生物 第4章 现代生物技术章末整合提升同步备课 北师大版选修1.ppt

章末整合提升第4章　现代生物技术知识系统构建规律方法整合内容索引热点考题集训知识系统构建全能性脱分化植物激素MS接种带电性质大小匀浆电泳染色引物复性延伸琼脂糖凝胶电泳必背要语必背要语1.植物组织培养就是在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，最终诱导产生愈伤组织、丛芽或完整植株的技术2.植物组织培养中常用的基本培养基有MS培养基、怀特培养基、N6培养基等其中N6培养基常用于花药的组织培养3.电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离4.同工酶是指催化相同的化学反应而酶蛋白的分子结构、理化性质乃至免疫学性质不同的一组酶5.DNA片段的PCR扩增可以利用PCR热循环仪完成，而产物的检测则利用琼脂糖凝胶电泳进行6.PCR原理：DNA热变性原理，PCR每次循环都包括变性、复性和延伸三步规律方法整合整合一　组织培养中污染的预防1.污染有两种类型污染有两种类型(1)细菌污染菌斑呈黏液状，界限比较明显，一般接种后1～2天即能发现主要是大肠杆菌和链球菌，一般是由接种人员造成的。

2)真菌污染菌斑呈绒毛状、絮状，界限不明显，伴有不同颜色的孢子，接种后3～10天才能发现主要是霉菌污染，可能是植物材料灭菌不当造成的2.预防措施预防措施(1)防止外植体带菌①选择好外植体采集时期和采集部位外植体采集以春秋为宜，优先选择地上部分作为外植体，阴雨天勿采，晴天下午采，采前喷杀虫剂、杀菌剂或套塑料袋②在室内或无菌条件下进行预培养③外植体严格消毒2)保证培养基及接种器具彻底灭菌①分装时，注射器勿与瓶接触，培养基勿粘瓶口②检查封口膜是否有破损③扎瓶口要位置适当、松紧适宜④保证灭菌时间和高压锅内温度⑤接种工具用前彻底灭菌⑥工作服、口罩、帽子等布质品定期进行湿热灭菌3)操作人员严格遵守无菌操作规程如一定要规范着装，操作过程中不说话等4)保证接种与培养环境清洁①污染瓶经高压灭菌后再清洁②接种环境定期熏蒸消毒、紫外灯照射或用臭氧灭菌和消毒③定期对培养室消毒、防止高温例例1　关于接种时应注意的事项，全部正确的为①接种室要消毒　 ②无菌操作　③接种时可以谈话　 ④外植体如茎段、茎尖可随机放入培养基　⑤接种时要防止交叉污染　 ⑥接种完立刻盖好瓶口A.①②③④ B.①②③④⑤⑥C.③④⑤⑥ D.①②⑤⑥解解析析　　整个接种过程必须在无菌条件下进行，不能谈话，防止呼吸产生污染。

因此操作过程应禁止谈话，并戴口罩；接种的外植体放入培养基时注意将形态学下端插入，而且分布均匀，不能随机放入，以保证必要的营养面积和光照条件答案解析整合二　PCR技术、蛋白质分离之间的比较项目PCR技术蛋白质分离实验原理利用DNA热变性原理体外扩增DNA依据相对分子质量的大小分离蛋白质实验过程变性→复性→延伸样品处理及粗分离→凝胶色谱操作→变性胶电泳实验结果获得大量DNA相对分子质量不同的蛋白质得以分离实验意义解决了DNA研究中材料不足的问题为蛋白质的研究和利用提供了原材料例例2　　如图是PCR技术示意图，请据图回答下列问题：答案(1)标准的PCR过程一般分为 、 、 三大步骤2)引物是此过程中必须加入的物质，从化学本质上来说，引物是一小段 3)将双链DNA ，使之变性，从而导致 4)引物延伸需提供 作为原料。

变性复性延伸单链DNA或RNA加热到94 ℃双链DNA解开形成两条单链四种脱氧核苷酸整合三　DNA体内复制与体外复制(PCR)的比较PCR技术是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，与细胞内DNA复制的过程相比既有相同点又有不同点，通过列表比较的方法准确掌握两者的异同，是防止此类问题出错的重要措施细胞内DNA复制与体外DNA扩增(PCR)的比较：项目细胞内DNA复制PCR不同点解旋在解旋酶作用下边解旋边复制95 ℃高温解旋、双链完全分开酶解旋酶、DNA聚合酶Taq DNA聚合酶引物RNA一般为单链DNA能量ATPdNTP温度体内温和条件高温循环次数受生物自身控制三十多次相同点①需提供DNA复制的模板②四种脱氧核苷酸作原料③子链延伸的方向都是从5′端到3′端④都需要酶的催化例例3　PCR过程与细胞内的DNA复制过程相比，主要有两点不同，它们是①PCR过程需要的引物一般是人工合成的单链DNA②PCR过程不需要DNA聚合酶　③PCR过程中 DNA的解旋不依靠解旋酶，而是通过对反应温度的控制来实现的　④PCR过程中，DNA不需要解旋，直接以双链DNA为模板进行复制A.③④ B.①②C.①③ D.②④答案解析热点考题集训1.对于操作后出现培养物被污染的情况，正确的叙述是①可立即打开培养瓶，进行清洗　②先将所有被污染的培养瓶统一放在高压蒸汽锅内进行高压蒸汽灭菌，然后再打开培养瓶，进行清洗　③按要求操作一定不出现培养物被污染　④细菌污染可能是由接种人员未戴口罩、接种时说话等引起的　⑤真菌污染可能是植物材料灭菌不当引起的A.②③⑤ B.②③④⑤C.①③④⑤ D.②④⑤答案解析23451789106√√2.在菊花的组织培养操作完成了3～4天后，观察同一温室中的外植体，发现有的瓶中外植体正常生长，有的瓶中外植体死亡，你认为外植体死亡的原因不可能是A.接种时培养基灭菌不彻底B.接种工具灼烧后未待冷却就接种外植体C.培养时每日用日光灯照12 hD.培养过程中保持温度、pH的适宜，但没有及时调整各种营养物质、激素的 比例解析　解析　菊花的组织培养过程中需每日用日光灯照12 h，这不会造成外植体死亡。

