实验四鞭毛染色和藻类的观察.ppt

实验四鞭毛染色和藻类的观察鞭毛染色鞭毛染色Ø实验书：实验书： P76——实验实验13银染法观察鞭毛银染法观察鞭毛细菌运动性观察鞭毛细菌运动性观察鞭毛细菌的特殊结构染色细菌的特殊结构染色Ø目的要求目的要求 1 1、、学学习习并并初初步步掌掌握握鞭鞭毛毛染染色色法法；；观观察察细细菌菌鞭鞭毛的形态特征；观察细菌的运动性毛的形态特征；观察细菌的运动性  鞭鞭毛毛是是细细菌菌的的运运动动““器器官官””，，细细菌菌是是否否具具有有鞭鞭毛毛，，以以及及鞭鞭毛毛着着生生的的位位置置和和数数目目是是细细菌菌的的一一项项重重要要形形态态特征 细细菌菌的的鞭鞭毛毛很很纤纤细细，，所所以以，，除除了了很很少少数数能能形形成成鞭鞭毛毛束束的的细细菌菌可可以以用用相相差差显显微微镜镜直直接接观观察察到到鞭鞭毛毛束束的的存存在在外外，，一一般般细细菌菌的的鞭鞭毛毛均均不不能能用用光光学学显显微微镜镜直直接接观察到，而只能用电子显微镜观察观察到，而只能用电子显微镜观察 要要用用普普通通光光学学显显微微镜镜观观察察细细菌菌的的鞭鞭毛毛，，必必须须用用鞭鞭毛毛染染色色法法。

鞭鞭毛毛染染色色方方法法很很多多，，但但其其基基本本原原理理类类似似，，即即在在染染色色前前先先用用媒媒染染剂剂处处理理，，让让它它沉沉积积在在鞭鞭毛毛上上，，使使鞭鞭毛毛直直径径加加粗粗，，然然后后再再进进行行染色，显微镜观察染色，显微镜观察鞭毛鞭毛．鞭毛染色法：．鞭毛染色法：Ø（（1）） 制片：制片： 菌菌种种斜斜面面的的冷冷凝凝水水处处，，取取一一环环菌菌 → 将将载载片片倾倾斜斜→ 从从带带有有菌菌液液的的菌菌环环上上滴滴下下一一滴滴无无菌菌水水→让水自然流下让水自然流下,切勿涂抹切勿涂抹→自然风干自然风干→ 固定Ø（（2）） 硝酸银染色：硝酸银染色： A染染液液染染色色3-5分分钟钟→蒸蒸馏馏水水洗洗→ 再再用用B染染液液冲冲洗洗残残水水→ 然然后后使使B液液充充满满载载片片→ 微微热热至至冒冒气，气，30-60秒秒→水洗、吸干水洗、吸干→ 镜检镜检.美蓝染色法美蓝染色法 ØA A染液染色染液染色8分钟，蒸馏水冲洗分钟，蒸馏水冲洗30秒，吸干秒，吸干Ø美蓝染色美蓝染色6分钟分钟，，蒸馏水冲洗蒸馏水冲洗20秒秒Ø冲洗至洗液变蓝冲洗至洗液变蓝Ø蒸馏水冲洗蒸馏水冲洗20秒，吸干、镜检。

秒，吸干、镜检 普通变形杆菌普通变形杆菌( (Proteus vulgarisProteus vulgarisProteus vulgarisProteus vulgaris) ) ) )银银 染染 结结 果果美蓝染色结果美蓝染色结果改良的改良的LeifsonLeifson氏染色法氏染色法制片制片 每一区放一滴菌液每一区放一滴菌液, ,玻片倾斜玻片倾斜, ,让菌液流到小区的另一端让菌液流到小区的另一端, ,用用滤纸吸去多余的菌液滤纸吸去多余的菌液, ,室温自然干燥室温自然干燥. .染色染色 加染液覆盖菌面加染液覆盖菌面, ,几分钟后几分钟后, ,涂另一区确定最佳时间涂另一区确定最佳时间, ,染料表染料表面出现金色膜时面出现金色膜时, ,直接用水冲洗直接用水冲洗, ,染色约染色约1010分钟分钟. .自然干燥后观察自然干燥后观察. .菌体鞭毛红色菌体鞭毛红色实验报告及思考题实验报告及思考题Ø1. 绘图表示绘图表示芽孢、荚膜和鞭毛的芽孢、荚膜和鞭毛的染色结果染色结果Ø2. 2. 鞭毛的染色与其他染色有何不同，鞭毛的染色与其他染色有何不同，为什么？为什么？藻细胞的观察藻细胞的观察Ø微囊藻、硅藻和绿藻等藻类是引起太湖水华的微囊藻、硅藻和绿藻等藻类是引起太湖水华的主要藻种。

