甘油分析方法.doc

甘油剖析方法甘油剖析方法甘油的化学剖析方法过碘酸钠法（GB/T13216.6—91）原理：在强酸性介质中，过碘酸钠将三个相连羟基的甘油氧化分解成甲酸和甲醛，用NaOH中和生成的甲酸，用pH值计指示终点从NaOH标准溶液的耗费量计算甘油的含量CHOH-CHOH-CHOH+2NaIO→2HCHO+HCOOH+2NaIO+HO23242 试剂蒸馏水：不含二氧化碳乙二醇稀释溶液：1体积不含甘油的乙二醇，用酚酞作指示剂中和后，再用1体积水稀释硫酸溶液：约0.1mol/L甲酸钠溶液：约0.1mol/L过碘酸钠酸性溶液的制备：称取60g（精准至0.1g）过碘酸钠，溶于已加入120mL硫酸溶液的约500mL的水中，边加入边冷却，转移到1000mL容量瓶中，用水稀释到刻度并摇匀必需时用玻璃过滤器过滤溶液的酸度校核：空白试验所用NaOH溶液的体积应许多于4.5mL，这与基本反响产生的酸度相当NaOH溶液：约0.05mol/LNaOH标准溶液：约0.125mol/L酚酞指示剂：溶解 0.5g酚酞于95%（体积比）乙醇中，稀释至 100mL仪器滴定管：50mLpH值计：pH值计应用两种缓冲溶液校准a：邻苯二甲酸氢钾溶液：0.05mol/L（10.12g/L），20℃时pH值为4.00；b：10水四硼酸二钠（NaBO·10HO）溶液：0.01mol/L（3.81g/L），20℃时2274pH值为9.22。

测定步骤（ 1）试验份：称取含甘油不大于0.5g的样品（精准至0.0002g）假如不知甘油的大概含量，应称取0.5g样品进行展望（假如甘油含量大于75%，最好称取0.5g+0.1g样品，精准至0.0002g），置于500mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀后取50mL此溶液用于测定 2）试验溶液的制备：对碱性样品或样品酸化时出现焦油积淀，可将试验份放入配有回流冷凝器的烧瓶中，需要时稀释到50mL，加2滴酚酞指示剂，用硫酸溶液中和到恰好退色再加入5mL硫酸溶液，煮沸5min，冷却，必需时过滤，并用水清洗过滤器滤液转入600mL烧杯中无上述状况时则可将样品直接放入烧杯进行测定 3）滴定：用水稀释试样至体积约250mL，在不停搅拌下，加入NaOH溶液，调理pH值至7.9±0.1加入50mL过碘酸钠溶液，混淆搅匀，盖上表面皿，在温度不超出35℃的暗处搁置30min而后加入10mL乙二醇稀释1/5/溶液，混淆，在同样条件下搁置20min加5.0mL甲酸钠溶液，用NaOH标准溶液滴定至pH值7.9±0.24）空白试验：在同样条件下，用同样量的试剂和稀释水，用 50mL水取代样品，做空白试验但加入过碘酸钠溶液以前，空白溶液应调理pH值至6.5，加入过碘酸钠溶液以后，滴定终点至pH值也是6.5。

5）计算：甘油含量（质量，%）=（V1-V2）×c×0.0921×100÷m=9.21c(V1-V2)/m式中V1—测定样品耗用NaOH标准溶液的体积，mL；V2—空白实验耗用NaOH标准溶液的体积，mL；m—试验份的质量，g；c—NaOH标准溶液的浓度，mol/L；0.0921—甘油的毫摩尔质量，g/mmol两个平行实验的同意偏差为 0.2JIS食品甘油标准、FCCⅢ标准、美国药典甘油标准等表达的方法（与GB/T13216.6—91相当）操作以下：正确拿出约0.5g的甘油，加水成500mL，正确抽取50mL，加水约200mL加入NaOH或H2SO4溶液调理pH值至7.9±0.1而后加入50mL6%的过碘酸钠，轻轻摇动，搁置30min后，加入10mL50%的乙二醇，摇动，再搁置暗处20min加入5mL浓度为1mol/L的甲酸钠水溶液，用0.1mol/L的NaOH溶液（ISO用0.125mol/L的NaOH溶液）滴定到pH值为7.9±0.1表示终点，同时做空白试验而且试验时用新煮沸的蒸馏水每毫升0.1mol/L的NaOH溶液相当于9.209mg的甘油重铬酸钾法高纯度甘油能够采纳重铬酸钾法。

