为精子核蛋白组型转换这种组型转换具有重要的生理意义精子核携带着全部来自父方的遗传信息，这些基因必须在受精后才能开始表达受精 前精子基因在鱼精蛋白的特殊保护下，紧密浓集，无任何DNA转录作用但当核蛋白组型 转换异常可引起男性不育或胚胎早期夭折流产，其机理为：①精子DNA不稳定且易受损伤 而难以受孕；②一旦受精，由于核蛋白组型异常，精子核不能正常解聚，从而影响了雌雄原 核的融合；③胚胎不能正常发育，造成胚胎夭折而流产因此，组蛋白的多少是精子成熟度的一个重要指标，酸性条件下苯胺蓝能特异地与精 子核组蛋白富含的赖氨酸残基结合生成紫蓝色化合物根据着色的深浅来判断精子的成熟程 度产品组成：名称 iff编号DA120120TDA120140TStorage试剂（A）: 10x浓缩洗涤液10ml20mlRT试剂（B）:固定液10ml20ml4弋避光试剂（C）:苯胺蓝染色液5ml10mlRT避光使用说明书1份自M料：1、 蒸馏水2、 新鲜精液样本3、 恒温箱4、 防脱载玻片操作步骤（仅供参考）:1、 配制洗涤工作液:取适量的10x浓缩洗涤液，以蒸馏水10稀释后即为洗涤工作液。

2、 取新鲜精液标本置于恒温箱37弋或常温放置，至完全液化3、 取上述液化精液0.2〜0.5ml置于EP管，再加入1-1.5ml洗涤工作液，用吸管或移液器 反复吹打数次，室温2000rpm离心5min，弃去上清液，保留管底精子沉淀团；重复操作3次4向第3步的EP管中加入洗涤工作液约0.1-0.2ml，制成混合精子悬液5、 取上述已制备好的精子悬液15川，均匀涂布于防脱载玻片上，自然干燥6、 在涂有待测精子的涂片区内滴加固定液2-3滴室温固定5-15min蒸馏水冲洗5-10min， 并甩去多余水分7、 在涂片区内滴加苯胺蓝染色液2-4滴，室温染色5min，蒸馏水冲洗5min，并甩去多余 水份8、 迅速吹干玻片，镜检如果需要长久保存样本，可将玻片依次置于70%、80%、95% 和100%乙醇中各2min，二甲苯透明，中性树胶封片结果：含不成熟核蛋白的精子紫蓝色或深蓝色 a/ \含成熟核蛋白的精子浅蓝色或无色（用复染液染色后为红色）注意事项：1、 蒸馏水冲洗载玻片时要注意控制水流速度，以免洗脱涂片区内的精子2、 甩去多余水分应防止涂片干燥3、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期: 6个月有效相关产品：产品编号产品名称DA0184精子活体染色液（伊红-苯胺黑法）DM0007瑞氏-姬姆萨复合染色液NR0001DEPC 处理水(0.1%)PS0013RIPA裂解液（强）TC1167尿素（Urea）检测试剂盒（脲酶波氏比色法）TO1013丙二醛（MDA）检测试剂盒（TBA比色法）。