主要藻种Ø铜绿微囊藻铜绿微囊藻 栅藻栅藻 柯式并联藻柯式并联藻 直链藻直链藻铜绿微囊藻铜绿微囊藻Ø蓝藻门蓝藻门——蓝藻纲蓝藻纲——色球藻目色球藻目——微囊藻科微囊藻科——微囊藻属微囊藻属——铜绿微囊藻铜绿微囊藻Ø细胞球形，直径在细胞球形，直径在3-7μm，细胞有伪空胞，细胞分为有光合色，细胞有伪空胞，细胞分为有光合色素的色质区和中央的无色的中心质区，中心质区有素的色质区和中央的无色的中心质区，中心质区有DNA微丝Ø细胞中常具有大小不等的强反光颗粒，如多磷酸体，多面体细胞中常具有大小不等的强反光颗粒，如多磷酸体，多面体（羧化酶体），蓝藻体（天门冬氨酸和精氨酸聚合体的结晶，（羧化酶体），蓝藻体（天门冬氨酸和精氨酸聚合体的结晶，又称结构颗粒），多聚糖体（又称蓝藻淀粉或糖原）等又称结构颗粒），多聚糖体（又称蓝藻淀粉或糖原）等 Ø观察要求：观察要求： 画图画图 分清色素区和分清色素区和中心区伪空胞中心区伪空胞栅藻栅藻Ø绿藻门绿藻门——绿藻纲绿藻纲——绿球藻目绿球藻目——真集结体亚目真集结体亚目——栅藻科栅藻科——栅藻属栅藻属——二形栅藻二形栅藻Ø一般是一般是4个细胞的定形群体，有个细胞的定形群体，有1个蛋白核。

群体个蛋白核群体细胞是以长轴互相平行排列成细胞是以长轴互相平行排列成1行色素体周生，行色素体周生，中间两个细胞为纺锤形，两侧的细胞弯曲为新月中间两个细胞为纺锤形，两侧的细胞弯曲为新月状Ø观察要求：观察要求： 画图画图 蛋白核蛋白核 色素体色素体柯式并联藻Ø绿藻门绿藻门——绿藻纲绿藻纲——绿球藻目绿球藻目——非集结体亚目非集结体亚目——卵囊藻科卵囊藻科——并联藻属并联藻属——柯式并联藻柯式并联藻Ø细胞长纺锤形，直或弯曲两端渐细，色素体周生（围细胞长纺锤形，直或弯曲两端渐细，色素体周生（围绕细胞壁）、片状，以叶绿素绕细胞壁）、片状，以叶绿素a和和b最多，还有叶黄素最多，还有叶黄素和胡萝卜素，故呈绿色，具有两个蛋白核；贮藏的营和胡萝卜素，故呈绿色，具有两个蛋白核；贮藏的营养物质主要为淀粉和油类，形成淀粉粒细胞内有养物质主要为淀粉和油类，形成淀粉粒细胞内有1个或多个细胞核群体聚集在透明的胶被内，细胞长个或多个细胞核群体聚集在透明的胶被内，细胞长轴与群体长轴平行轴与群体长轴平行Ø观察要求：观察要求： 画图画图 淀粉粒淀粉粒 胶被胶被 色素体色素体直链藻直链藻Ø硅藻门硅藻门——中心纲中心纲——圆筛藻目圆筛藻目——圆筛藻科圆筛藻科——直直链藻属链藻属——变异直链藻变异直链藻Ø细胞连成链状在同一胶质管中，壳体和细胞呈圆柱细胞连成链状在同一胶质管中，壳体和细胞呈圆柱状，色素体呈小圆盘状，多个。

细胞间有沟状的缢状，色素体呈小圆盘状，多个细胞间有沟状的缢入部，为入部，为“假环沟假环沟”。