医学微生物学：6支原体、立克次体、衣原体和螺旋体.ppt

医学微生物学医学微生物学Medical Microbiology（第六讲：支原体、衣原体、螺旋体、立克次体）（第六讲：支原体、衣原体、螺旋体、立克次体）§支原体支原体 §衣原体衣原体 •第一部分　沙眼衣原体第一部分　沙眼衣原体•第二部分　肺炎衣原体　第二部分　肺炎衣原体　§螺旋体螺旋体•第一部分　钩端螺旋体第一部分　钩端螺旋体 •第二部分　梅毒螺旋体第二部分　梅毒螺旋体§立克次体立克次体 目目 录录支原体支原体 无细胞壁、多形性、能通过除菌滤器、能营独立生活最小的原核细无细胞壁、多形性、能通过除菌滤器、能营独立生活最小的原核细胞型微生物胞型微生物一、一、分类地位：分类地位： 支原体目支原体目 支原体科支原体科 支原体属支原体属 MycoplasmaMycoplasma 脲原体属脲原体属 UreaplasmaUreaplasma 二、生物学性状二、生物学性状n n体积微小：体积微小：体积微小：体积微小：0.20.20.20.2～～～～0.3 0.3 0.3 0.3 μ μm m m m，，，，可通过滤菌器可通过滤菌器可通过滤菌器可通过滤菌器n n无细胞壁，多形性无细胞壁，多形性无细胞壁，多形性无细胞壁，多形性n nDNADNADNADNA＋＋＋＋RNARNARNARNAn n二分裂为主，出芽繁殖二分裂为主，出芽繁殖二分裂为主，出芽繁殖二分裂为主，出芽繁殖n nGiemsaGiemsaGiemsaGiemsa染色染色染色染色n培养：培养： 营养要求高＋胆固醇营养要求高＋胆固醇 生长慢，菌落小，生长慢，菌落小，0.10.1～～0.5 mm0.5 mm 油煎蛋样菌落油煎蛋样菌落支原体与支原体与L L型细菌的区别型细菌的区别支原体支原体L L型细菌型细菌u自然界中广泛存在自然界中广泛存在 u绝大多数生长需胆固醇绝大多数生长需胆固醇u在遗传上与细菌无关，且无论在遗传上与细菌无关，且无论在什么条件下也不能变成细菌在什么条件下也不能变成细菌u菌落较小，菌落较小，0.10.1～～0.3mm0.3mmu自然界很少存在自然界很少存在 u生长不一定需要胆固醇生长不一定需要胆固醇u在遗传上与原菌相关，并可在在遗传上与原菌相关，并可在诱导因素去除后回复为原菌诱导因素去除后回复为原菌u菌落稍大，菌落稍大，0.50.5～～1.0mm1.0mm三、致病性三、致病性n肺炎支原体：原发性非典型性肺炎（间质性肺炎）肺炎支原体：原发性非典型性肺炎（间质性肺炎）n解脲脲原体：非细菌性尿道炎解脲脲原体：非细菌性尿道炎 男：尿道炎、不育男：尿道炎、不育 女：胎儿早产、不孕、低体重儿女：胎儿早产、不孕、低体重儿§支原体支原体 §衣原体衣原体 •第一部分　沙眼衣原体第一部分　沙眼衣原体•第二部分　肺炎衣原体第二部分　肺炎衣原体　　§螺旋体螺旋体•第一部分　钩端螺旋体第一部分　钩端螺旋体•第二部分　梅毒螺旋体第二部分　梅毒螺旋体§立克次体立克次体 目目 录录衣原体衣原体（（chlamydiachlamydia））n n严格细胞内寄生、有独特发育周期严格细胞内寄生、有独特发育周期严格细胞内寄生、有独特发育周期严格细胞内寄生、有独特发育周期的原核细胞型微生物。

