丹参酮ⅱa在大鼠体内药代动力学及相关机制研究.pdf

中山犬学 博士学位论文丹参酮I I A 在大鼠体内的药代动力学及 相关机制研究博士研究生：导师：专业：毕惠嫦黄民教授药理学缩略词袁英文缩写英文全称T SI I AT a n s h i n o n eI I AU n c h a n g e dT SI I AG l u c u r o n i d c dT SI I AT o t a l T S I I A缩略词表M WM o l e c u l a rw e i g h tL i q u i dc h r o m a t o g r a p h y ·t a n d e mm a s s L C ，M S ，M Ss p e c t r o m e t r yE S IE l e c t r o s p r a yi o n i z a t i o nm ／zM a s st oc h a r g er a t i oT I CT o t a li o nc u r r e n tS R MS e l e c t e dr e a c t i o nm o n i t o r i n gQ CQ u a l i t yc o n t r o ls a m p l e sL L O QL o w e rl i m i t so fq u a n t i f i c a t i o nrC o r r e l a t i o nt o e 箍c i e n tS DS t a n d a r dd e v i a t i o nR S DR e l a t i v es t a n d a r dd e v i a t i o nBR e l a t i v ee l T o ri ．v ．I n t r a v e n o u sa d m i n i s t r a t i o ni ．g ．I n t r a g a s t r i ca d m i n i s t r a t i o ni ．d ．I n t r a d u o d e n a la d m i n i s t r a t i o ni ．p ．I n t r a p e r i t o n e a la d m i n i s t r a t i o nA b s o r p t i o n , d i s t r i b u t i o n ，m e t a b o l i s m ，a n dA D M E e x c r e t i o n爿U CA r e au n d e rt h ec o n c e n t r a t i o n - t i m ec u r v e中文名称丹参酮I I A原型T S I I A( 葡萄糖醛酸) 结合型T SH A总T SI I A ( T SI I A + 葡萄糖醛酸结合型T S I I A )分子量液相色谱一串联质谱电喷雾离子化质荷比总离子流选择反应监测质量控制样品定量下限相关系数标准差相对标准差相对误差静脉内给药灌胃给药十二指肠给药腹腔注射给药吸收、分布、代谢、排泄药物浓度一时间曲线下面积缩略词表A r e au n d e rt h ec h i v et ot h el a s tm e a s u r a b l e 爿U ％^ c o n c e n t r a t i o n彳￡，C ．0 。

∞A r e au n d e rt h ec u r v et oi n f i n i t y％mT i m eo f p e a kp l a s m ac o n c e n t r a t i o nG ⅢP e a kp l a s m ac o n c e n t r a t i o nK et h et e r m i n a lp h a s ee l i m i n a t i o nr a t ec o n s t a n tt v 2H a l f - 1 i f et i m eC LC l e a r a n c e^ 侬TM e a nr e s i d e n c et i m e虼A p p a r e n tv o l u m eo f d i s t r i b u t i o nB AB i o a v a i l a b i l i t yS P I PS i n g l e - p a s si n t e s t i n a lp e r f u s i o nm o d e lP e r m e a b i l i t yc o e f f i c i e n t sb a s e do nd r u g 只Ⅲ∞ d i s a p p e a r a n c ef r o mt h el u m e nP e r m e a b i l i t yc o e f f i c i e n t sb a s e do nd r u gP p t a s m a a p p e a r a n c ei nb l o o dO DO p t i c a ld e n s i t yP a p pA p p a r e n tp e r m e a b i l i t yc o e f f i c i e n tP —g pP —g l y c o p r o t e i nM R PM u l t i d r u gr e s i s t a n c e —a s s o c i a t e dp r o t e i n4 一( 2 - h y d r o x y e t h y l ) l - p i p e r a z i n eH E P E S e t h a n e s u l f o n i ca c i dH B S SH a n k ’sb a l a n c e ds a l ts o l u t i o n3 - ( 4 ，5 一d i m e t h y l t h i a z o - 2 ·y 1 ) ·2 ，5 - d i p h e n y l ·tM T T e t r a z o l i u mb r o m i d eD M E MD u l b e c c o ’sM o d i f i e dE a g l e ’sm e d i u mN E A AN o n e s s e n t i a la m i n oa c i d零至最后可测浓度一时间曲线下面积零至无限时浓度一时间曲线下面积达峰时间达峰浓度末端相消除速率常数半衰期清除率平均驻留时间表观分布容积生物利用度一过式肠灌流模型药物自肠管消失的渗透系数药物吸收进血液的渗透系数光密度表观渗透系数P ．糖蛋白多药耐药相关蛋白4 一羟乙基哌嗪乙磺酸H a n k s 平衡液四甲基偶氮唑盐D M E M 培养基非必需氨基酸缩略词轰F B SB S AT E E RE V O MC Y P 4 5 0N A D P HU D P G AU G TT r i sE D T AD T T‰‰“C 三缸N DN AF e t a lb o v i n es e r u mB o v i n e ；? , c r a ma l b u m i nT r a n s e p i t h e l i a le l e c t r i c a lr e s i s t a n c eE p i t h e l i a lv o l t a m m e t e rC y t o c l l I o m eP 4 5 03 - i c o t i n a m i n ea d e n i n ed i n u c l e o t i d ep h o s p h a t eU D P —直u c u r o I l i ca c i dU D P - g l u c u r o n o s y l t r a n s f e r a s eT r i s m y d r o x y m e t h y ’1 ) a m i n o m e t h a n eE t h y l e n e d i a m i n et e t r a a c e t i ea c i dD i t h i o t h r e i t o lM i c h a e l i sc o n s t a n tM a x i m a lv e l o c i t yI n t r i n s i cc l e a r a n c eN o td e t e c t e dN o ta v a i l a b l e胎牛血清牛血清白蛋白跨上皮细胞电阻上皮细胞电压电流计细胞色素P 4 5 0还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸酯( 还原型辅酶I I )尿苷二磷酸葡萄糖醛酸尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶三羟甲基氨基甲烷乙二胺四乙酸二硫苏糖醇米氏常数最大反应速度内在清除率检测不到数据缺失摘要丹参酮l I A 在大鼠体内的药代动力学及相关机制研究博士研究生：毕惠嫦专业：药理学导师：黄民教授中山大学l 临床药理研究所中山大学药学院药物代谢与药动学实验室摘要丹参酮I I A ( t a n s h i n o n eI I A ，T SI I A ) 是中药丹参根中的脂溶性有效成分，大量药效学研究及临床观察表明具有多种药理作用，如心血管作用、抗肿瘤作用、抗肝纤维化作用、抗白血病作用、抗菌作用等。

