地黄寡糖胶囊的制备及质量标准研究.doc

1地黄寡糖胶囊的制备及质量标准研究作者：杨菁，安阳，刘影，宋扬，于涛【摘要 】 目的制备地黄寡糖胶囊，对其进行质量研究，制定质量标准方法采用薄层色谱法对制剂所含的水苏糖进行了鉴别，并用高效液相色谱(HPLC)法测定制剂中梓醇的含量结果在薄层色谱(TLC)中可以检出水苏糖特征性斑点;梓醇在 0.2～1.8 μg 范围内呈线性关系，r=0.999 9，加样回收率为 99.97%，RSD 为 1.11%结论地黄寡糖胶囊制备工艺合理、可行建立的鉴别方法专属性强，定量方法简便、准确，能有效地控制制剂质量 【关键词】 地黄寡糖胶囊; 制备; 质量标准; 梓醇地黄寡糖胶囊是在地黄寡糖提取液[1]基础上制备的口服固体制剂实验表明腹腔注射地黄寡糖提取液对脑缺血再灌所致痴呆大鼠学习记忆功能具有保护作用[2];对谷氨酸诱导的神经细胞的损伤具有保护作用[3，4]为方便使用将其制备成固体口服制剂现将制备工艺、质量研究报道如下1 仪器与试药2LC-20ATVP 高效液相色谱仪(日本岛津公司);KQ-250B 超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);SYS-550 型石英亚沸高纯水蒸馏器(金坛市丹阳门石英玻璃厂) 。

梓醇对照品(110808-200407，购于中国药品生物制品检定所);水苏糖对照品 (纯度99.8%，20070514，购自北京慧德易科技有限公司);生地黄(购自河南省武涉县西陶镇，由锦州奥鸿药业有限责任公司照《中国药典》Ⅰ部生地黄质量标准检测，符合规定)乙腈、甲醇为色谱级;其它试剂为分析纯2 方法与结果2.1 地黄寡糖胶囊制备[1] 取 20 kg 地黄粉碎成小于 2 mm 的颗粒，用 50 L 注射用水浸泡 5 h，离心取上清得上清液约 44 L，将上清液于 50℃下真空浓缩至 20 L，加入 95%乙醇 80 L 混合，离心过滤取上清，得滤液 96 L，用 5 ku 的超滤器将浓缩液超滤得超滤液约 95 L，将超滤液在 50℃减压浓缩至相对密度 1.20～1.25(热测)，真空干燥至干膏，得干膏约 400 g将颗粒粉碎并控制在 20～60目，装胶囊0.25 g/粒，生产约 1 600 粒2.2 质量研究2.2.1 性状本品内容物为浅棕色或黄棕色颗粒状物32.2.2 崩解时限取批号为20080501，20080502，20080503 的三批地黄寡糖胶囊，按照《中国药典》2005 年版Ⅰ部附录Ⅻ A 崩解时限检查法检查，均在30 min 内崩解。

2.2.3 干燥失重取批号为20080501，20080502，20080503 的 3 批地黄寡糖胶囊，按照《中国药典》2005 年版Ⅰ部附录Ⅸ G 干燥失重检查法，置 100℃烘箱中干燥 6 h 测定，水分均小于 9.0%2.2.4 鉴别[5]精密称取水苏糖对照品 5.1 mg，加纯化水 2 ml 溶解制成对照品溶液取本品胶囊数粒，倾其内容物，研细混匀，称取约 200 mg，精密称定，置 10 ml 容量瓶中，加甲醇 40 ml，超声振荡 30 min，放冷，加甲醇定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液照 2005 年版《中国药典》Ⅰ部附录Ⅵ薄层色谱法取供试品 5 μl，水苏糖对照品溶液 2 μl,分别点于同一张硅胶 G 薄层板上，以醋酸乙酯-乙醇- 水-氨水(5∶5∶4∶0.3)为展开剂，展开，取出，凉干，喷以 5%的硫酸乙醇溶液， 105 ℃加热至斑点清晰，观察可见供试品色谱在与对照品色谱相应位置上显相同颜色的斑点见图 141.水苏糖对照品 2.供试品溶液(20080501)3.供试品溶液 (20080502) 4.供试品溶液 (20080503)图 1 水苏糖 TLC 图谱2.2.5 含量测定色谱条件：色谱柱为 SUNTEK C18(4.6 mm×200 mm，5 μm)，流动相为乙腈-0.1%磷酸(1∶99);流速 0.9 ml/min;柱温 36℃;检测波长 214 nm;进样量 10 μl。

