紫外分光光度法测定维生素B1片的含量.doc

紫外分光光度法测定维生素B1片的含量维生素B1及其制剂及其制剂常采用的措施有非水滴定法，紫外分光光度法和硫色素荧光法中国药典用非水溶液滴定法测定原料药，片剂和注射剂采用紫外分光光度法，USP采用硫色素荧光法采用非水溶液滴定法也许受到氢卤酸盐的干扰，对操作人员规定较高，采用硫色素滴定法不受氧化破坏产物的干扰，测定精确但操作繁琐，且荧光测定受干扰因素较多，本实验采用紫外分光光度法进行含量测定1 实验装置及试剂1.1 仪器 BS210S型天平，UV751GD型紫外/可见分光光度计1.2 实验材料 维生素B1片（来源：成都第一制药，规格：1--00片*10mg，批号：061204），维生素B1原则品（分析纯），维生素B1对照品（200ug/ml，2.0mg/ml），维生素B1原则溶液（0.250mg/ml），空白辅料，盐酸溶液（9→1000）2 实验措施 处方分析：构成处方量(g)比例(%)维生素B11016.39淀粉2032.78糊精3049.18硬脂酸镁1.01.639生产1000片 根据处方量分析，维生素B1含16.39%，辅料含83.61%平均片重约61mg，取相称于25mg维生素B1的片粉约0.15g。

1、测定措施：取供试品20片，精密称定，研细，称取片粉适量（约相称于维生素B125mg），置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）约70ml，振摇15min使维生素B1溶解，再加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液5ml，置另一100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，照分光光度法，在246nm的波长处测定吸取度，按C12H17ClN4OS.HCl的吸取系数（）为421计算，即得2、措施验证2.1.线性和范畴精密称取维生素B1对照品约25mg，置100 ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）溶解并稀释至刻度，制备成含维生素B1 250μg/ml的对照溶液分别精密量取该溶液3、4、5、6、7ml置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，即得系列浓度的对照品溶液，照分光光度法，在246nm的波长处测定吸取度，以吸取度（A）对浓度（C）回归解决，得原则曲线和回归方程2.2. 回收实验（精确度实验）对照品溶液的制备：对照品溶液的制备，同2.1项下供试品溶液的制备：精密称取维生素B1精制原料约0.25g，置50ml量瓶中，加入盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，制成5.0mg/m维生素B1溶液储藏液；分别精密量取该溶液4、5、6ml置已加入比例量辅料（0.15g，1/100天平）的100ml量瓶中（一式三份），加盐酸溶液（9→1000）约70ml，振摇使之溶解，再加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，滤过，精密量取续滤液5ml，置另一100ml量瓶中，摇匀，得高、中、低三种浓度的实验溶液，照分光光度法，在246nm的波长处测定吸取度，用对照品比较法计算含量。

2.3、精密度实验取供试品20片，精密称定，研细，称取片粉适量（约相称于维生素B125mg），一式5份，置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）适量，振摇15min，再加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置另一100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，即得约含维生素B112.5ug/ml的供试品溶液另取维生素B1对照品适量，用盐酸溶液（9→1000）稀释制成12.5μg/ml的对照品溶液照分光光度法（ChP二部附录IVA）在246nm处分别测定供试品溶液和对照品溶液的吸光度，用百分吸光度和对照品比较法分别进行计算，即得表1 维生素B1原则曲线的制备编号 1 2 3 4 5对照液浓度 7.50 10.00 12.50 15.00 17.50（ug/ml）吸光度A 0.312 0.391 0.480 0.559 0.640图2 维生素B1原则曲线图由图2可得，采用此法进行维生素B1含量的测定，在浓度为8.00-16.00ug/ml范畴内线性关系较好（R²=0.9997）。

表2 维生素B1片回收率实验成果编号加入量（mg）对照液浓度（ug/ml）吸光度A测得对照液浓度（ug/ml）回收率（%）110.0010.000.3709.2692.6210.0010.000.3709.2692.6310.0010.000.3709.2692.6412.5012.500.45511.8494.7512.5012.500.45611.8795.0612.5012.500.45511.8494.7715.0015.000.53914.3895.9815.0015.000.53914.3895.9915.0015.000.54114.4496.3123XRSDRSD高95.9%95.9%96.3%96%0.24%1.6%中94.7%95.0%94.7%94.8%0.18%低92.6%92.6%92.6%92.6%0回收率平均值(%)=94.48%RSD=1.6%由表2可得，采用此法进行维生素B1含量的测定，加入量在10.00-15.00mg范畴内，对照液浓度在10.00-15.00ug/ml范畴内时，回收率较高表3 维生素B1片精密度考察实验成果编号加入片粉量（g）吸光度A浓度（ug/ml）百分吸光度法（%）对照品比较法（%）原则曲线%10.17240.43112.5781.4495.8888.3820.17300.42712.6180.4394.6987.1430.17230.42812.6180.6294.9187.3840.17160.42512.5180.7095.0087.3550.17230.43312.5681.8996.4089.03对照品0.44712.50 当m=0.1715g 维B1浓度 12.50ug/mlRSD1（百分吸光度法）=0.8%RSD2（对照品比较法）=0.8%RSD3（原则曲线法）=0.9%表4 维生素B1片含量测定成果测定措施含量为标示量的百分数范畴含量为标示量的百分数均值百分吸光度法84.43%-81.89%81.02%对照品比较法原则曲线法94.69%-96.40%87.14%-89.03%95.38%87.86%百分吸光度法：含量不符合规定原则。

对照品比较法：含量符合规定原则原则曲线法：含量符合规定原则高效液相色谱法测定维生素B1的含量 。