相对其大量丰富的药效学研究数据，目前对T SI I A 药代动力学的特征并不十分了解，因此深入研究T SI I A 的药代动力学行为特征和相关机制，对全面了解其吸收特性、分布、代谢、排泄特点，指导T SI I A 的新药研究开发具有重要意义本研究的主要目的是系统地研究T SI I A 在大鼠体内的吸收、分布、代谢、排泄过程，同时利用各种整体、在体、体外实验模型阐明T SI I A 在小肠的吸收特性、肝／肠首过效应对吸收过程的影响、T SI I A 及其结合型是否存在肝肠循环，为T SI I A 的新药开发、为其它丹参酮类化合物的药代动力学研究提供理论依据同时，通过研究参与T SI I A 代谢所涉及的代谢酶以及T SI I A 对细胞色素P 4 5 0酶主要亚型的活性影响，为预测潜在的代谢性相互作用，为临床合理用药提供参考一、大鼠生物样品中T SI I A 分析方法的建立建立并验证生物样品中T SI I A 的灵敏、特异、可靠、线性范围广的检测方法采用乙醚液．液萃取提取生物样品中的T SI I A 和内标氯雷他定，采用液相色摘要谱．串联质谱方法检测离子源为电喷雾离子化源( E s I ) ；检测方式为正离子检测；扫描方式采用选择反应监测( s I t M ) ，用于定量分析的离子反应分别为m ／z2 9 5- - 2 4 9 ( T SI I A ) 和m ／z3 8 3 —2 6 6 ( 氯雷他定) 。

色谱分析柱为H y p e r s i lB D SC i g 柱( 2 ．1 m n l X 5 0 i n l n ，5 l a m ) ；流动相为甲醇一水( 9 0 ：1 0 ，v ／v ) ( 水中含1 ％甲酸) ；流速为3 0 0t x L ／m i n ；每个样品的分析时间为2m i n 分析方法的定量下限为1 ．0n g ／m L ，各生物样品中T SI I A 的线性相关程度良好( ，2 均大于O ．9 9 ) 以质控样品计算该分析方法的批内精密度R S D 在1 ．3 ％～1 3 ．6 ％范围内，批间精密度R S D在1 ．O ％～1 0 ．9 ％范围内；方法的准确度在9 0 ．5 ％～1 1 2 ．1 ％之间；方法的提取回收率在血浆中为6 0 ．2 ％～6 7 ．3 ％，在肝匀浆中为6 8 ．6 ％一7 1 ．4 ％，在尿、胆汁、粪匀浆中为5 0 ．7 ％～6 7 ．5 ％，在H B S S 、肠灌流液、肝微粒体体系中为3 7 ．3 ％～4 9 ．6。