原发性非小细胞肺癌中circPVT1的表达水平及诊断价值研究.docx

    原发性非小细胞肺癌中circPVT1的表达水平及诊断价值研究    高金霞 李秀元 牛莹莹 范兴君 谷红梅 杨勇 靳革【Summary】 目的：探討环状RNA PVT1（circPVT1）在原发性非小细胞肺癌（NSCLC）患者组织和血液中的表达情况及其在NSCLC早期诊断的应用价值方法：选取本院收治的68例NSCLC患者作为病例组，另选取同期于本院进行体检的68例正常人作为对照组采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测病例组的肺癌组织与癌旁正常组织及两组血清circPVT1表达情况，分析circPVT1表达水平及其与NSCLC临床病理特征的关系，应用ROC曲线分析circPVT1对于NSCLC早期诊断的应用价值结果：病例组肺癌组织circPVT1表达水平高于癌旁正常组织（P<0.05）病例组血清circPVT1表达水平高于对照组（P<0.05）不同性别、年龄、病理类型、肿瘤大小、组织学分化程度的肺癌组织circPVT1表达水平比较，差异均无统计学意义（P>0.05），是否吸烟、不同肿瘤分期、有无淋巴结转移的肺癌组织circPVT1表达水平比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。

组织circPVT1表达水平诊断NSCLC的ROC曲线下面积为0.805[P<0.001，95%CI（0.731，0.880）]血清circPVT1表达水平诊断NSCLC的ROC曲线下面积为0.782[P<0.001，95%CI（0.704，0.860）]结论：circPVT1在NSCLC组织和血清中的表达水平均明显增高，肿瘤组织中circPVT1高表达与吸烟、肿瘤分期及淋巴结转移有关，circPVT1对于NSCLC具有一定的诊断价值Key】 NSCLC circPVT1 ROC曲线Study on the Expression Level and Diagnostic Value of circPVT1 in Primary Non-small Cell Lung Cancer/GAO Jinxia， LI Xiuyuan， NIU Yingying， FAN Xingjun， GU Hongmei， YANG Yong， JIN Ge. //Medical Innovation of China， 2021， 18（31）： 0-014[Abstract] Objective： To investigate the expression of circular RNA PVT1 （circPVT1） in tissues and blood of patients with primary non-small cell lung cancer （NSCLC） and its application value in early diagnosis of NSCLC. Method： A total of 68 NSCLC patients admitted to our hospital were selected as the case group， and 68 normal people who underwent physical examination in our hospital during the same period were selected as the control group. Real-time fluorescence quantitative PCR （RT-QPCR） was used to detect the expression of circPVT1 in lung cancer tissues and adjacent normal tissues as well as the serum of the two groups， the expression level of circPVT1 and its relationship with the clinicopathological features of NSCLC were analyzed， the application value of circPVT1 for the early diagnosis of NSCLC was analyzed by ROC curve. Result： The expression level of circPVT1 in lung cancer tissues was higher than that in adjacent normal tissues （P<0.05）. The serum circPVT1 expression level in case group was higher than that in control group （P<0.05）. There was no significant difference in the expression level of circPVT1 in lung cancer tissues of different genders， ages， pathological types， tumor sizes and histological differentiation degrees （P>0.05）， but there were statistically significant differences in circPVT1 expression levels in lung cancer tissues with or without smoking， different tumor stages and with or without lymph node metastasis （P<0.05）. The area under ROC curve for diagnosis of tissue circPVT1 expression level in NSCLC was 0.805 [P<0.001， 95%CI （0.731， 0.880）]. The area under ROC curve of serum circPVT1 expression level for diagnosis of NSCLC was 0.782 [P<0.001， 95%CI （0.704， 0.860）]. Conclusion： The expression level of circPVT1 in NSCLC tissues and serum was significantly increased， the high expression of circPVT1 is associated with smoking， tumor stage and lymph node metastasis， circPVT1 has a certain diagnostic value for NSCLC.[Key words] NSCLC circPVT1 ROC curveFirst-author’s address： School of Public Health of Mudanjiang Medical College， Mudanjiang 157011， Chinadoi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.31.003肺癌已成为发病率及死亡率最高的恶性肿瘤，发病情况仍处于逐年上升的趋势，其中非小细胞肺癌（NSCLC）占比最高，达到80%～90%。

