医学微生物学教学课件：第十四章 分枝杆菌属.ppt

第十四章第十四章 分枝杆菌属分枝杆菌属教学目的与要求教学目的与要求（（一）分枝杆菌属共性和种类一）分枝杆菌属共性和种类二）掌握结核分枝杆菌的形态染色、致病物质、（二）掌握结核分枝杆菌的形态染色、致病物质、免疫特点、结核菌素试验与防治原则免疫特点、结核菌素试验与防治原则 （三）麻风分枝的形态、染色和致病性三）麻风分枝的形态、染色和致病性 细长略弯曲的杆菌细长略弯曲的杆菌, ,有有分枝生长分枝生长的趋势的趋势细胞壁含有大量的细胞壁含有大量的脂质脂质抗酸染色抗酸染色（（+））致病性与菌体成分有关，引起的疾病都呈致病性与菌体成分有关，引起的疾病都呈慢性慢性，并伴有，并伴有肉芽肿肉芽肿分枝杆菌分枝杆菌共同特点共同特点分枝杆菌的分类 分类生长特性主要对人致病的分枝杆菌结核分枝杆菌生长缓慢结核分枝杆菌、牛分枝杆菌非结核分枝杆菌Ⅰ组生长缓慢、光产色堪萨斯分枝杆菌、海分枝杆菌Ⅱ组生长缓慢、暗产色瘰疠分枝杆菌Ⅲ组生长缓慢、不产色鸟-胞内分枝杆菌Ⅳ组生长快速、偶发分枝杆菌麻风分枝杆菌人工培养基上不生长第一节第一节 结核分枝杆菌结核分枝杆菌（（Mycobacterium tuberculosis)第二节第二节 麻风分枝杆菌麻风分枝杆菌 (Mycobacterium leprae) 一、生物学性状一、生物学性状 二、致病性二、致病性 三、免疫性三、免疫性 四、微生物学检查法四、微生物学检查法 五、防治原则五、防治原则 主主线线•结核病的病原菌–1882年德国细菌学家 Koch 证明•全球性卫生问题–是艾滋病高发区人群的首要死因•世界防治结核病日–3月24日Mycobacterium tuberculosis1993年年WHO宣布结核病紧急状态，这在宣布结核病紧急状态，这在WHO历史上尚属首次。

历史上尚属首次 一般情况一般情况每秒钟，一个人新感染结核杆菌每秒钟，一个人新感染结核杆菌 世界上三分之一的人目前已感染结核杆菌世界上三分之一的人目前已感染结核杆菌 我国居第二位我国居第二位结核病是传染性疾病中第一号杀手结核病是传染性疾病中第一号杀手Mycobacterium tuberculosis形态与染色形态与染色•细长略弯细长略弯，有时呈，有时呈分枝状；无芽胞、分枝状；无芽胞、鞭毛和荚膜鞭毛和荚膜•抗酸染色阳性抗酸染色阳性一、生物学性状一、生物学性状Mycobacterium tuberculosis★★培养特性培养特性•专性需氧专性需氧•生长缓慢生长缓慢•营营养养要要求求高高（（罗罗氏培养基）氏培养基）•不发酵糖类不发酵糖类一、生物学性状一、生物学性状Mycobacterium tuberculosis★★•耐干燥耐干燥：黏附在尘埃上保持传染性：黏附在尘埃上保持传染性8－－10 d，， 在干燥的痰液中可存活在干燥的痰液中可存活6－－8个月。

个月•耐酸碱耐酸碱：：3％％盐酸、盐酸、6％％硫酸、硫酸、4％％氢氧化钠作氢氧化钠作 用用30 min不受影响不受影响•耐一般消毒剂耐一般消毒剂：对：对1:13000的孔的孔雀绿有抵抗力雀绿有抵抗力 三耐三耐抵抗力抵抗力一、生物学性状一、生物学性状Mycobacterium tuberculosis★★•怕湿热怕湿热：：液体中液体中6262－－63℃1563℃15分钟或煮沸分钟或煮沸 •怕紫外线怕紫外线：：直接日光照射数小时即被杀灭直接日光照射数小时即被杀灭•怕酒精、石炭酸、来苏儿怕酒精、石炭酸、来苏儿•怕抗痨药怕抗痨药四怕四怕Mycobacterium tuberculosis抵抗力抵抗力一、生物学性状一、生物学性状★★•毒力变异：毒力变异： 牛型结核杆菌经牛型结核杆菌经13年年230代培养，制成卡介苗代培养，制成卡介苗（减毒活菌苗），广泛用于预防接种减毒活菌苗），广泛用于预防接种•L型变异：型变异： 结核杆菌经青霉素、环丝氨酸、溶菌酶、异烟结核杆菌经青霉素、环丝氨酸、溶菌酶、异烟肼作用变成肼作用变成L L型结核菌。

