
分子生物学08RNA转录后加工.doc
2页第八章 转录后加工概念:基因转录的直接产物被称为初级转录物初级转录物一般是无功能的,它们在细胞内必须经历一些结构和化学的变化即所谓的转录后加工以后才会有功能转录后加工可能是RNA的功能所必需的,也可能提供基因表达调控的一种手段ó RNA所能经历的后加工方式可达10种以上,但后加工反应的本质要么是增减一些核苷酸序列,要么是修饰某些特定的核苷酸原核细胞mRNA前体的后加工ó 在细菌,mRNA很少有后加工但某些噬菌体mRNA会发生最简单的剪切反应,将一个多顺反子切割成单顺反子,也有某些噬菌体的mRNA需要经过相对复杂的剪接反应才能成熟(如T4噬菌体编码的胸苷酸合酶)真核细胞mRNA前体的后加工* 加工形式 1) 5′-端 = 加帽 2) 3′-端 = 加尾 3) 内部 = 剪接 4) 内部=甲基化 5) 编码区=编辑加帽过程及帽子的性质和类型、帽子的功能P190-192为什么只有只有mRNA和某些snRNA加帽? P192加尾 尾巴的功能和性质 加尾反应所需要的顺式作用元件P193图8-6加尾反应所需要的反式作用因子:CPSF,CFI,CF2,PABP核酶的概念:是指本质为RNA或以RNA为主含有蛋白质辅基的一类具有催化功能的物质。
GT-AG法则及其剪切模式 重点:细胞核mRNA前体拼接的机理 索马套结构剪切体的成分:选择剪接 反式剪接Ⅱ类内含子的剪接结构特点(1) 边界序列为5′↓GUGCG……YnAG↓;(2) 有6个茎环结构; 有分支点顺序(branch-point seguence) (3) ORF Ⅱ类内含子的剪接机制• 无需鸟苷的辅助,但需镁离子的存在• 分枝点A的2′-OH对5′端交界处的磷酸二酯键发动亲核进攻,产生了套索(lariat)结构;• 切下的外显子1其3′-OH继续对内含子3′端的交界序列进行亲核进攻,同时释放出套索状的内含子mRNA前体的编辑* 定义 任何发生在转录后RNA编码区内的序列变化* 主要类型 1) 尿苷酸的插入 2) C→U(哺乳动物的Apo B-48) 3) A→I(哺乳动物谷氨酸受体的一个亚基)* 机制 1) gRNA 2) 特殊的脱氨酶* 意义 1) 提高遗传信息的容量 2) 创造终止密码子和起始密码子编辑的意义P205rRNA前体的后加工* 原核生物 -剪切、修剪和修饰* 真核生物 1)剪切、修剪和修饰 (需要snoRNA) 2)剪接 (某些真核生物,如四膜虫)tRNA前体的后加工* 原核生物 1) 剪切和修剪 2) 修饰 3) 添加CCA (如何需要)* 真核生物 1) 剪切和修剪 2) 修饰 3) 添加CCA 4) 剪接(某些真核生物)核糖核酸酶 P –一种真正的核酶ó 发现者-Sidney Altman (为1989年诺贝尔化学奖得主) ó 结构与功能 1)一种核酸内切酶–参与tRNA前体5′-端的后加工 2) 大肠杆菌核糖核酸酶 P: 14kDa的多肽链 + 一种 377核苷酸长的RNA ( M1 RNA)。
3) 在高浓度的Mg2+下,分离的M1 RNA能单独剪切大肠杆菌的tRNA前体核糖核酸酶P中的多肽链提高 M1 RNA的剪切速率,允许它在生理Mg2+浓度下起作用 已发现的核酶C 种类 1) 原核生物的核糖核酸酶P 2) 第一类内含子 3) 第二类内含子 4) 大肠杆菌的23S rRNA——催化肽键的形成 5) 锤头结构核酶(某些植物病毒) 6) 参与剪接的snRNA C 特征C 意义——生命起源(RNA世界) 本章重点1.名词解释:拼接体,顺式原件,反式因子,RNA编辑,反式编辑,核糖核酸酶P2. GU-AG规则及其拼接机理 3.内含子的归巢现象 4. 真核生物mRNA加工的主要内容 5.真核细胞核rRNA前体的后加工 6.原核细胞rRNA前体的后加工 7.四膜虫rRNA前体的自我剪接 8.核酶的概念及种类。