肺癌高额的治疗费用，给家庭和社会带来了沉重的负担，且很多患者就诊时肺癌已经发展到中晚期，失去了治疗的最佳时机，目前手术、放化疗、免疫治疗、靶向治疗等各种方法的应用，5年生存率也仅15%左右[1]因此，早期诊断、及早治疗才是提高肺癌治疗效果的重要方法[2]环状RNA（circular RNAs，circRNAs）存在于真核生物细胞质中，由于其特殊的广泛性、保守性、稳定性等特征，有望成为肿瘤早期诊断的新的生物标记物[3]circPVT1在许多肿瘤的发生发展中都起着重要作用，但关于circPVT1在肺癌中的表达情况的报道比较少见本研究通过分析NSCLC患者组织及血液circPVT1的表达水平及其对于NSCLC的诊断价值，以期为肺癌的早期诊疗提供有价值的信息，现报道如下1 资料与方法1.1 一般资料 选取2016年1月-2019年12月于本院就诊的NSCLC患者68例作为病例组纳入标准：经手术切除肺组织进行病理检测，确诊为NSCLC;本研究前未进行与肺癌相关的手术、放化療或生物学治疗排除标准：合并其他恶性肿瘤;临床资料不全另选取同期于本院体检的68例健康者作为对照组所有研究对象均知情同意并签署知情同意书，本研究获得本院伦理委员会批准。

1.2 方法 病例组术中留取肺癌组织和癌旁正常组织（距病灶2 cm），放于离心管中，液氮冻存两组抽取外周静脉血5 mL，以3 000 r/min离心10 min，吸取上清液存于EP管中，存于-80 ℃冰箱保存备用采用Trizol法提取肺癌组织、癌旁正常组织及血清中总RNA，采用RNA反转录试剂盒和RT-PCR试剂盒将RNA反转录为cDNA，以cDNA为模板进行PCR扩增PCR引物由上海生工生物工程公司合成，内参GAPDH，以2-ΔΔCt表示目的基因的表达circPVT1：正向引物CGACTCTTCCTGGTGAAGCATCTGAT;反向引物TACTTGAACGAAGCTCCATGCAGC;内参GADPH：正向引物GCACCGTCAAGGCTGAGAAC;反向引物ATGGTGGTGAAGACGCCAGT1.3 统计学处理 采用SPSS 23.0软件对所得数据进行统计分析，符合正态分布的计量资料用（x±s）表示，比较采用t检验;不符合正态分布的计量资料用M（P25，P75）表示，比较采用秩和检验;计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验;采用ROC曲线分析血清及组织circPVT1表达水平对NSCLC的诊断价值。

以P<0.05为差异有统计学意义2 结果2.1 两组一般资料比较 病例组男41例，女27例;年龄38～81岁，平均（62.14±10.98）岁;吸烟者39例，不吸烟者29例;鳞癌37例，腺癌31例;TNM分期：Ⅰ～Ⅱ期23例，Ⅲ～Ⅳ期45例对照组男39例，女29例;年龄26～75岁，平均（53.26±13.53）岁;吸烟者40例，不吸烟者28例两组性别年龄比较，差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性2.2 病例组肺癌组织与癌旁正常组织circPVT1表达水平比较 肺癌组织circPVT1相对表达量为0.176（0.049，0.291）高于癌旁正常组织的0.081（0.022，0.179），差异有统计学意义（P<0.01），见图12.3 两组血清circPVT1表达水平比较 病例组血清circPVT1相对表达量为0.229（0.145，0.388）高于对照组的0.113（0.035，0.157），差异有统计学意义（P<0.01），见图22.4 不同临床特征的NSCLC患者肺癌组织circPVT1表达水平比较 不同性别、年龄、病理类型、肿瘤大小、组织学分化程度NSCLC患者肺癌组织circPVT1表达水平比较，差异均无统计学意义（P>0.05）;是否吸烟、不同肿瘤分期及有无淋巴结转移NSCLC患者肺癌组织circPVT1表达水平比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。

见表12.5 组织circPVT1表达水平对NSCLC的诊断价值 以癌旁正常组织circPVT1表达水平为对照，对circPVT1表达水平对NSCLC的诊断价值采用R。