的原核细胞型微生物n n种与亚种：种与亚种：种与亚种：种与亚种：沙眼衣原体沙眼衣原体沙眼衣原体沙眼衣原体 沙眼生物亚种沙眼生物亚种沙眼生物亚种沙眼生物亚种 性病淋巴肉芽肿亚种性病淋巴肉芽肿亚种性病淋巴肉芽肿亚种性病淋巴肉芽肿亚种 鼠亚种鼠亚种鼠亚种鼠亚种　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　肺炎衣原体肺炎衣原体肺炎衣原体肺炎衣原体鹦鹉热衣原体鹦鹉热衣原体鹦鹉热衣原体鹦鹉热衣原体兽类衣原体兽类衣原体兽类衣原体兽类衣原体n n发育周期发育周期发育周期发育周期u原体原体（（elementary body, EBelementary body, EB））: : 感染性感染性，小而致密，小而致密u始体始体（（initial bodyinitial body））/ /网状体网状体（（reticulate reticulate body,RBbody,RB））: : 繁殖体繁殖体，大而疏松，大而疏松EB EB EB EB 原体原体原体原体RB RB RB RB 网状体网状体网状体网状体包涵体包涵体 易感细胞内含繁殖易感细胞内含繁殖的始体和子代原体的空泡的始体和子代原体的空泡沙眼衣原体沙眼衣原体（（Chlamydia trachomatis））一、一、沙眼沙眼生物生物亚种亚种（一）生物学性状（一）生物学性状§汤飞凡汤飞凡19561956年，鸡胚卵黄囊接种法首次分离年，鸡胚卵黄囊接种法首次分离§1414个血清型个血清型（二）所致疾病（二）所致疾病 1.1.沙眼沙眼§眼眼------眼，眼眼，眼------手手------眼眼§沙眼生物亚种沙眼生物亚种A A、、B B、、BaBa和和C C血清型血清型§感染眼结膜上皮细胞感染眼结膜上皮细胞→→增殖，包涵体增殖，包涵体→→局部炎症局部炎症→→早期流泪、早期流泪、有黏液脓性分泌物、结膜充血及滤泡增生有黏液脓性分泌物、结膜充血及滤泡增生→→后期结膜瘢痕、后期结膜瘢痕、眼睑内翻、倒睫以及角膜血管翳引起的角膜损害眼睑内翻、倒睫以及角膜血管翳引起的角膜损害→→影响视力影响视力或致盲或致盲2.2.包涵体结膜炎包涵体结膜炎( ( 成人、婴儿）成人、婴儿）§由沙眼生物亚种由沙眼生物亚种B B、、BaBa、、D D、、DaDa、、E E、、F F、、G G、、H H 、、I I、、IaIa、、J J及及K K血清型引起血清型引起§婴儿婴儿——产道传染产道传染§成人同沙眼成人同沙眼3.3.泌尿生殖道感染泌尿生殖道感染 （（STDSTD））§性接触性接触§血清型与包涵体结膜炎相同血清型与包涵体结膜炎相同 包涵体结膜炎包涵体结膜炎（三）免疫性（三）免疫性§抗体持续时间短抗体持续时间短§免疫力不强，易再受感染免疫力不强，易再受感染（四）微生物学检查法（四）微生物学检查法§直直接接涂涂片片镜镜检检 采采用用GiemsaGiemsa、、碘碘液液或或荧荧光光抗抗体体染染色色镜镜检检，，检检查查上上皮皮细细胞内有无包涵体。

胞内有无包涵体§分离培养分离培养 接种鸡胚卵黄囊或传代细胞接种鸡胚卵黄囊或传代细胞§核酸检测核酸检测 （五）防治原则（五）防治原则§注意个人卫生，不用公共毛巾、脸盆等注意个人卫生，不用公共毛巾、脸盆等§无特异预防方法无特异预防方法二、性病淋巴肉芽肿亚种（二、性病淋巴肉芽肿亚种（LGV LGV ））§血清型（血清型（L L1 1、、L L2 2、、L L2a2a及及L L3 