型结核菌•耐药性变异：耐药性变异： MDRTBMycobacterium tuberculosis变异性变异性一、生物学性状一、生物学性状★★致病因素致病因素•无内毒素、无外毒素、无侵袭性酶无内毒素、无外毒素、无侵袭性酶•脂质脂质：：：：索状因子索状因子 磷脂磷脂 蜡质蜡质D D 硫酸脑苷脂硫酸脑苷脂•蛋白质蛋白质•多糖多糖二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性Mycobacterium tuberculosis★★•结核菌素结核菌素（（tuberculin））：：诱发机体产生诱发机体产生抗体，但无保护作用，与蜡质抗体，但无保护作用，与蜡质D一起注入一起注入体内引起变态反应体内引起变态反应•分分枝杆菌生长素枝杆菌生长素（（mycobictin）：）： 将环境中的铁转运到菌体内与宿主机体将环境中的铁转运到菌体内与宿主机体竞争铁Mycobacterium tuberculosis二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性所致疾病所致疾病•肺部感染：原发感染肺部感染：原发感染 继发感染继发感染•肺外感染：脑、肾、骨、关节、生殖器官等肺外感染：脑、肾、骨、关节、生殖器官等 全身播散性结核全身播散性结核 消化道结核消化道结核 皮肤结核皮肤结核二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性Mycobacterium tuberculosis结核杆菌结核杆菌结核杆菌结核杆菌豚鼠豚鼠豚鼠豚鼠皮下注射皮下注射皮下注射皮下注射再再再再 次次次次1010－－－－14d14d局部溃烂不愈，局部溃烂不愈，局部溃烂不愈，局部溃烂不愈，附近淋巴结肿大，细菌附近淋巴结肿大，细菌附近淋巴结肿大，细菌附近淋巴结肿大，细菌扩散至全身扩散至全身扩散至全身扩散至全身结核杆菌结核杆菌结核杆菌结核杆菌皮下注射皮下注射皮下注射皮下注射豚鼠豚鼠豚鼠豚鼠局部迅速产生浅溃烂局部迅速产生浅溃烂局部迅速产生浅溃烂局部迅速产生浅溃烂，易愈合。

易愈合免疫和变态反应免疫和变态反应免疫和变态反应免疫和变态反应Mycobacterium tuberculosis二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性结核菌素蛋白结核菌素蛋白蜡质蜡质D机体（巨噬细胞机体（巨噬细胞移动抑制因子被移动抑制因子被激活）激活）注注 入入产生变态反应产生变态反应不产生免疫不产生免疫结核杆菌结核杆菌rRNA注注 入入机体（结核杆菌机体（结核杆菌生长抑制因子被生长抑制因子被激活）激活）产生免疫产生免疫不产生变态反应不产生变态反应完整结核杆菌完整结核杆菌注注 入入激活以上两种激活以上两种细胞因子细胞因子产生免疫产生免疫产生变态反应产生变态反应Mycobacterium tuberculosis二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性细胞免疫细胞免疫：：属属传染免疫传染免疫（（infection immunity），），又叫带又叫带菌免疫菌免疫，即只有结核杆菌在体内才会有免疫力，一旦体，即只有结核杆菌在体内才会有免疫力，一旦体内结核菌被杀灭，免疫也随之消失内结核菌被杀灭，免疫也随之消失 致敏致敏T T淋巴细胞淋巴细胞：： 杀死有结核杆菌的靶细胞，同时释放多杀死有结核杆菌的靶细胞，同时释放多种淋巴因子，吸引种淋巴因子，吸引NK、、T、、Mφ等聚集炎症部位，增强等聚集炎症部位，增强这类细胞的直接或间接杀菌活性。

