高效液相色谱在药物中的应用.docx

高效液相色谱法在药物分析高效液相色谱法是 20 世纪 70 年代迅速发展起来的一种高 效、快速的新型分析分离技术具有高压、高速、高效、高灵 敏性等优点对于高沸点、热不稳定性差、相对分子质量大的 有机物，都可以用高效液相色谱法进行分离、分析高效液相色谱法测定阿司匹林肠溶片中游离水杨酸含量的方法流动相：乙腈2甲醇20101 mol • l - 1磷酸二氢钾2三乙胺(10 ： 50 : 40 : 011)用磷酸调节pH = 314;检测波长：304 nm;柱温40 °C;流速：1ml・min-1结果：水杨酸农度在01766 5〜61132 mg • L - 1范围内与其峰面积成良好的线性关系，回归方程： Y = 5 02718 + 29 661X, r = 01999 9 高中低 3 个质量浓度的回收率平均值为 10014% ( n = 9) , RSD = 116%结论：本法灵敏度高, 重现性好, 结果准确阿司匹林肠溶片为阿司匹林(乙酰水杨酸) 的肠溶制剂, 阿 司匹林中游离水杨酸含量的高低对制剂质量影响很大乙酰水 杨酸中的游离水杨酸一般是由于在生产中水杨酸乙酰化不完全 而带入的, 也有可能在贮存期中由乙酰水杨酸水解产生。

水杨酸 不仅对人体有毒性, 而且分子中的酚羟基在空气中可逐渐被氧 化成一系列醌型有色物质, 如淡黄、红棕甚至深棕色, 可使乙酰 水杨酸变色对游离水杨酸的量进行控制是保证成品质量的一 个重要技术环节阿司匹林肠溶片现执行标准为国家药品监督管理局国家药 品标准 WS2100012(HD20614) 22002[ 1 ] 及《中国药典》2005 年版二部[ 2 ] , 其中游离水杨酸检查均采用比色法 , 原理是水 杨酸可与高铁盐溶液反应生成紫堇色 , 而乙酰水杨酸不具备酚 羟基, 不与之作用 , 将供试品溶液与一定量水杨酸标准溶液生成 的色泽比较,从而控制水杨酸的限量比色法检查阿司匹林中游 离水杨酸的含量为一限度检查,靠目视比色,由于人眼视力的局 限性及辅料干扰等因素,该方法误差较大为了提高游离水杨酸 检查的灵敏度和准确度,本文采用高效液相色谱法对阿司匹林 肠溶片中的游离水杨酸进行考察高效液相色谱法测定金羚感冒片中阿司匹林含量的方法方法:采用C18色谱柱，甲醇-0.03mol磷酸二氢钾溶液(3070)为流动相，流速为l.OmL.minT,检测波长为280nm结果: 阿司匹林在 147.2~736mg.L-1 之间, 峰面积与质量浓度线性关 系良好(r=0.9998);样品平均回收率为99.08%,RSD为 1.65%(n=5) 。

结论: 该方法简单、快速、结果准确可靠含量测定金羚感冒片是临床常用药物, 为中西药结合复方 制剂, 具有辛凉解表, 清热解毒之功效, 用于伤风感冒及上呼吸 道感染其主要成份为水牛角粉、羚羊角粉、忍冬藤、野菊花、 北豆根、阿司匹林等; 该药具有辛凉解表 , 清热解毒的功效, 适用 于伤风感冒及上呼吸道感染为了有效控制药品质量, 本实验采 用 HPLC 法, 建立金羚感冒片中阿司匹林的含量测定方法材料 SSI高效液相色谱仪(SSI公司)，SSI500检测器,ANASTAR液相色 谱工作站; 色谱柱: 中国科学院大连物理化学研究所 KromasilC18色谱柱(250mm%46mm,5m)阿司匹林对照品(中国 药品生物制品检定所, 批号 110857200203); 金羚感冒片(山东 润华药业有限公司, 批号050405,050706,050108); 甲醇为色谱 纯; 水为二次纯化水; 其他试剂均为分析纯头痛灵胶囊中阿司匹林等的检测I I I 丄 J 11 I 0 5 10 15 G 5 10t/min Hmm佃)对照品 ⑹祥品头痛灵胶握的色谱图1 —咖啡因；2—阿司匹林* 3—普撰帝尔j 4—醋峻注尼松匚5—咄喙美 色谱峰：1 —咖啡因；2—阿司匹林；3—普萘洛尔；4—吲哚美 辛采用高效液相色谱法测定复方乙酰水杨酸片中游离水杨酸 的含量。