3））§致病性致病性u所致疾病：性病淋巴肉芽肿所致疾病：性病淋巴肉芽肿u传染源：人传染源：人u传播途径：性接触传播途径：性接触u致病过程：致病过程：ü男性：腹股沟淋巴结男性：腹股沟淋巴结→→化脓性淋巴结炎和慢性淋巴肉芽肿化脓性淋巴结炎和慢性淋巴肉芽肿→→瘘管瘘管ü女性：会阴、肛门和直肠女性：会阴、肛门和直肠→→肠皮肤瘘管，会阴肠皮肤瘘管，会阴- -肛门肛门- -直肠狭窄和直肠狭窄和梗阻梗阻§支原体支原体 §衣原体衣原体 •第一部分　沙眼衣原体第一部分　沙眼衣原体•第二部分　肺炎衣原体第二部分　肺炎衣原体　　§螺旋体螺旋体•第一部分　钩端螺旋体第一部分　钩端螺旋体•第二部分　梅毒螺旋体第二部分　梅毒螺旋体§立克次体立克次体 目目 录录肺炎衣原体肺炎衣原体（（Chlamydia pneumoniae）） §只有一个血清型：只有一个血清型：TWARTWAR株株§传染源：人传染源：人§传播途径：呼吸道传播途径：呼吸道§所致疾病：呼吸道感染，肺炎为主所致疾病：呼吸道感染，肺炎为主. . 可能与冠心病和心肌梗塞有关可能与冠心病和心肌梗塞有关§支原体支原体 §衣原体衣原体 •第一部分　沙眼衣原体第一部分　沙眼衣原体•第二部分　肺炎衣原体　第二部分　肺炎衣原体　§螺旋体螺旋体•第一部分　钩端螺旋体第一部分　钩端螺旋体•第二部分　梅毒螺旋体第二部分　梅毒螺旋体§立克次体立克次体 目目 录录螺旋体螺旋体(spirochete)§一类细长、柔软、螺旋状、运动活泼的原核细胞型微生物一类细长、柔软、螺旋状、运动活泼的原核细胞型微生物§基本结构与细菌相似，例如有细胞壁、原始核质，以二分裂方式繁基本结构与细菌相似，例如有细胞壁、原始核质，以二分裂方式繁殖和对抗生素等药物敏感等殖和对抗生素等药物敏感等 螺旋体的科和属螺旋体的科和属螺旋体螺旋体 引起人类疾病引起人类疾病 病原体病原体螺旋体科螺旋体科密螺旋体属密螺旋体属( (TreponemaTreponema) ) 梅毒梅毒 苍白密螺旋体苍白亚种苍白密螺旋体苍白亚种疏螺旋体属疏螺旋体属( (BorreliaBorrelia) ) 莱姆病莱姆病 伯氏疏螺旋体伯氏疏螺旋体 流行性回归热流行性回归热 回归热疏螺旋体回归热疏螺旋体 钩端螺旋体科钩端螺旋体科钩端螺旋体属钩端螺旋体属( (LeptospiraLeptospira) ) 钩端螺旋体病钩端螺旋体病 问号状钩端螺旋体问号状钩端螺旋体n螺旋细密、规则，形似细小珍珠排螺旋细密、规则，形似细小珍珠排列的细链。

一端或两端呈钩状运列的细链一端或两端呈钩状运动活泼动活泼, ,常使菌体呈常使菌体呈C C、、S S或或8 8字型字型n革兰染色阴性，不易着染革兰染色阴性，不易着染nFontanaFontana镀银染色法镀银染色法→→染成棕褐色染成棕褐色n运动活泼运动活泼 – 内鞭毛内鞭毛（一）形态与染色（一）形态与染色一、生物学性状一、生物学性状钩端螺旋体（钩端螺旋体（Leptospira ））n营养要求复杂，常用营养要求复杂，常用KorthofKorthof培养基培养基n适宜生长温度为适宜生长温度为2828～～30℃30℃n钩端螺旋体在人工培养基中生长缓慢钩端螺旋体在人工培养基中生长缓慢n需氧或微需氧需氧或微需氧（二）培养（二）培养（三）抵抗力（三）抵抗力n热抵抗力弱，热抵抗力弱，60℃1min60℃1min即死亡即死亡n0.2%0.2%来苏、来苏、1%1%石炭酸经石炭酸经1010～～30min30min被杀灭被杀灭n对青霉素敏感对青霉素敏感n在湿土或水中可存活数月在湿土或水中可存活数月（四）致病性与免疫性（四）致病性与免疫性1.1.