这类细胞的直接或间接杀菌活性 Mφ：：吞噬消化、抑制繁殖、阻止扩散甚至彻底消灭吞噬消化、抑制繁殖、阻止扩散甚至彻底消灭以细胞免疫为主以细胞免疫为主Mycobacterium tuberculosis二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性★★超敏反应超敏反应 结结核核分分枝枝杆杆菌菌的的蛋蛋白白质质与与蜡蜡质质D共共同同刺刺激激T淋淋巴巴细细胞，形成胞，形成迟发型超敏反应迟发型超敏反应状态 体体内内致致敏敏的的T淋淋巴巴细细胞胞再再次次遇遇到到结结核核分分枝枝杆杆菌菌时时，，即即释释放放出出淋淋巴巴因因子子，，引引起起强强烈烈的的迟迟发发型型超超敏敏反反应应，，形形成成以以单单核核细细胞胞浸浸润润为为主主的的炎炎症症反反应应，，容容易易发发生生干干酷酷样样坏死，甚至液化形成空洞坏死，甚至液化形成空洞 Mycobacterium tuberculosis二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性★★•是应用结核菌素进行皮肤试验来测定机体对是应用结核菌素进行皮肤试验来测定机体对结核杆菌是否能引起变态反应的一种试验结核杆菌是否能引起变态反应的一种试验结核菌素实验结核菌素实验Mycobacterium tuberculosis★★•旧结核菌素旧结核菌素（（old tuberculin，，OT）：）：主要成分是通过将结核主要成分是通过将结核菌接种于甘油肉汤培养基中，培菌接种于甘油肉汤培养基中，培养养4-84-8周加热浓缩过滤而成。

周加热浓缩过滤而成•纯蛋白衍化物纯蛋白衍化物（（purified protein derivative，，PPD））: : OT纯三氯纯三氯醋酸过滤而成醋酸过滤而成试剂试剂Mycobacterium tuberculosis常规试验：常规试验：OT或或PPD 5单位单位皮内注射皮内注射前臂内侧前臂内侧硬结直径硬结直径48－－72h方法方法Mycobacterium tuberculosis•阳性：阳性：0.5-1.5cm：：Ø感染过结核杆菌，或感染过结核杆菌，或BCG接种成功接种成功•强阳性：＞强阳性：＞1.5cm：：Ø可能有活动性结核病可能有活动性结核病•阴性：阴性：＜＜ 0.5cm：：Ø未感染过结核；未感染过结核；Ø感染初期；感染初期；Ø老年人；老年人；Ø严重结核患者或正患有其他传染病；严重结核患者或正患有其他传染病；Ø获得性细胞免疫低下者获得性细胞免疫低下者意义意义Mycobacterium tuberculosis★★•选择卡介苗接种效果或免疫效果的测定选择卡介苗接种效果或免疫效果的测定•婴幼儿结核病诊断的参考婴幼儿结核病诊断的参考•测定肿瘤患者的非特异性细胞免疫功能。

