薄荷醇对大鼠血-视神经屏障通透性的影响.docx

          薄荷醇对大鼠血-视神经屏障通透性的影响                    【摘要】目的:研究薄荷醇对大鼠血-视神经屏障通透性的影响方法:将72只SD大鼠分为实验组和对照组,每组36只实验组尾静脉注薄荷醇乳液,给药后15min，尾静脉静脉注射2%伊文思蓝(EB)，分别30min，1h，2h，4h，8h荧光分光光度法检测视神经内不同时间点示踪剂伊文思兰的浓度结果:与对照组相比,实验组血-视神经EB含量更高结论：薄荷醇可提大鼠血-视神经屏障通透性通透性,是一种有效促进药物透过血眼屏障的穿透促进剂这将为某些内眼疾病的药物治疗提供新方法关键词】薄荷醇；血-视神经屏障；药物传递R2【文献标号】A1671-8725（2014）11-0031-01眼睛是一种免疫赦免器官,有多种因素对维持眼睛结构和功能的特殊性发挥作用，其中最重要的是血眼屏障血-眼屏障包括血-房水屏障、血-视网膜屏障以及少有人提的血-视神经屏障视神经属于中枢神经，是大脑白质的延续，和血-眼屏障一样都有严格的屏障作用正是由于这三个屏障结构和功能的完整才维持了眼的正常生理功能血-视神经屏障是血眼屏障的一部分，能阻止大分子、有害物质通过，同时，也阻碍了营养物质、药物的进入，因此，视神经一旦病变，很难形成有效的药物吸收，对治疗带来很大的困难。

目前，血-视神经屏障的研究很少，并且争议很大[1]国内外教科书中尚无此概念因此，进一步探索血-视神经屏障的特性，寻找能够促进开放血-视神经屏障的药物是非常重要的近年来，有大量实验研究薄荷醇的促渗透作用，研究主要集中在对经皮、对鼻腔、胃肠粘膜的给药促渗作用[2]，还没有对开放血-视神经屏障的研究本研究探讨其对大鼠血-眼屏障通透性的影响作用1材料和方法1.1材料仪器与试药:荧光分光光度计；薄荷醇，化学纯伊文思蓝,用生理盐水溶解伊文思蓝配制成2%溶液,振荡混匀,过滤后避光放入4℃冰箱备用三氯乙酸等其它试剂均为市售分析纯实验动物健康SD大鼠,雌雄兼用,质量2.0～3.0kg实验前经裂隙灯检查无眼疾者纳入实验1.2方法将42只大鼠随机分为两组:实验组及对照组实验组尾静脉注射薄荷醇乳液(生理盐水100mL，吐温-801mL，加入2.5g薄荷醇混匀)实验组及对照组按注药后30min，1h，2h，4h，8h时间取材每个时间点6只取材前15min大鼠尾静脉2%伊文思蓝（EB）3.5ml/kg水合氯醛腹腔麻醉大鼠剪去额顶部皮肤，掀开顶骨，留取双侧视神经从球后至视交叉以前使用校零标准品配制不同浓度(10～1000μg/L)的伊文思蓝标准溶液,测定其吸光度值,计算出标准曲线方程。

将每个时间点取的新鲜标本称重后放入存有3ml甲酰胺的试管中，60℃水域（避光）抽提72小时1500r/min离心20min,取1ml上清液与2ml甲酰胺混合在Ex620nm(激发波长)、Em680nm(发射波长)条件下进行测定,检测各受试样品吸光度(A)值依据标准曲线方程求得样品中伊文思蓝浓度,并计算每克标本内EB的含量1.3统计学处理所有实验结果采用x±s表示,所得数据用SPSS16.0统计软件包进行统计分析,组间比较采用析因设计的方差分析,以P＜0.05为显著性标准2结果2.1伊文思蓝的标准曲线方程y=0.037x-49.98，R2=0.9993(n=8),其中y为受检溶液伊文思蓝的浓度2.2视神经中EB含量的变化对照组及实验组大鼠视神经不同时间点的伊文思蓝质量浓度3讨论全身用药后药物的眼内通透性主要受到药物进入血循环的量,血清蛋白结合率及穿透血-视神经屏障能力的影响此过程除了与药物的物理化学特性,如溶解度、油/水分配系数、分子大小和解离度等因素有关外,还与血-视神经屏障的通透状态有关例如:颈动脉灌注甘露醇等高渗物质,可短暂改变RPE及视网膜毛细血管内皮细胞特性；设计亲脂性前药以增加药物通过跨细胞途径扩散进入神经视网膜;针对药物传递靶向转运蛋白的前药开发[3，4]。

但是这些方法存在毒性大针对性小及开发成本高的缺点迄今为止还没有找到一种的适用面广安全、有效的办法来增加药物的跨血-视神经屏障传递薄荷醇属于萜(烯)类渗透促进剂，其主要作用机理之前被认为是破坏角质层中细胞的脂质屏障，增加药物从水溶性基质向角质层的分配和与其作用于皮肤表皮和引起超微结构的改变密切相关为此本实验进一步探讨薄荷醇促渗透的确切机理，对薄荷醇在眼科治疗使用具有相当重要的意义本研究表明,薄荷醇作用后30分钟视神经内EB含量迅速升高，1h达到高峰，4h时显著下降，8h时降至正常，而对照组各时间点均无变化本实验结果证实了薄荷醇可提高大鼠血-视神经屏障的通透性，可能增加血-视神经屏障对某些药物的透过率这对一些眼内通透性差的药物应用提供了一个新的思路,可以考虑在处方中加入薄荷醇,发挥其促进渗透增加药物跨膜传递的作用参考文献[1]宋昊刚,崔浩.血-视眼屏障的作用及意义.航空航天医学2005;16(2):53-54.[2]王晖,许卫铭.薄荷醇预处理对胰岛素鼻腔给药药理生物利用度的影响[J].中国药理学通报,2002,18(1):64-66.[3]FrankJA,DwyerAJ,GirtonM.Openingofblood-ocularbarrierdemonstratedbycontras-tenhancedMRmiaging.JComputAssistTomogr1986;10:912-916.  -全文完-。