致病物质致病物质------类似细菌内毒素与外毒素类似细菌内毒素与外毒素n内毒素样物质内毒素样物质(ELS)(ELS)或称脂多糖样物质或称脂多糖样物质(LLS)(LLS)n溶血素溶血素 n细胞毒性因子细胞毒性因子(CTF) (CTF) n细胞致病作用细胞致病作用(CPE)(CPE)物质物质2.2.所致疾病所致疾病钩端螺旋体病钩端螺旋体病--------一种人畜共患传染病一种人畜共患传染病n传染源传染源u鼠类和猪鼠类和猪n传播途径传播途径u接触疫水或疫土接触疫水或疫土，，，，经黏膜或破损皮肤进入经黏膜或破损皮肤进入u经胎盘垂直传播经胎盘垂直传播n临床表现临床表现u先形成先形成钩体血症钩体血症u损伤全身毛细血管内皮细胞及肝、肾、肺心及中枢神经损伤全身毛细血管内皮细胞及肝、肾、肺心及中枢神经u可出现休克、可出现休克、DICDIC、黄疸、出血、心肾功能不全、脑膜炎等、黄疸、出血、心肾功能不全、脑膜炎等 3.3.免疫性免疫性n疾病后可获得抗同型钩体的持久免疫力疾病后可获得抗同型钩体的持久免疫力n体液免疫为主体液免疫为主（五）微生物学检查法（五）微生物学检查法1.1.病原体检测病原体检测n标本标本 u发病发病1010天内取血液天内取血液;1;1周后取尿液周后取尿液; ;有脑膜刺激者取脑脊液有脑膜刺激者取脑脊液n直接镜检直接镜检n分离与鉴定分离与鉴定 接种至接种至KorthofKorthof培养基，置培养基，置28℃28℃孵育。

孵育u阳阳性性标标本本：：在在2 2周周内内可可见见培培养养液液呈呈轻轻度度混混浊浊→→暗暗视视野野显显微微镜镜检检查查→→有有→→则用已知诊断血清鉴定其血清群和血清型则用已知诊断血清鉴定其血清群和血清型u阴性标本阴性标本: :分离培养连续观察分离培养连续观察4 4个月，仍无生长者个月，仍无生长者n动物接种动物接种n分子生物学方法分子生物学方法 2.2.血清学诊断血清学诊断n标本标本 病初和发病后第病初和发病后第3 3～～4 4周各采血清一次有脑膜刺激症状者采取周各采血清一次有脑膜刺激症状者采取脑脊液脑脊液n方法方法: :u显微镜凝集试验显微镜凝集试验(MAT)(MAT)u间接凝集试验间接凝集试验 ü以乳胶以乳胶 ( (聚苯乙烯聚苯乙烯) )或活性炭微粒为载体或活性炭微粒为载体ü吸附钩端螺旋体可溶性抗原作为指示物吸附钩端螺旋体可溶性抗原作为指示物（六）防治原则（六）防治原则n防鼠、灭鼠，加强对带菌家畜的管理防鼠、灭鼠，加强对带菌家畜的管理n在常年流行地区，对易感人群和与疫水接触者宜接种包含当地流行在常年流行地区，对易感人群和与疫水接触者宜接种包含当地流行株在内的多价钩端螺旋体疫苗株在内的多价钩端螺旋体疫苗§支原体支原体 §衣原体衣原体 •第一部分　沙眼衣原体第一部分　沙眼衣原体•第二部分　肺炎衣原体第二部分　肺炎衣原体 §螺旋体螺旋体•第一部分　钩端螺旋体第一部分　钩端螺旋体•第二部分第二部分　　梅毒螺旋体梅毒螺旋体§立克次体立克次体 目目 录录梅毒螺旋体梅毒螺旋体 T. pallidum（苍白密螺旋体苍白亚种）（苍白密螺旋体苍白亚种）n8 8～～1414个致密而规则的小螺旋，个致密而规则的小螺旋，两两端尖直端尖直，运动活泼，运动活泼n革兰染色阴性，不易着染革兰染色阴性，不易着染nFontanaFontana镀银染色法镀银染色法→→染成棕褐色染成棕褐色一、生物学性状一、生物学性状（一）形态与染色（一）形态与染色n不能在无活细胞的人工培养基中生长繁殖不能在无活细胞的人工培养基中生长繁殖n在家兔上皮细胞培养中能有限生长，繁殖慢在家兔上皮细胞培养中能有限生长，繁殖慢（二）培养（二）培养（三）抵抗力（三）抵抗力－极弱－极弱n对温度和干燥特别敏感。

