【最新】实验九 双波长分光光度法测定复方制剂含量.doc

实验九 双波长分光光度法测定复方制剂含量实验目的：1、掌握双波长分光光度法消除干扰的原理和波长选择原则2、掌握紫外-标准对照法测定药物含量及计算方法 3、熟悉紫外分光光度仪的构造和使用操作实验原理：复方磺胺嘧啶片系由磺胺嘧啶和甲氧苄啶组成的复方制剂两者在紫外区有较强的吸收在盐酸溶液（9→1000）中，磺胺嘧啶在 308nm 处有吸收，而甲氧苄啶在此波长处无吸收，故可在此波长处直接测定磺胺嘧啶的吸收度而求得含量甲氧苄啶在 277.4nm 波长处有较大吸收，而磺胺嘧啶在 277.4nm 处与 308nm 处有等吸收点故可采用双波长法以277.4nm 为测定波长，308nm 为参比波长，测定甲氧苄啶在该两波长处的ΔA（ΔA=A277nm-A308nm）值来计算含量复方氨基比林注射液又称安痛定注射液，系氨基比林、安替比林和巴比妥组成的复方制剂，采用双波长分光光度法测定安替比林的含量根据巴比妥在酸性溶液中不呈解离状态，而无明显紫外吸收；安替比林在 233nm 处有较强的吸收；氨基比林在 233nm 和 268nm处有等吸收，选择安替比林的吸收峰波长 233nm 为测定波长 λ1，氨基比林的等吸收波长268nm 为参比波长 λ2，则△A =A233nm-A268nm 只与安替比林的浓度有关，而巴比妥、氨基比林及其他辅料不干扰测定。

实验器材：试药：磺胺嘧啶对照品，甲氧苄啶对照品，复方磺胺嘧啶片，安替比林对照品，安痛定注射液仪器：紫外分光光度仪，石英比色皿，100mL 容量瓶，移液管实验内容与方法：（一）复方磺胺嘧啶片（Compound Sulfadiazine Tablets）本品每片中含磺胺嘧啶（C10H10N4O2S）应为 0.360~0.440g；含甲氧苄啶（C14H18N4O3）应为 45.0~55.0mg[处方] [含量测定] 磺胺嘧啶 取本品 10 片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于磺胺嘧啶 0.2g），置100mL 量瓶中，加 0.4%氢氧化钠溶液适量，振摇使磺胺嘧啶溶解，并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液 2mL，置另一 100mL 量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，照分光光度法（附录），在 308nm 的波长处测定吸收度；另取 105℃干燥至恒重的磺胺嘧啶对照品适量，精密称定，加盐酸溶液（9→1000）溶解并定量稀释制成每 1mL 中约含 40μg 的溶液，同法测定；计算，即得甲氧苄啶 精密称取上述研细的细粉适量（约相当于甲氧苄啶 40mg），置 100mL 量瓶中，加冰醋酸 30mL 振摇使甲氧苄啶溶解，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；另精密称取甲氧苄啶对照品 40mg 与磺胺嘧啶对照品约 0.3g，分置 100mL 量瓶中，各加冰醋酸 30mL 溶解，加水稀释至刻度，摇匀，前者作为对照品溶液（1），后者滤过，取续滤液作为对照品溶液（2）。

精密量取供试品溶液与对照品溶液（1）、（2）各 5mL，分置 100mL 量瓶中，各加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，照分光光度法测定取对照品溶液（2）的稀释液，以 308.0nm 为参比波长 λ1，在 277.4nm 波长附近（每间隔0.2nm）选择等吸收点波长为测定波长（λ2），要求 ΔA=Aλ2-Aλ1=0再在 λ2 和 λ1波长处分别测定供试品溶液的稀释液与对照品溶液（1）的稀释液的吸收度，求出各自的吸收度差值（ΔA），计算，即得二）、复方氨基比林注射液（Compound Aminopyrine Injection）本品每 1mL 注射液中含氨基比林（C13H17N3O）应为 47.5～52.5mg，含安替比林（C11H12N2O）应为 18.0～22.0mg，含巴比妥（C8H12N2O3）应为 8.55～9.45mg[处方][含量测定] 精密量取本品注射液 1mL，用 0.1mol/L 盐酸稀释至 100mL，摇匀，精密量取此液 2mL，用 0.1mol/L 盐酸稀释至 100mL，摇匀，即得供试液另精密称取安替比林对照品约 0.08g，用 0.1mol/L 盐酸溶解并稀释至 100mL，摇匀，精密量取此液 1mL，用 0.1mol/L 盐酸稀释至 100mL。

摇匀，即得对照液 （约为 8μg/mL）实验注意事项：1. 石英比色皿的正确使用和吸收度校正2. 吸收度读数三次，取平均值计算含量3. 读数后及时关闭光闸以保护光电管4. 片剂取样量应是根据平均片重和片剂规格量，计算出来的相当于规定量主药的片粉重量（片粉重量=平均片重 / 标示量×规定的取样量）5. 片剂的含量计算（相当于标示量的百分含量）根据药品获得的难易情况，任选一个内容进行实验实验报告：实验结束后，书写实验报告。