临床检验技师微生物不发酵菌及检验讲义.docx

第二十章不发酵菌及检验（不发酵G杆菌）本章内容概述假单胞菌属（一）铜绿假单胞菌（二）嗜麦芽窄食单胞菌不动杆菌属、产碱杆菌属、黄杆菌属、莫拉菌属军团菌属不发酵菌概述不发酵或仅氧化形式利用葡萄糖的革兰阴性无芽胞杆菌；大部分为专性需氧菌包括13个属大多为条件致病菌除不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌及个别假单胞菌外，氧化酶试验均为阳性氧化-发酵（O-F）试验是确定非发酵菌与发酵菌以及测定非发酵菌是否利用糖的基本试验麦康凯琼脂上：假单胞菌属、不动杆菌属、产碱杆菌属等生长，而莫拉菌属和艾肯菌属等不生长假单胞菌属绿绿假单胞菌一一生物学特性形态与结构形态：细长杆菌染色：Go特殊结构：无芽胞，无荚膜有1〜3根鞭毛，运动活泼培养特性宫养要求：不图气体环境：专性需氧温度环境：最适 35 C, 4c不生长菌落特点:普通琼脂平板：圆形大小不一，边缘不整齐、扁平、隆起、光滑湿润且常呈融合状态 的菌落血液琼脂平板：扁平、湿润、有特殊气味的灰绿色或蓝绿色菌落，有金属光泽；周围有透明溶血环选择培养基：（麦康凯琼脂培养基）微小无光泽半透明菌落，48h菌落中心常呈棕绿色SS琼脂培养基）类似沙门菌的菌落，稍久菌落可呈棕绿色产生的主要色素：①绿脓素，为蓝绿色，无荧光性；②绿色荧光素。

绿绿假单胞菌一一微生物检验及鉴定 标本采集：根据病情采集相应的临床标本 形态学检查分离培养：依据菌落特征、色素（约 10曲株不产生色素）、气味等以及涂片染色结果生化试验（鉴定）M类发酵试验氧化酶触酶硝酸盐还明胶液化尿素水解.口引味 试验枸檬酸盐利硫化氢试验试验原试验试验试验用试验试验“解葡萄糖、木糖，+++++-+-产酸小产气耐药性具有多重耐药初代敏感的菌株在治疗3〜4d后可能发生耐药亚胺培南耐药主要原因之一是产生金属酶铜绿假单胞菌一一致病性及临床意义俗称绿脓杆菌是医院感染的主要病原体之一引起的局部感染常见于烧伤或创伤后，亦可引起中耳炎、角膜炎、尿道炎和下呼吸道感染，甚至引起心内膜炎、肺炎，严重者可引起败血症，死亡率甚高假单胞菌属嗜麦芽窄食单胞菌革兰阴性杆菌端鞭毛1〜8根，有动力、无芽胞、无荚膜菌落不溶血，有黄色素氧化酶阴性，葡萄糖缓慢氧化，可水解七叶甘、液化明胶、DNAB阳性并可使赖氨酸脱竣不动杆菌属球杆状，并成对排列，可单个存在无芽胞、无鞭毛专性需氧菌三阴”：即氧化酶阴性，硝酸盐还原试验阴性和动力阴性临床重要的为醋酸钙不动杆菌、鲍曼不动杆菌和洛菲不动杆菌产碱杆菌属G短杆菌，有时呈弧状，单个、成对或链状排列。

无芽胞，多数菌株无荚膜，本菌属菌为周毛菌需氧，液体培养基中浑浊生长，表面形成菌膜，管底形成黏液沉淀；含有蛋白月东的肉汤中产氨，使pH上升可至8.6 ;普通培养基上生长良好氧化酶、触酶均阳性，不分解糖类， O/F培养基中呈碱性反应，尿素、硫化氢、口引喋、明胶液化均阴性人肠道及皮肤正常菌群、条件致病菌，引起医院感染黄杆菌属G杆菌无动力、无芽胞、无荚膜血平板上典型菌落呈淡黄色、黄色或棕黄色氧化酶、触酶、磷酸酶阳性芳香黄杆菌、脑膜炎败血性黄杆菌较常见莫拉菌属G杆菌，具有多形性营养要求较高，最适生长温度为32-35 Co氧化酶阳性，触酶阳性，无动力，不分解任何糖类，口引喋试验阴性可从人类或温血动物体内检出是导致中耳炎、鼻窦炎、支气管炎和肺炎的病原体军团菌属一一生物学特性形态与结构形态：杆菌染色：G；常规染色不易着色特殊结构：有端生或侧生鞭毛无芽胞、无荚膜、有菌毛培养特性宫养要求：苛亥“气体环境：专性需氧在含有2.5%〜5% CO环境中生长良好温度环境：最适 36 C o菌落特点：初次分离需 L-半胱氨酸，培养基中含铁盐可促进生长活性炭-酵母浸出液琼脂（BCYE培养基：培养 3〜5d形成圆形，凸起、灰白色、有光泽的菌落。