测定肿瘤患者的非特异性细胞免疫功能•未接种卡介苗人群中结核病的流行病学调查未接种卡介苗人群中结核病的流行病学调查应用应用Mycobacterium tuberculosis★★三、微生物学检查三、微生物学检查•标本取材标本取材•涂片染色镜检涂片染色镜检：：抗酸染色抗酸染色•培养法：培养法：罗氏固体培养基罗氏固体培养基•动物试验动物试验•细菌学基因诊断细菌学基因诊断：：PCR•抗体诊断抗体诊断Mycobacterium tuberculosis★★四、特异性防治四、特异性防治•卡介苗预防卡介苗预防–接种对象：新生儿和结核菌素试验阴性的儿童接种对象：新生儿和结核菌素试验阴性的儿童–免疫时间：免疫时间：3-5年年•药物治疗药物治疗–早期、联合、足量、规范使用抗结核药物常早期、联合、足量、规范使用抗结核药物常用药物有异烟肼、利福平、链霉素、对氨水杨用药物有异烟肼、利福平、链霉素、对氨水杨酸、乙胺丁醇等酸、乙胺丁醇等Mycobacterium tuberculosis★★下列细菌中繁殖最慢的是：下列细菌中繁殖最慢的是：A.A.大肠埃希菌大肠埃希菌 B.B.丙型链球菌丙型链球菌 C.C.脑膜炎奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌 D.D.结核分枝杆菌结核分枝杆菌 E.E.肺炎链球菌肺炎链球菌结核分枝杆菌常用的培养基是：结核分枝杆菌常用的培养基是：A.A.沙保弱培养基沙保弱培养基 B.B.罗氏培养基罗氏培养基 C.C.疱肉培养基疱肉培养基 D.D.巧克力色培养基巧克力色培养基 E.E.亚碲酸钾培养基亚碲酸钾培养基细胞壁含脂类最多的细菌是：细胞壁含脂类最多的细菌是：A.A.结核分枝杆菌结核分枝杆菌 B.B.白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌 C.C.衣氏放线菌衣氏放线菌 D.D.霍乱弧菌霍乱弧菌 E.E.幽门螺杆菌幽门螺杆菌不以内毒素或外毒素为致病物质的细菌是：不以内毒素或外毒素为致病物质的细菌是：A.A.白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌 B.B.炭疽杆菌炭疽杆菌 C.C.结核分枝杆菌结核分枝杆菌 D.D.绿脓假单胞杆菌绿脓假单胞杆菌 E.E.布氏杆菌布氏杆菌第一节第一节 结核分枝杆菌结核分枝杆菌（（Mycobacterium tuberculosis)第二节第二节 麻风分枝杆菌麻风分枝杆菌 (Mycobacterium leprae) 一、生物学性状一、生物学性状 二、致病性二、致病性 三、免疫性三、免疫性 四、微生物学检查法四、微生物学检查法 五、防治原则五、防治原则 主主线线•麻风病的病原菌麻风病的病原菌: : 慢性传染病慢性传染病•世界各地均有报道世界各地均有报道 主要分布在亚、非和拉丁美洲主要分布在亚、非和拉丁美洲•主要侵犯神经、皮肤与黏膜主要侵犯神经、皮肤与黏膜, ,晚期侵犯晚期侵犯晚期可侵入深部晚期可侵入深部组织和脏器，形成肉芽肿组织和脏器，形成肉芽肿，，，，家庭内传播多见家庭内传播多见Mycobacterium leprae形态与染色形态与染色•细长略弯曲细长略弯曲•无芽胞，无荚膜，无鞭毛无芽胞，无荚膜，无鞭毛•抗酸染色阳性抗酸染色阳性•典型的胞内寄生菌典型的胞内寄生菌泡沫细胞（麻风细胞）泡沫细胞（麻风细胞）•唯一不能人工培养的细菌唯一不能人工培养的细菌Mycobacterium leprae★★Mycobacterium leprae致病致病 结核样型麻风结核样型麻风瘤型麻风瘤型麻风 界线类麻风界线类麻风★★微生物学诊断微生物学诊断•显微镜检查显微镜检查•PCRMycobacterium leprae麻风分枝杆菌的特性不包括：麻风分枝杆菌的特性不包括：A.A.抗酸染色阳性抗酸染色阳性 B.B.专性需氧，在人工培养基中生长缓慢专性需氧，在人工培养基中生长缓慢 C.C.胞内寄生胞内寄生 D.D.以家庭内传播多见以家庭内传播多见 E.E.患者标本中有麻风细胞，有诊断和鉴别意义患者标本中有麻风细胞，有诊断和鉴别意义第十五章第十五章 嗜血杆菌属嗜血杆菌属教学目的与要求教学目的与要求掌握流感嗜血杆菌的形态、染色、培养特性、所掌握流感嗜血杆菌的形态、染色、培养特性、所致疾病及预防致疾病及预防 。