对温度和干燥特别敏感n对常用化学消毒剂亦敏感，对常用化学消毒剂亦敏感，1%1%～～2%2%石炭酸内数分钟就死亡石炭酸内数分钟就死亡n对青霉素、四环素、红霉素或砷剂均敏感对青霉素、四环素、红霉素或砷剂均敏感二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性（一）致病物质（一）致病物质§外膜蛋白外膜蛋白§透明质酸酶透明质酸酶§宿主细胞纤维粘连蛋白覆于表面宿主细胞纤维粘连蛋白覆于表面（二）所致疾病（二）所致疾病------梅毒梅毒 （（STDSTD））§人是梅毒的唯一传染源人是梅毒的唯一传染源§获得性梅毒获得性梅毒 性接触传播性接触传播§先天性梅毒先天性梅毒 母体母体→→胎盘胎盘→→胎儿胎儿 获得性梅毒获得性梅毒nⅠⅠ期（初期）梅毒期（初期）梅毒：感染性极强，破坏性小：感染性极强，破坏性小u感染后感染后3 3周左右局部出现无痛性硬下疳，多见于外生殖器，一般周左右局部出现无痛性硬下疳，多见于外生殖器，一般4 4～～8 8周后，周后，常自愈nⅡⅡ期梅毒期梅毒：感染性强，破坏性小：感染性强，破坏性小u发生于硬下疳出现后发生于硬下疳出现后2 2～～8 8周苍白亚种螺旋体血症，全身皮肤、黏膜常有周。

苍白亚种螺旋体血症，全身皮肤、黏膜常有梅毒疹，全身淋巴结肿大，有时亦累及骨、关节、眼及其他脏器梅毒疹，全身淋巴结肿大，有时亦累及骨、关节、眼及其他脏器nⅢⅢ期期( (晚期晚期) )梅毒梅毒：感染性小，破坏性大：感染性小，破坏性大u发发生生于于感感染染2 2年年以以后后，，亦亦可可长长达达1010～～1515年年的的病病变变可可波波及及全全身身组组织织和和器器官官基基本本损损害害为为慢慢性性肉肉芽芽肿肿，，局局部部组组织织坏坏死死损损害害常常进进展展和和消消退退交交替替出出现现皮皮肤、肝、脾和骨骼常被累及，可危及生命肤、肝、脾和骨骼常被累及，可危及生命ⅠⅠ期（初期）梅毒期（初期）梅毒 ⅡⅡ期梅毒期梅毒 ⅢⅢ期期( (晚期晚期) )梅毒梅毒 先天性梅毒（胎传梅毒）先天性梅毒（胎传梅毒）n多发生于妊娠多发生于妊娠4 4个月之后个月之后n引起胎儿的全身性感染，导致流产、早产或死胎；引起胎儿的全身性感染，导致流产、早产或死胎；n出生梅毒儿，呈现马鞍鼻、锯齿形牙、间质性角膜炎、先天性耳聋出生梅毒儿，呈现马鞍鼻、锯齿形牙、间质性角膜炎、先天性耳聋等特殊体征等特殊体征（三）免疫性（三）免疫性n感染性免疫感染性免疫n细胞免疫比体液免疫重要细胞免疫比体液免疫重要三、微生物学检查法三、微生物学检查法（一）标本（一）标本nⅠⅠ期梅毒期梅毒--------硬下疳渗出液硬下疳渗出液nⅡⅡ期梅毒期梅毒--------梅毒疹渗出液或局部淋巴结抽出液梅毒疹渗出液或局部淋巴结抽出液（二）显微镜检查（二）显微镜检查n非特异性：非密螺旋体抗原试验非特异性：非密螺旋体抗原试验u抗原抗原( (正常牛心肌的心脂质正常牛心肌的心脂质)→)→血清中的反应素血清中的反应素( (抗脂质抗体抗脂质抗体) )u方法方法:VDRL:VDRL和和RPRRPR试验。

