实验室常用玻璃器皿洗刷消毒和仪器使用精选课件.ppt

技能训练1 实验室常用玻璃器皿洗刷、消毒和仪器使用  实训目标实训目标 q 熟悉各种玻璃器皿的洗刷和灭菌方法；q 了解传染病实验室常用仪器的构造；q 熟悉仪器的使用方法和注意事项 仪器材料仪器材料 试管、刻度吸管、培养皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、量杯、漏斗、乳钵、普通棉花、脱脂棉、纱布、牛皮纸、旧报纸、新洁尔灭、来苏儿、石炭酸、肥皂粉、重铬酸钾、粗硫酸、盐酸、橡胶手套、橡胶围裙等； 电热恒温培养箱、电热干燥箱、高压蒸气灭菌器、电冰箱、电动离心机、电热恒温水浴箱等 方法步骤方法步骤（一）玻璃器皿的洗刷、包装和消毒（一）玻璃器皿的洗刷、包装和消毒 （二）实验室常用仪器的使用（二）实验室常用仪器的使用 （一）玻璃器皿的洗刷、包装和消毒（一）玻璃器皿的洗刷、包装和消毒1．玻璃器皿的洗刷．玻璃器皿的洗刷 2．玻璃器皿的包装．玻璃器皿的包装3．玻璃器皿的灭菌．玻璃器皿的灭菌1．玻璃器皿的洗刷．玻璃器皿的洗刷（1）新购入的玻璃器皿 用1％～2％盐酸溶液浸泡数小时或过夜,再用清水反复冲刷，最后用蒸馏水冲洗2～3次，倒立使之自然干燥或烘干。

2）一般使用过的器皿 可于用后立即用清水冲净凡沾有油污的，可用肥皂水煮半小时后趁热刷洗，再用清水冲洗干净，最后用蒸馏水冲洗2～3次，晾干3）载玻片 用毕立即浸泡于消毒液中，经1～2d取出，用洗衣粉液煮沸5min，再用毛刷刷去油脂及污垢，然后用清水冲洗，晾干或将洗净的玻片用蒸馏水煮沸，趁热把玻片摊放在干毛巾或干纱布上，稍等片刻，玻片即干，保存备用或浸泡于95％酒精中备用（4）细菌培养用过的试管、平皿等 须高压蒸气灭菌后，倒去内容物，用热肥皂水刷去污物，然后用清水冲洗，最后用蒸馏水冲洗2～3次，晾干或烘干5）对污染有病原微生物的吸管 用后投入盛有消毒液（2％～3％来苏儿或5％石炭酸）的玻璃筒内（筒底必须垫有棉花，消毒液要淹没吸管），经1～2d后取出，浸入2％肥皂粉液中1～2h（或煮沸）取出，再用一根橡皮管，使一端接于自来水龙头，另一端与吸管口相接，用自来水反复冲洗 ，最后用蒸馏水冲洗6）如遇玻璃器皿用上述方法不能洗净者，可用下列清洗液浸泡后洗刷 重铬酸钾（工业用）80g，粗硫酸100ml，水1000ml。

（1）培养皿 将合适的底盖配对，用报纸6个一摞包成一包，装入金属盒内2）试管、三角烧瓶等 塞上大小适合的棉塞或纱布塞（也可用各种型号的软木塞），并在棉塞、瓶口之外，包以牛皮纸，用细绳扎紧即可3）吸管 用3～5cm宽的长纸条（旧报纸、牛皮纸等），由尖端缠卷包裹，直至包没吸管将纸条合拢 （4）乳钵、漏斗、烧杯等 可用纸张直接包扎或用厚纸包严开口处，再以牛皮纸包扎 2．玻璃器皿的包装 常用干热灭菌法 将包装的玻璃器皿放入干燥箱内，为使空气流通，堆放不宜太挤，也不能紧贴箱壁，以免烧焦一般160℃，维持2h 灭菌完毕，关闭电源待箱中温度下降至60℃以下，开箱取出玻璃器皿 3．玻璃器皿的灭菌（二）实验室常用仪器的使用（二）实验室常用仪器的使用 1．电热恒温培养箱2．电热干燥箱3．高压蒸气灭菌器4．电冰箱5．电动离心机6．电热恒温水浴箱1．电热恒温培养箱 电热恒温培养箱又称温箱，主要由箱体、电热丝、温度调节器等构成温箱主要用于细菌的培养、某些血清学试验及有关器皿的干燥等 （1）电热恒温培养箱使用方法插上电源插头，开启电源开关，绿色指示灯明亮，表明电源接通。

然后把温控仪上的调节旋钮旋至所需温度刻度处，此时红灯亮，箱内开始升温，待红绿指示灯交替发亮时，工作室内温度达到设定状态，进入正常工作应注意，近几年销售的温箱有的红灯亮表示通电及恒温，绿灯亮表示升温 （2）电热恒温培养箱使用注意事项 温箱必须放置于干燥及平稳处使用时，随时注意温度计的指示温度是否与所需温度相同除了取放培养物开启箱门外，尽量减少开启次数，以免影响恒温工作室内隔板放置试验材料不宜过重、过密，以防影响热空气对流底板为散热板，其上切勿直接放置物品培养箱内禁止放入易挥发性物品，以免发生爆炸 2．电热干燥箱电热干燥箱又称干热灭菌箱，其构造和使用方法与温箱相似，但所用温度较高主要用于玻璃器皿和金属制品的干热灭菌灭菌时箱内放置物品要留空隙，保持热空气流动，以利彻底灭菌常用灭菌温度160℃，维持2 h灭菌时，关门加热应开启箱顶上的活塞通气孔，使冷空气排出，待升至60℃时，将活塞关闭，为了避免玻璃器皿炸裂，灭菌后箱内温度降至60℃时，才能开启箱门取物品若仅需达到干燥目的，可一直开启活塞通气孔，温度只需60℃左右即可灭菌过程中如遇温度突然升高，箱内冒烟，应立即切断电源，关闭排气小孔，箱门四周用湿毛巾堵塞，杜绝氧气进入，火则自熄。

