邻菲罗啉分光光度法测定水样中的铁实验指导.doc

仪器分析实验实验二 邻菲罗啉分光光度法测定水样中的铁 一一标准曲线法一、 实验目的：1. 掌握邻菲罗啉分光光度法测定微量铁的原理和方法；2 ?学会标准曲线的绘制方法及其使用二、 原理：1?定量分析依据： A= K be2?有关反应：4Fe +2NH 2OH ? HCI=4Fe +N 2O f +4H +2H 2O+2CIFe2+ +3■?e3橙红色配合物3. 显色条件pH 值控 pH ~制： 5.0 o显色时间： 15mi n显色温度：室温显色剂及用量：邻二氮菲 2.00mL4?测量条件入 max=510nm参比溶液：试剂空白吸光度范围： 0.2-0.8三、 仪器：可见分光光度计， 1cm 比色皿、 100mL 容量瓶 1 个， 20mL 移液管 1 支， 50mL 容量瓶 10 个， 10mL 吸量管 1 支， 1mL 吸量管（或移液管） 1 支， 5mL 移液管 1 支， 2mL 移液 管 1 支四、 试剂：① 铁贮备液（ 100 卩 g/mL ）：准确称取 0.7020 克分析纯硫酸亚铁铵 [（NH 4） 2Fe （SO 4） 2 6H 2O]于 100 毫升烧怀中（或 0.8640g 分析纯的 NH 4Fe（SO4） 2 12H2O，其摩尔质量为482.18g/mol）,加50 毫升1+1 H2SO4,完全溶解后，移入1000ml的容量瓶中，并用水稀释到刻度，摇匀，此溶液中Fe的质量浓度为100.0卩g/mLo（实验室准备好）② 铁标准溶液（20.00 ygmL—1） 移取100.0卩 g?mL—1 铁标准溶液20.00mL于100mL容量瓶中，并用蒸馏水稀释至标线，摇匀。

（学生自行配制 ）③ 10% 盐酸羟胺水溶液：（用时配制）④ 0.5% 邻菲罗啉水溶液：配制时加数滴盐酸能助溶液或先用少许酒精溶解，再用水稀释至所需体积临用时配制）或（避光保存，两周内有效） ⑤ HAc-NaAc 缓冲溶液（ pH ? 5.0 ） :称取 40 克纯醋酸铵加到 50 毫升冰醋酸中，加水溶解后 稀释至100 毫升仪器分析实验五、测定步骤：1、标准曲线的绘制：（ 1 ）分别吸取铁的标准溶液0.00 、1.00 、 2.00 、4.00 、 6.00 、 8.00 、10.00ml 于 7 支 50ml 容量瓶中，加水至刻度；（ 2） 依次分别加入 10% 盐酸羟胺溶液 1ml ，混匀，加入 5ml pH ? 5.0 缓冲溶液，摇匀，加 入 0.5%邻菲罗啉溶液 2ml ，摇匀，（ 3） 放置 15 分钟后，在 510nm 波长处，用 1cm 比色皿，以试剂空白作为参比，测定各溶 液的吸光度附 721 型分光光度计操作过程：1. 检查仪器各调节钮的起始位置是否正确，选择波长，并将灵敏度档置第 1 档2. 接通电源，打开开关3 盖上比色皿暗盒盖，用调 100% ”调节器使电表指针处于透过率 100% ”位，打开比色皿暗盒盖，用调 0”调节器使电表指针处于透过率 0”位；预热 20min4. 放入参比溶液及试样溶液5. 校准：拉动吸收池拉杆，使参比溶液置于光路中，打开比色皿暗盒盖，用调 0”调节器使电表指针处于透过率 0”位；盖上比色皿暗盒盖，用调 100% ”调节器使电表指针处于透过率 100%”位。

重复校正至稳定6. 若调 100% ”调节器不能使电表指针处于透过率 100%”位，打开比色皿暗盒盖，则 应放大灵敏度，重新调整直至稳定7. 盖上样品盖，拉动吸收池拉杆，依次将待测溶液推入光路，读出吸光度值 A 连续读数后，立即打开比色皿暗盒盖 ，取出吸收池，参比溶液不取出8. 再放入其他浓度待测溶液，继续调 0”及”100%”，按前面的“校准”步骤重新调整直至稳定，再测量其他浓度待测溶液的吸光度 A9. 测量完毕，取出吸收池，各旋钮置于原来位置，电源开关置于 关”，拔下电源插头10. 比色皿用纯水洗净后倒置于滤纸上晾干4）以吸光度为纵坐标，铁含量（卩 g, 50ml ）为横坐标，用软件（ excel 或 origin ）绘制出 标准曲线编号0#1 #2 #3 #4 #5 #6#V （铁标液） /mL0.001.002.004.006.008.0010.00-1P ( Fe ) / g ? mLA2、试样中铁含量的测定仪器分析实验取 3 只洁净的 50mL 容量瓶，分别加入适量（以吸光度落在工作曲线中部为宜）含铁未知5.00mL , 按步骤（前面步骤 1 标准曲线的绘制）显色，测量吸光度并记录，由线性回的铁含量。

（记录格式参考下表）六. 注意事项试液应方程式求出相应( 1) 显色过程中，每加入一种试剂均要摇匀 2 ) 试样和工作曲线测定的实验条件应保持一致，所以最好两者同时显色同时测定七?思考题1) T 与 A 两者关系如何？分光光度测定时，一般读取为什么？如何控制被测溶液的 A 值在此范围内？A 值，该值在标尺上什么范围好?。