原理：甘油在酸性溶液中能被重铬酸钾氧化成二氧化碳和水，过度的重铬酸钾将碘化钾氧化成碘，用硫代硫酸钠滴定析出的碘，进而计算甘油含量3CHO+7KCrO+28HSO→7KSO+9CO+7Cr(SO)+40HO222437232843422KCrO+6KI+7HSO→Cr(SO)+4KSO+3I+7H2222242424732--2- O+3SO3I+6S→6I62243有以上三式可知，1mol硫代硫酸钠相当于92.0944÷2÷7=6.578g甘油试剂硫代硫酸钠标准溶液：0.1mol/L碘化钾：20%溶液淀粉指示剂：0.5%溶液重铬酸钾溶液：89g/L测定：称取样品1g左右（精准至0.0002g），移入250mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀拿出10mL于锥形瓶中，加入25mL重铬酸钾溶液及30mL硫酸（1:1，体积比），瓶口搁置一玻璃漏斗，于水浴上加热2h，冷却后移入250mL容量瓶中，用水稀释到刻度，摇匀取 25mL于500mL具塞锥形瓶中，加入 15mL20%的碘化钾溶液，盖上瓶塞，于暗处搁置 10min，加水300mL，而后用0.1mol/L的硫代硫酸钠标准溶液滴定，近终点时加入淀粉指示剂数滴， 持续滴定至溶液由蓝色变成亮绿色。

同时作空白试验计算：甘油含量按下式计算甘油%=[（V2-V1）×c×0.006578／(m×10／250×25／250﹚]×1002/5式中 V1—滴定样品时耗用硫代硫酸钠标准溶液的体积，mL；V2—滴定空白时耗用硫代硫酸钠标准溶液的体积，mL；c—硫代硫酸钠标准溶液的浓度，mol/L；m—试验份的质量，g；0.006578—1mmol硫代硫酸钠相当于甘油的质量， g比色法在碱性条件下，把甘油生成铜络合物，进行比色测定在10mL甘油中，加入10mL21%的NaOH溶液，再加入6mL6%的氯化亚铜溶液，充足混淆后并离心分别，取上层溶液在635nm处进行比色测定此外，也有把甘油用重铬酸钾氧化分解进行定量的方法在甘油（0.25g以下）中，加入25mL0.0092%的重铬酸钾溶液和30mL浓硫酸，在水浴中煮沸20min，使甘油分解，在587nm处测定重铬酸钾的耗费量作为重铬酸钾方法的更改方法，再加入二苯胺脲，在 540nm处进行测定别的，对低含量的甘油如皂基中的甘油含量的测定，可采纳以下操作的分光光度法进行原理：将定量的皂基（或肥皂、脂肪酸）用硫酸分解，生成的脂肪酸用石油醚萃取后，残留于水中的甘油用过碘酸氧化成甲酸和甲醛，将甲醛用1，8-二羟基-3,6-二萘磺酸显色，用分光光度计测定紫红色溶液的吸光度，求出甘油的含量。