3．高压蒸气灭菌器 高压蒸气灭菌器是应用最广、效率最高的灭菌器，有手提式、立式、横卧式三种，其构造和工作原理基本相同 高压蒸气灭菌器为一锅炉状的双层金属圆筒，外筒盛水，内筒有一活动金属隔板，隔板有许多小孔，使蒸气流通灭菌器上方或前方有金属厚盖，盖上有压力表、安全阀和放气阀盖的边缘附有螺旋，借以紧闭灭菌器，使蒸气不能外溢 在标准大气压下，水的沸点是100℃，这个温度能杀死一般细菌的繁殖体，要杀死芽胞则需要很长时间如果人为地加大压力，则水的沸点可以升高因高压蒸气灭菌器是一个密闭的容器，加热时蒸气不能外溢，所以锅内压力不断增大，使水的沸点超过121℃ （1）高压蒸气灭菌器使用方法 ①加适量水于灭菌器外筒内，使水面略低于支架，将灭菌物品包扎好放入内筒筛板上 ②器盖盖上时，必须将器盖腹侧的放气软管插入消毒内筒的管架中，然后对称扭紧六个螺栓； ③检查安全阀、放气阀，并使安全阀关闭，放气阀打开 ④通电后，待水蒸气从放气阀均匀冒出时，表示锅内冷空气已排尽 ， 然 后 关 闭 放 气 阀 继 续 加 热 ， 待 灭 菌 器 内 压 力 升 至 约1×105Pa（121.3℃），开始计时，维持20～30min（通过控制电源维持），即可达到灭菌的目的。

⑤灭菌完毕，停止加热，待压力自动降至零时才能开盖取物⑥手提式高压蒸气灭菌器灭菌之后，可放出器内的水，并擦干净 高压蒸气灭菌器使用方法视频（2）高压蒸气灭菌器使用注意事项 ①螺栓必须对称均匀旋紧，以免漏气②内筒中的灭菌物品，不可堆压过紧，以免妨碍蒸气流通，影响灭菌效果③凡能耐热和潮湿的物品，如培养基、生理盐水、敷料、病原微生物等都可应用此法灭菌④为了达到彻底灭菌的目的，灭菌时间和压力必须准确可靠，操作人员不能擅自离开 ⑤注意安全，在高压灭菌密封液体时，如果压力骤降，可能造成物品内外压力不平衡而炸裂或液体喷出 4．电冰箱电冰箱主要由箱体、制冷系统、自动控制系统和附件四大部分构成实验室中常用以保存培养基、药敏片、病料以及菌种、疫苗、诊断液等生物制品 电冰箱使用方法及注意事项 （1）电冰箱应放置在干燥通风处，避免日光照射，远离热源，离墙10cm以上，以保证对流，利于散热2）电冰箱电源的电压一般为220V，如不符合，须另装稳压器稳压3）通电检查箱内照明灯是否明亮，机器是否运转4）使用时将温度调节器调至一定刻度（冷冻室0℃以下，冷藏室温度4～10℃）调节温度时不可一次调得过低，以免冻坏箱内物品。

应作第二次、第三次调整5）冷冻室冰霜较厚时，按化霜按钮或切断电路，进行化霜，融化后清洁整理6）箱内存放物品不宜过挤，以利冷空气对流，使箱内温度均匀7）箱内保持清洁干燥，如有霉菌生长，断电后取出物品，经福尔马林熏蒸消毒后，方可使用5．电动离心机实验室常用电动离心机沉淀细菌、血细胞、虫卵和分离血清等，较多用的低速离心机转速可达4000r/min常用倾角电动离心机，其中管孔有一定倾斜角度，使沉淀物迅速下沉上口有盖，确保安全，前下方装有电源开关和速度调节器，可以调节转速 电动离心机使用方法及注意事项 （1）先将盛有材料的两个离心管及套管放天平上配平，然后对称放入离心机中，若分离材料为一管，则对侧离心管放入等量的其他液体2）将盖盖好，接通电路，慢慢旋转速度调节器到所需刻度，保持一定的速度，达到所需的时间（一般转速2000r/min，维持3～20min），将调节器慢慢旋回“0”处，停止转动方可揭盖取出离心管6．电热恒温水浴箱为镀镍的铜或不锈钢制成的水浴箱，加热快耗电省，箱前有“电源”和“加热”指示灯（一红一绿），并装有温度调节器，自37℃～100℃可以调节定温，箱侧有一水笼头，供放水用水浴箱主要用于蒸馏、干燥、浓缩、温渍化学药品及血清学试验用。

使用时必须先加水于箱内，通电后电源指示灯（绿灯）即亮，再顺时针方向旋转温度调节器，绿灯灭，使加热指示灯（红灯）亮，即接通内部电热丝，使之加温如水温达到所需温度，再逆时针方向微微调节温度调节器，使红绿指示灯忽亮忽灭，经30～60min观察，水温恒定不变即达到定温如下次使用需要同样温度，可不必旋转调节旋钮，或记下所需刻度，以作下次转向之用使用时，不可加水过多，以浸过加热容器为宜加水少于最低水位，则箱旁焊锡溶化引起漏水使用完毕，待水冷却后，必须放水擦干 电热恒温水浴箱使用方法及注意事项 课后作业课后作业1.写出实习报告。