抗原具有0、H抗原，H抗原无特异性，抗原具有特异性抵抗力人工管道的水源中常存在此菌，如医院空调冷却水中常有此菌，对常用化学消毒剂敏感军团菌属一一微生物检验及鉴定标本采集：下呼吸道分泌物、胸水、肺组织及血液等形态学检查：意义不大分离培养：培养难度大分离培养后的菌落进行革兰染色镜检，进行生化试验也可利用PC叱术及荧光抗体染色进行鉴定生化试验（鉴定）糖类发酵试验氧化酶试验触酶试验不分解糖类部分++血清学诊断检测军团菌抗体IgG、IgM军团菌属一一致病性及临床意义可引起军团病，主要由嗜肺军团菌导致轻症型类似流感，患者有发热、头痛、无力等症状重症型是以肺部感染为主要特征，常导致多器官 损害，最终导致呼吸衰竭死亡经典例题铜绿假单胞菌培养特性为A. 专性需氧B. 专性厌氧C. 兼性厌氧D. 微需氧E.需 5唳 10%CO『正确答案』 A『答案解析』铜绿假单胞菌为专性需氧菌具有绿脓素的微生物是A. 军团菌B. 铜绿假单胞菌C. 肺炎克雷伯杆菌D. 流感嗜血杆菌E. 肺炎链球菌『正确答案』 B『答案解析』铜绿假单胞菌产生的主要色素包括：①绿脓素，为蓝绿色，可溶于水和氯仿，无荧光性； ②荧光素为绿色荧光素，溶于水而不溶于氯仿。

铜绿假单胞菌的生物学特性不包括A. 革兰阴性杆菌8.1 〜3根鞭毛，运动活泼C. 最适生长温度为35℃D. 在培养基上形成有特殊气味的绿色菌落E.在SS琼脂培养基上不生长『正确答案』 E『答案解析』铜绿假单胞菌在SS琼脂培养基上可形成类似沙门菌的菌落，稍久菌落可呈棕绿色患者男， 35 岁右眼被刺伤 3 天后，患眼红肿、疼痛、视物不清、角膜溃疡，伴大量的淡绿色分泌物最有可能的致病菌是A. 葡萄球菌B. 链球菌C. 铜绿假单胞菌D. 需氧芽胞杆菌E. 阿米巴『正确答案』 C『答案解析』铜绿假单胞菌引起的局部感染常见于烧伤或创伤后，亦可引起中耳炎、角膜炎、尿道炎和下呼吸道感染其产生的主要色素包括：①绿脓素；②荧光素患者男， 45 岁，烧伤对其伤口分泌物进行细菌培养在血平皿上形成扁平、湿润、灰绿色、透明溶血的菌落最可能的细菌是A. 金黄色葡萄球菌B. 大肠埃希菌C. 铜绿假单胞菌D. 鲍曼不动杆菌E. 化脓性链球菌『 正确答案』 C『答案解析』铜绿假单胞菌引起的局部感染常见于烧伤或创伤后，其产生的主要色素包括：①绿脓素；⑷火光系O初次分离需要L-半胱氨酸的细菌是A.肺炎链球菌B.大肠埃希菌C.金黄色葡萄球菌D.铜绿假单胞菌E.军团菌『正确答案』E『答案解析』军团菌营养要求较苛刻，且生长缓慢，初次分离需L-半胱氨酸，培养基中含铁盐可促进生长。

军团菌的传播途径是A.接触传播B.呼吸道传播C.输血传播D.性接触传播E.粪-口传播『正确答案』B『答案解析』军团菌的传播途径是呼吸道传播患者男，70岁临床诊断肺炎痰培养结果提示：革兰阴性杆菌，氧化酶阴性，无动力，硝酸盐还原 试验阴性最有可能是A.肺炎克雷伯菌B.流感嗜血杆菌C.铜绿假单胞菌D.不动杆菌E.肺炎支原体『正确答案』D『答案解析』不动杆菌属的生物学特征为“三阴”，即氧化酶阴性，硝酸盐还原试验阴性和动力阴性铜绿假单胞菌与醋酸钙不动杆菌的区别试验为A.触酶试验B.氧化酶试验C.葡萄糖OF试验D.在普通肉汤中生长E.在麦康凯培养基上生长『正确答案』B『答案解析』铜绿假单胞菌氧化酶阳性，醋酸钙不动杆菌氧化酶阴性。