本法适于测定甘油含量低于 0.5%的试样操作：将定量的皂基（或肥皂、脂肪酸）用硫酸分解，生成的脂肪酸用石油醚萃取后，残留水溶液（250mL）作为试样1）取样量参照：样品中预计的甘油含量样品的取样量 /g试样溶液取样量/mL/%0.25-0.5011320.0以取试样溶液数毫升，加入过碘酸钠溶 1m，放15mi（ 3）加入1mL氯化亚锡溶液和10mL1，8-二羟基-3,6-二萘磺酸，混淆在水浴上加热30min，冷却后用稀硫酸稀释到100mL4）用10nm比色池在571nm处（本溶液最大汲取波长在 571nm邻近）测定吸光度，同时用水进行空白测定由试样的吸光度与空白试验的吸光度之差， 从早先制作的甘油吸光度曲线求出甘油的含量（ %）C=m×100×250／V×m×1000×1000=0.025m／Vm11 式中C—甘油含量，%m—由标准曲线求出的甘油含量，μ g； 1m—样品量，g3/5V—取试样溶液的量，mL；色谱法测定甘油气相色谱法气相色谱法测定甘油的色谱柱有很多种，往常柱温控制在180℃左右，以Celite(硅藻土、镁氟石)作为担体，聚乙二醇-6000作固定液，能够圆满地剖析甘油产品。

J.Synder用Tenax-GC柱，柱温从150℃升至240℃对甘油进行剖析，并和过碘酸法进行了比较N.Chambers对湿润剂中的甘油、甘露醇、山梨糖醇等乙酰化物用 1.5%的QFI-HMDS80-100目色谱柱，在柱温 200℃的条件下进行剖析乙酰化操作以下：在60-100mg样品中，加入吡啶、无水乙酸（50:50，体积比）10mL在水浴中进行反响也实用80-100目的活性炭，0.8%的THEED-CarbopackC色谱柱，在柱温125℃下进行剖析的报告此外，三甲基硅烷化的甘油、聚合甘油用 SiliconeOV-171.3% 为固定液，担体100-200目的色谱柱，从90℃升温至350℃，升温速率在5℃/min下进行三甲基硅烷化操作以下：在0.18-0.22g甘油中，加入1mL吡啶和0.4mL六甲基二氯硅烷、0.4mL三甲基氯硅烷，在80℃下反响5min，静止后取上层清液进行剖析高压液相色谱法用屋太芝企业剖析糖类专用的反向柱，以乙腈：水=92.5:7.5（体积比）作为洗脱剂，以视差折光仪为检测器，能够对甘油进行剖析此外，也能够用水系的凝胶浸透色谱对甘油进行剖析剖析条件以下色谱柱：AsahipakGS-220H(7.6mmID×250mL)。

柱温：40℃流量：0.5mL/min检测器：视差折光仪样品：0.5%甘油20μL洗脱剂：水有关文件1.HPLC检测生物柴油生产过程中副产物甘油含量的研究张宏武,王璐,产竹华,夏永军,陈蕴,许赣荣(江南大学工业生物技术教育部要点实验室,江苏无锡214122)主要仪器Angilent1100系列高效液相色谱仪,KDC-16H高速台式离心计最正确色谱条件:色谱柱:ZORBAXNH(250mm×4.6mm,5μm);检测器:示差检测器;2柱温30℃;流动相:70%乙腈;流速1mL/min甘油最低检测限为2mg/L,回收率为94.34%~99.43%,相对标准偏差为1.03%与传统化学方法对比,高效液相色谱法迅速简易,结果正确,重现性好2.分光光度法测定甘油合剂中甘油的含量徐艳丽,成立军,刘伦(泰山医学院第一教课医院,山东泰安271000)依据甘油与氢氧化铜悬浊液作用生成绛蓝色的甘油铜溶液 ,采纳分光光度法在630nm波优点测定吸光度,成立回归方程,以确立甘油的含量3.气相色谱法测定工业甘油含量 申书昌 王文波齐齐哈尔轻工学院4/5本文使用Chromosorb—101固定相作为柱填料,采纳气相色谱法测定水溶液中甘油。

操作过程简易,测定结果正确色谱柱：Φ3×2000（mm）不锈钢柱,内填Chromosorb—101(60-80目)固定相;柱温:235℃；。