答案解析23451789106√√3.菊花的组织培养需要严格的无菌操作，下列说法不正确的是A.对培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌B.幼苗要先移植到消过毒的蛭石或者珍珠岩等环境下生活一段时间C.用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长，一旦感染 杂菌则前功尽弃D.将菊花茎段插入时应注意方向，不应倒插，是为了防止杂菌污染解解析析　　将菊花茎段插入时，要注意形态学上端朝上，而不应倒插，是因为生长素的运输为极性运输，倒插的菊花茎段不能形成愈伤组织，而不是为了防止杂菌污染答案解析√√234517891064.已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种物质，其分子大小、电荷的性质和数量情况如右图所示下列叙述正确的是A.将样品装入透析袋中透析12 h，若分子乙保留在 袋内，则分子甲也保留在袋内B.若五种物质为蛋白质，则用凝胶色谱柱分离时，甲的移动速度最快C.将样品以2 000 r/min的速度离心10 min，若分子戊存在于沉淀中，则分 子丙也存在于沉淀中D.若五种物质为蛋白质，用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品中的蛋白 质分子，则分子甲和分子戊形成的电泳带相距最近答案解析23451789106√√5.仔细观察下图，所带负电荷最少的球蛋白是答案解析23451789106A.α1－球蛋白 B.α2－球蛋白C.β－球蛋白 D.γ－球蛋白解解析析　　对于几种球蛋白来说直径相差不大，引起泳动速度的差异主要来自于所带电荷多少，由图可知球蛋白由右向左泳动，因右侧为负极。

且γ－球蛋白距点样处最近，所以γ－球蛋白所带负电荷最少√√6.下图a、b、c均为PCR扩增的DNA片段，下列有关说法正确的是答案23451789106解析A.片段a、b、c的长度均相同B.片段a、b只是第一次循环的产物C.片段c最早出现在第二次循环的产物中D.经过30次循环后，片段c的数量为230√√7.下列关于DNA聚合酶催化合成DNA子链的说法中，正确的是A.以DNA为模板，使DNA子链从5′端延伸到3′端的一种酶B.Taq DNA聚合酶必须在每次高温变性处理后再添加C.DNA聚合酶能特异性地复制整个DNA的全部序列D.Taq DNA聚合酶是从深海中的某种菌体内发现的解解析析　　DNA聚合酶不能从头开始催化合成DNA，引物的5′端与母链发生碱基互补配对，然后从引物的3′端延伸子链，所以，整条子链的合成是从5′端延伸到3′端；Taq DNA聚合酶能耐高温，所以在反应体系中可反复利用，无需另外再添加；PCR扩增的是引物之间的固定长度的DNA序列；Taq DNA聚合酶是1966年从美国黄石公园的一个热泉内的某种菌体内发现的23451789106答案解析√√8.如图表示PCR技术扩增DNA分子的过程中，DNA聚合酶作用的底物，据图分析正确的是23451789106A.图中A为引物，是一种单链RNA分子B.图中B为DNA模板链，F端为3′末端C.PCR技术中通过控制温度来实现DNA双链的解旋和结合D.DNA聚合酶无需引物也能将单个脱氧核苷酸连接成DNA片段答案解析√√9.辣椒素作为一种生物碱广泛应用于食品保健、医药工业等领域。

辣椒素的获得途径如图，据图回答下列问题：答案23451789106(1)图中①和②分别表示辣椒组织培养中细胞的 和_______过程解解析析　　由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化，或者叫做去分化对脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，其又可重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化脱分化(或去分化)再分化解析(2)图中培养外植体的培养基中常用的凝固剂是 培养基中的生长素用量和细胞分裂素用量的比值 (填“高”或“低”)时，有利于芽的分化对培养基彻底灭菌时，应采取的灭菌方法是 答案23451789106琼脂低高压蒸汽灭菌解解析析　　培养基中常用的凝固剂是琼脂使用生长素和细胞分裂素时，两者用量的比值影响植物细胞的发育方向生长素用量和细胞分裂素用量的比值低时，有利于芽的分化；比值高时，有利于根的分化；比值适中时，促进愈伤组织的形成培养基应用高压蒸汽灭菌法灭菌解析答案23451789106(3)图中外植体的消毒所需酒精的体积分数是 。

解析　解析　外植体消毒所用酒精的体积分数是70%70%解析10.H7N9型禽流感是全球首次发现的新亚型RNA流感病毒引起的，目前最为快速有效的检测手段是RT－PCR核酸检测RT－PCR的过程包括逆转录作用从RNA合成cDNA，再以cDNA为模板进行扩增，过程如下图所示据此分析下列问题：23451789106(1)传统PCR技术的原理是 ，过程中低温复性的含义是_______ 23451789106答案DNA复制引物与模板链互补配对(2)在RT－PCR中每一步都有酶的参与，下图中过程1中的关键酶是______ ；PCR中的关键酶是 ，该酶的作用特点是 、 。

23451789106答案逆转录酶Taq DNA聚合酶(DNA聚合酶)耐高温不能从头合成DNA，只能从3′端延伸DNA链答案(3)在对病毒核酸进行检测时，主要通过RT－PCR扩增其关键的基因序列，这时引物的设计就非常关键，根据下图分析，请你选择合适的引物： 23451789106引物Ⅰ和引物Ⅱ。