六霉菌的形态观察与鉴定.ppt

实验七 霉菌的形态观察与鉴定 1.豆腐进进行霉菌发发酵，表面生长长出一层层白色茸毛（即菌丝丝）的豆腐2.不同季节节（不同温度、湿度、发发酵时间时间 ）根据菌丝颜丝颜 色、长长度的不同可分为为虎皮毛、鼠毛、兔毛和棉毛四种，以兔毛和棉毛为质为质 量最佳一、实验目的(1) 学会霉菌的载玻片培养法(2) 了解青霉、曲霉、根霉及毛霉的形态构造(3) 霉菌的无性孢子和有性孢子的形态观察无性孢孢子：根霉，毛霉-孢孢囊孢孢子曲霉，青霉-分生孢孢子有性孢孢子：根霉，毛霉-接合孢孢子二、实验原理霉菌为真核微生物，菌丝较粗大（直径：3-10um, 与酵母菌相似，比细菌或放线菌的细胞约粗10倍）；有分枝或不分枝的菌丝体为无色透明或暗褐色至黑色，或呈现鲜艳的颜色在显微镜下观察时，菌丝皆呈管状在固体培养基上生长，为绒毛状或棉絮状一些较高等的霉菌丝状管道中皆有横隔（有隔菌丝- 青霉属（Penicillium），曲霉属（Asepergillus）；无隔菌丝-毛霉属（Mucor），根霉属（Rhizopus）由横格状菌丝隔成许多细胞细胞易收缩变形，而且孢子很容易分散观察霉菌的形态的常用方法直接制片观观察法：是将培养物置于乳酸石炭酸棉蓝蓝染色液中，制成霉菌制片镜检镜检 。

用此染液制成的霉菌制片的特点是：细细胞不变变形；具有防腐作用，不易干燥，能保持较长时间较长时间 ；能防止孢孢子飞飞散；染液的蓝蓝色能增强反差必要时时，还还可用树树胶封固，制成永久标标本长长期保存载载玻片培养观观察法：用无菌操作将培养基琼琼脂薄层层置于载载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌即在载载玻片和盖玻片之间间的狭窄空间间内沿盖玻片横向生长长培养一定时间时间 后，将载载玻片上的培养物置于显显微镜镜下观观察这这种方法既可以保持霉菌自然生长长状态态，观观察到它们们不同阶阶段的生长长、发发育状况，特殊形态态构造，如曲霉的足细细胞、分生孢孢子、顶顶囊等生长长情况玻璃培养观观察法透明胶带带法 三、实验材料与方法1.菌种：青霉、黑曲霉、根霉、毛霉青霉2.繁殖：分生孢子球形、椭圆形或短柱形，光滑或粗糙，大部分生长时呈蓝绿色1.形态特征：菌丝有隔，基部无足细细胞具分子孢子梗 - 经过多次分枝，产生几轮对称或不对称的小梗-扫帚状分生孢子头3.应用：抗生素Fungal Mycelium with Spores, Penicillium sp. (SEM x3,220)Conidiospores of Penicillium 曲霉2.繁殖：分生孢子1.形态特征：菌丝有隔，具足细胞、分生孢子梗及膨大顶囊。

3.应用：酿造酒、酱，有机酸、酶制剂在幼小而活力旺盛时，菌丝体产生大量的分生孢子梗分生孢子梗顶端膨大成为顶囊，一般呈球形项囊表面长满一层或两层辐射状小梗(初生小梗与次生小梗)最上层小梗瓶状，顶端着生成串的球形分生孢子以上几部分结构合称为“孢子穗”孢子呈绿、黄、橙、褐、黑等颜色曲霉孢子穗的形态，包括分生孢子梗的长度、顶囊的形状、小梗着生是单轮还是双轮，分生孢子的形状、大小、表面结构及颜色等，都是菌种鉴定的依据Black Mold, Aspergillus variecolor. (SEM x2,315)曲霉Aspergillus 的分生孢子毛霉2.繁殖：孢囊孢子、厚垣孢子、接合孢子1.形态特征：菌丝发达，白色无隔多核3.应用：腐乳：蛋白酶Mucorsp.毛霉属（毛霉属（MucorMucor）：）：孢囊梗直接从菌丝上长出，孢囊梗单生，直立、分枝或不分枝不产生匍匐丝与假根引起果实和贮藏器官的腐烂根霉2.繁殖：孢囊孢子、厚垣孢子、接合孢子1.形态特征：菌丝发达具假根和匍匐菌丝3.应用：糖化菌（淀粉酶） 有假根和匍匐丝，孢囊梗2-3根丛生，不分枝，从匍匐枝上长出，孢囊梗与假根对生孢子囊基部有一个近球形的囊轴。

孢子囊球形或近球形，成熟后呈黑色孢子囊壁破裂后，散出大量的孢囊孢子孢囊孢子萌发产生芽管匐枝根霉是异宗配合的，当两个不同交配型的菌株(“十”菌株和“一”菌株)相遇，从菌丝上分别产生称作原配子囊的分枝，以配子囊配合的方式进行质配，最后发育成黑色、厚壁、带有瘤状突起的接合孢子接合孢子萌发时，一般是形成芽管，芽管顶端形成孢子囊，孢子囊中产生有“十、“一”分化的孢囊孢子接合孢子Bread Mold Spores on Fungal Fruiting Structure, Rhizopus sp. (SEM x2,990) 2. 培养基: 马铃薯琼脂平板培养物.3.器材:显微镜、培养箱、培养皿、水浴锅、载玻片、盖玻片、无菌水、接种环、接种钩、解剖针、酒精灯、火柴、滤纸、玻璃铅笔等4. 操作程序 载玻片培养观察法1.无菌培养皿的准备在一洁净干燥的培养皿内，放一铝丝制载玻片架，再放人分别用纸包好的洁净载玻片1-2片及盖玻片1-2片，然后盖上皿盖，包扎后灭菌备用 2.霉菌载玻片培养物的制备（1）取约3ml经灭菌后的察氏培养基试管，标上青(毛、根或曲)霉字样2）以无菌操作方式取出无菌培养皿中的载玻片和盖玻片，打开备用。

3）取一标好字样的试管培养基，于酒精灯上以微火融化 (4)待融化后的培养基冷却至45t左右时，接入标明菌名的相应霉菌孢子一环，搅拌均匀，立即取大约3-4环于载玻片中央，然后迅速盖上无菌盖玻片，并于载玻片右上角标明菌名5)往培养皿中倒人约3ml的无菌水6)将上述制备好的载玻片置于培养皿中的玻片架上，盖上皿盖，置于28培养箱中培养48-72h，取出，置于显微镜下观察霉菌的形态 四 思考题青霉、曲霉、根霉、毛霉的形态有哪些异同？比较显微镜下放线菌和霉菌的细胞形态和菌落的特征 ？。