适用于大量过筛试验适用于大量过筛n特异性：密螺旋体抗原试验特异性：密螺旋体抗原试验u抗原（抗原（NicholsNichols株螺旋体）株螺旋体）→→螺旋体特异抗体螺旋体特异抗体u优点：特异性强，可用作梅毒证实试验优点：特异性强，可用作梅毒证实试验u常用方法：常用方法：FTA-ABSFTA-ABS试验和试验和MHA-TPMHA-TP试验试验（三）血清学诊断（三）血清学诊断四、防治原则四、防治原则n加强性卫生教育和严格社会管理加强性卫生教育和严格社会管理n梅毒确诊后，宜用青霉素等药物及早予以彻底治疗梅毒确诊后，宜用青霉素等药物及早予以彻底治疗§支原体支原体 §衣原体衣原体 •第一部分　沙眼衣原体第一部分　沙眼衣原体•第二部分　肺炎衣原体第二部分　肺炎衣原体 　　§螺旋体螺旋体•第一部分　钩端螺旋体第一部分　钩端螺旋体•第二部分　梅毒螺旋体第二部分　梅毒螺旋体§立克次体立克次体 目目 录录立克次体（立克次体（rickettsia））n细胞内寄生细胞内寄生n二分裂繁殖二分裂繁殖nGiemsaGiemsa 染色染色n节肢动物可成为寄生宿主、储节肢动物可成为寄生宿主、储存宿主及传播媒介存宿主及传播媒介n人畜共患病人畜共患病 自然疫原性疾病自然疫原性疾病外斐反应外斐反应n变形杆菌代替相应的立克次体抗原进行非特异性凝集反应，检测人类变形杆菌代替相应的立克次体抗原进行非特异性凝集反应，检测人类或动物血清中有无相应的抗体或动物血清中有无相应的抗体n本质：交叉凝集试验本质：交叉凝集试验n立克次体病的辅助诊断立克次体病的辅助诊断外斐反应（外斐反应（Weil-Felix reactionWeil-Felix reaction））立克次体立克次体变形杆菌菌株变形杆菌菌株OXOX1919OXOX2 2OXOXK K普氏立克次体普氏立克次体+++++++ +- -斑疹伤寒立克次体斑疹伤寒立克次体+++++++ +- -恙虫病立克次体恙虫病立克次体- -- -++++++贝纳柯克斯体贝纳柯克斯体- -- -- -五日热巴通体五日热巴通体- -- -- -   DISEASEDISEASE  CAUSAL CAUSAL AGENTAGENT ANIMAL ANIMAL RESERVOIRRESERVOIRWEIL-FELIX WEIL-FELIX RESPONSERESPONSEepidemic typhusepidemic typhus流行性斑疹伤寒流行性斑疹伤寒R. R. ProwazekiiProwazekii普氏立克次体普氏立克次体OX-19OX-19Human, louse Human, louse 人虱人虱Endemic typhusEndemic typhus地方性斑疹伤寒地方性斑疹伤寒R. R. MooseriMooseri莫氏立克次体莫氏立克次体Mice, flea Mice, flea 鼠蚤鼠蚤OX-19OX-19ScrubScrub恙虫病恙虫病R. R. TsutsugamushiTsutsugamushi恙虫病立克次体恙虫病立克次体OX-KOX-KChigger Chigger 恙螨恙螨Q feverQ feverQ Q热热R. R. BurneliiBurnelii - -Tick Tick 蜱蜱。