嗜血杆菌属嗜血杆菌属（（Haemophilus）） 流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌（（H. influenzae）） 杜克嗜血杆菌（杜克嗜血杆菌（H. ducreyi）） 埃及嗜血杆菌埃及嗜血杆菌（（H. aegyptius）） 副流感嗜血杆菌副流感嗜血杆菌（（H. parainfluenzae）） 嗜沫嗜血杆菌嗜沫嗜血杆菌（（H. aphrophilus）） 溶血性嗜血杆菌溶血性嗜血杆菌（（H. paraphrophilus）） * * * * 原发感染原发感染：引起：引起急性化脓性感染急性化脓性感染 化脓性脑膜炎、鼻咽炎、咽喉会厌炎、心包炎化脓性脑膜炎、鼻咽炎、咽喉会厌炎、心包炎 化脓性关节炎等，严重的引起菌血症，以化脓性关节炎等，严重的引起菌血症，以小儿小儿 多见 * 继发感染继发感染：：多是多是内源性感染内源性感染，，以成人多见以成人多见流行性感冒流行性感冒麻疹麻疹百日咳百日咳结核病结核病继发于继发于临床表现临床表现慢性支气管炎慢性支气管炎慢性支气管炎慢性支气管炎中耳炎中耳炎中耳炎中耳炎鼻窦炎鼻窦炎鼻窦炎鼻窦炎流感嗜血杆菌所致疾病流感嗜血杆菌所致疾病 ：：★★H. influenzae一、生物学性状一、生物学性状 G－－小杆菌，多形性，有毒菌株形成荚膜小杆菌，多形性，有毒菌株形成荚膜★★培养基中需加入血液，以提供培养基中需加入血液，以提供X因子和因子和V因子因子 （巧克力色培养基）（巧克力色培养基） X因子因子- -血红素血红素 V因子因子 - -辅酶辅酶Ⅰ或辅酶或辅酶Ⅱ 菌落光滑、无色透明、露滴状菌落光滑、无色透明、露滴状 CO2培养培养 “卫星现象卫星现象”H. influenzae一、生物学性状一、生物学性状★★抵抗力抵抗力：弱，对热和干燥均敏感：弱，对热和干燥均敏感根根据据荚荚膜膜抗抗原原分分ABCDEF六六型型，，B型型毒毒力力最最强强可产生自溶酶可产生自溶酶H. influenzae一、生物学性状一、生物学性状荚膜荚膜：抗吞噬：抗吞噬菌毛菌毛：黏附、定植：黏附、定植内毒素内毒素：致病作用尚不清：致病作用尚不清IgA蛋白酶蛋白酶：水解：水解sIgA H. influenzae二、致病性二、致病性该菌较广泛地寄居于正常人呼吸道该菌较广泛地寄居于正常人呼吸道 冬季带菌率较高冬季带菌率较高 本病遍布世界各国本病遍布世界各国 4-18月龄儿童发病率最高，脑膜炎多见月龄儿童发病率最高，脑膜炎多见体液免疫为主体液免疫为主H. influenzae二、致病性二、致病性★★标本标本标本标本（痰液、脑脊液、鼻咽分泌物、血液和脓液）（痰液、脑脊液、鼻咽分泌物、血液和脓液）（痰液、脑脊液、鼻咽分泌物、血液和脓液）（痰液、脑脊液、鼻咽分泌物、血液和脓液）涂片染色镜检涂片染色镜检涂片染色镜检涂片染色镜检分离培养分离培养分离培养分离培养G-杆菌杆菌多形性多形性鉴定试验鉴定试验鉴定试验鉴定试验“ “卫星现象卫星现象卫星现象卫星现象” ”报告结果报告结果报告结果报告结果b b b b型抗原检测型抗原检测型抗原检测型抗原检测核酸检测核酸检测核酸检测核酸检测-PCR-PCR-PCR-PCR检流感嗜血杆菌检流感嗜血杆菌检流感嗜血杆菌检流感嗜血杆菌检出病原体检出病原体检出病原体检出病原体H. influenzae三、微生物学检查三、微生物学检查选用广谱抗生素选用广谱抗生素治疗治疗预防预防 荚膜多糖菌苗荚膜多糖菌苗H. influenzae四、防治四、防治★★流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌共同孵育，流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌共同孵育，可促进其生长，主要因为，金黄色葡萄球可促进其生长，主要因为，金黄色葡萄球菌能产生下列何种物质：菌能产生下列何种物质：A.XA.X因子因子 B.YB.Y因子因子 C.ZC.Z因子因子 D.VD.V因子因子 E.ME.M因子因子如何提高流感嗜血杆菌的阳性率：如何提高流感嗜血杆菌的阳性率：A.A.初次培养应置于初次培养应置于5%-10%5%-10%的的CO2CO2环境　环境　B.B.在培养基中添加在培养基中添加X X、、V V因子　因子　C.C.用巧克力平板培养　用巧克力平板培养　D.D.在培养基中添加某些抗生素以抑制杂菌　在培养基中添加某些抗生素以抑制杂菌　E.E.以上均是以上均是流感嗜血杆菌不引起：流感嗜血杆菌不引起：A.A.流行性感冒流行性感冒 B.B.化脓性脑膜炎化脓性脑膜炎 C.C.鼻咽炎鼻咽炎 D.D.化脓性关节炎化脓性关节炎E.E.心包炎心包炎。