色谱柱：DiamonsilTMC18 (4. 6 mm X 250mm, 5p m); 流动相：1%冰醋酸溶液2甲醇(35 : 65);流速：1mL /min;检 测波长：300nm;柱温：30°C结果水杨酸在1~7p g • ml - 1 范围内线性关系良好( r = 0. 999 6) ,平均加样回收率为 99. 89% , RSD为1. 09% ( n = 6)结论：本法简便、快速，结果 准确、可靠, 重复性好, 可用于游离水杨酸的含量测定复方乙酰水杨酸片为卫生部药品标准化学药品及制剂第一 册收载品种，为解热镇痛药，每片含乙酰水杨酸0. 22g、非那西 丁 0. 15g 、咖啡因 0. 035g 乙酰水杨酸生产过程中乙酰化不 完全或贮藏过程中水解产生的水杨酸对人体有毒性 , 是其引起 消化道刺激的主要因素, 故含阿司匹林的各类制剂通常要进行 游离水杨酸检查目前常用对照品化学反应目视比色法判断其 结果, 其原理为利用水杨酸中的酚羟基与高铁反应生成紫堇色 , 与一定量的水杨酸对照液生成的颜色进行比较,该法只能半定 量, 且在对照品溶液与供试品溶液颜色相近时易造成判定误差 本文建立了 HPLC 法测定复方乙酰水杨酸片中游离水杨酸含量 的方法,方法操作简便,结果准确,重复性好。

采用高效液相色谱法测定复方对乙酰氨基酚片中对乙酰 氨基酚、乙酰水杨酸及咖啡因的含量方法:采用 Li.chrospherC(18)(5 |J m,4.6 mm X250 mm) 色谱柱, 以甲醇-水-冰醋酸(40 : 60 : 0. 3) 为流动相, 流速 1.0 ml ・mif(-l),检测波长272 nm,柱温35°C结果:对乙酰氨基 酚线性范围为19.93〜199.32 J g・m「(-l)(r=0.9998),平均回 收率(n=9)为99.2%;乙酰水杨酸线性范围为36.00〜359.96J g・mL,-1)(r=0.9999),平均同收率(n=9)为99.7%;咖啡因线性 范围为 4.90〜49.04 J g ・mL,-1)(r=0.9998),平均同收率(n=9) 为 98.8%结论: 方法简使, 结果准确, 适用于该产品的质量控 制采用高效色谱法测定蒲公英提取物中绿原酸含量方法： 采用 Agilent Zorbax SB C 柱(4.6mmX250mm,5 J m),流动相18为乙腈：0.4%磷酸溶液(10 : 90)，检测波长324 nm，温度30C, 流速l.0 mL -min-1o结果：绿原酸的线性范围为0.040〜0.60 J g(r=0.9992 ),样品的平均加样回收率为96.48% , RSD=1.90%。

结论：采用 HPLC 法测定蒲公英提取物中绿原酸含量的方法快 速、简单、准确，可用于蒲公英提取物中绿原酸含量的测定建立一种高效液相色谱法，用于人血浆中对乙酰氨基酚和 盐酸曲马多浓度的同时测定，并对氨酚曲马多片的 2 种制剂进 行生物等效性研究 方法：血浆样品经液-液萃取，以二羟丙 茶碱为内标，采用Kromasil C H色谱柱(250 mmX4.6 mm, 5 J66m)，以甲醇-0.3%甲酸-0.05 mol • L-1四丁基氯化铵溶液(26: 62：12)为流动相，紫外-荧光检测器串联法同时检测对乙 酰氨基酚与曲马多，紫外检测波长： 245 nm ；荧光激发波长：275 nm,发射波长：304 nm20名健康志愿者服药后，依据血 浆中对乙酰氨基酚与曲马多经时血药浓度，对 2 种制剂进行了 生物等效性研究结果：本法中对乙酰氨基酚最低定量限为0.10p g ・mL-i,线性范围为 0.1000 〜lO.OOp g ・mL-i,日内 RSD 为3.9%〜8.0%,日间RSD为5.5%〜6.7%；曲马多最低定量限为 10.03 ng • mL-i,线性范围为 10.03 〜401.0 ng • mL-i,日内 RSD 为 1.9%〜5.9%，日间 RSD 为 3 . 4% 〜 7 . 3 % 。

受试制剂中对乙酰氨 基酚的相对生物利用度为 (96.1±15.0)%,曲马多的相对生物利 用度为(93.9±15.3)%结论:本方法操作简便、灵敏度高,可 用于临床血药浓度测定受试制剂与参比制剂生物等效。