溶液的制备：精密称取梓醇对照品适量，加水制成每毫升含50 μg 的溶液，为对照品溶液取本品胶囊数粒，倾其内容物，研细混匀，称取约 200 mg，精密称定，置 200 ml 容量瓶中，加甲醇80 ml，超声振荡 30 min，放冷，加甲醇定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液峰的分离：取供试品溶液及对照品溶液各 10 μl，注入液相色谱仪，记录色谱图供试品溶液在梓醇位置上有相应的峰存在，且与其它色谱峰可以基线分离表明梓醇在此色谱条件下分离良好理论塔板数按梓醇计，应不低于 3 000色谱图见图 25A-梓醇对照品溶液 B-地黄寡糖胶囊图 2 高效液相色谱图线性关系实验：分别精密称取梓醇对照品加水配制浓度分别为 10，30，50 ，70，90 μg·ml-1，按色谱条件，分别进样 10 μl对照品溶液，测得峰面积，以对照品浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，得线性回归方程为：Y=1576.3X-2 670.9，r=0.999 9结果表明梓醇在 0.2～1.8μg 时，浓度与峰面积呈良好线性关系精密度实验：取同一对照品溶液，按上述色谱条件，重复进样 6 次，10 μl/次，测定梓醇峰面积，其 RSD 为 0.33%，表明此法的精密度良好。

稳定性实验：取批号为 20080501 的地黄寡糖胶囊，按供试品溶液的制备方法制成供试品溶液，并分别于0，3 ，6 ， 9，12 ，24 h，按上述色谱条件，进样 10 μl，测定梓醇含量，RSD 为 1.29%，表明梓醇在 24 h 内稳定重复性实验：取批号为 20080501 的地黄寡糖胶囊 6 份，按供试品溶液的制备方法分别制成供试品溶液，按上述色谱条件，进样，测定梓醇含量，RSD 为 1.33%，表明分析方法重复性良好6加样回收率实验：称取已知含量的地黄寡糖胶囊约 200 mg，精密称定 6 份，分别置于 100ml 的容量瓶中，分别用5.0，10.0，15.0 μg·ml-1 三种浓度的梓醇对照品溶液，按供试品溶液的配制方法制成供试品溶液，进样，计算回收率(见表 2)平均回收率为 99.97%，RSD 为 1.11%表 1 回收率实验结果结果表明本方法具有良好的回收率样品的测定：取批号为 20080501，20080502，20080503的地黄寡糖胶囊，按上述方法测定梓醇含量，结果含量分别为13.12，14.25，15.37 mg/粒3 讨论地黄寡糖胶囊的主药成分为地黄寡糖，它是由中药地黄提取而成，梓醇作为地黄中的主要成分。

参照 2005 年《中国药典》Ⅰ部地黄中梓醇含量测定的色谱条件，测得梓醇含量应不少于 7.0 mg/粒应用了 TLC 法对其中的水苏糖进行了鉴别，各点之间分离效果良好同时对制剂的崩解时限、性状、干燥失重等进行了分析，均符合胶囊剂的要求参考文献】7[1] 杨 菁，岳春丽，王洪新.地黄寡糖及其提取方法[P]. 中国专利号：200610088850.7，2007-01-24.[2] 杨 菁，石海燕，李 莹，等. 地黄寡糖对脑缺血再灌所致痴呆大鼠学习记忆功能的影响[J].中国药理学与毒理学杂志，2008，22(3):165.[3] 杨 菁，史佳琳，白 剑，等. 地黄寡糖对谷氨酸诱导的海马神经元及葡萄糖摄入的影响[J].中国药理学与毒理学杂志，2009，23(2)：99.[4] 史佳琳，杨 菁，徐新利，等.地黄寡糖对谷氨酸诱导海马神经元损伤的影响[J].中国药理学通报，2009 ，25(3) ：357.[5] 孟显华，陈国华，孙明昆，等.薄层色谱法分析壳寡糖[J].青岛海洋大学学报，2002，32(4)：641.。