生物化学实验：准备柱层析.ppt
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ØDEAE52DEAE52离子交换树脂层析准备（制离子交换树脂层析准备（制E E3 3）：）： 装装柱柱：：先先除除死死体体积积本本实实验验使使用用DEAE52DEAE52离离子子交交换换树树脂脂，，把把柱柱内内装装1/3 1/3 5mmol/L 5mmol/L pH6.0pH6.0磷磷酸酸起起始始缓缓冲冲液液，，把把柱柱子子垂垂直直固固定定（（调调流流速速小小于于2ml/min2ml/min））；；（（调调流流速速同同时时，，将将DEAE52DEAE52离离子子交交换换树树脂脂用用起起始始缓缓冲冲液液搅搅匀匀后后连连续续加加入入，，柱柱内内的的DEAE52DEAE52离离子子交交换换树树脂脂应应非非常常均均匀匀地地分分布布，，防防止止出出现现截截面面和和气气泡泡，，床床面面要要平平整整，，床床高高至至黑黑色标记处色标记处；；用起始缓冲液洗柱用起始缓冲液洗柱, ,控制好流速控制好流速平平衡衡：：用用5mmol/L pH6.0的的磷磷酸酸起起始始缓缓冲冲液液平平衡衡( (流流速速1ml/min)1ml/min)，，6 6个以上柱体积个以上柱体积( (约约35ml),35ml),连接仪器连接仪器: :连接连接紫外检测器紫外检测器( (与柱相连与柱相连) )与记录仪，并调试与记录仪，并调试 ①① 透过率透过率 T为为 095②② 0.5A 调吸光度调吸光度005检测仪后面调检测仪后面调 280nm 档位档位流动相要下进上出流动相要下进上出 三、走纸记录仪三、走纸记录仪②②电源开关电源开关③③走纸速度走纸速度 6cm/h ④④量程量程 100mV⑤⑤调零调零 ⑦⑦开始测量开始测量⑥⑥放下记录笔放下记录笔①①与紫外连接与紫外连接 。
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