病毒感染的检查防治.ppt

病毒感染的检查方法病毒感染的检查方法与防治原则与防治原则第第2525章章 病原生物学系病原生物学系 强华强华1 第一节 病毒感染的检查一、标本的采集与送检 用于分离培养的标本： a、采集急性期标本 b、采集感染部位标本 c、冷藏 血清学诊断的标本： 急性期和恢复期双份血清，-20℃保存2二、病毒的分离培养与鉴定 （一）病毒的分离培养（一）病毒的分离培养 1.最常用细胞培养 2.鸡胚接种：主要用于流感病毒的分离 3.动物接种少用：主要用于狂犬病病毒、 乙型脑炎病毒的分离34常用的细胞培养5（二）病毒在细胞内增殖的指标（二）病毒在细胞内增殖的指标1.细胞变化 CPE、多核巨细胞、包涵体2.红细胞吸附3.干扰现象4.细胞代谢改变67病毒在细胞内增殖的指标病毒在细胞内增殖的指标正常细胞正常细胞病变细胞病变细胞①①①①细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落1 1细胞病变效应细胞病变效应( (cytopathic effect, CPE) )8麻疹病毒麻疹病毒麻疹病毒麻疹病毒感染细胞感染细胞感染细胞感染细胞呼吸道合胞病呼吸道合胞病呼吸道合胞病呼吸道合胞病毒感染细胞毒感染细胞毒感染细胞毒感染细胞②②②②形成多核巨细胞或称融合细胞形成多核巨细胞或称融合细胞形成多核巨细胞或称融合细胞形成多核巨细胞或称融合细胞9③③③③形成包涵体形成包涵体形成包涵体形成包涵体(inclusion body)(inclusion body)(inclusion body)(inclusion body)10（三）病毒数量和感染性测定1 1、、蚀斑试验斑试验2 2、、IDID5050 或或 TCID TCID5050 病毒感染鸡胚、动物或细胞后，引起 50% 发生死亡或病变的最小量。

病毒感染单层细胞后，产生的局限性病灶，称蚀斑，蚀斑是由一个感染性病毒体复制形成的，称蚀斑形成单位，病毒悬液中的感染性病毒量以每毫升的蚀斑形成单位PFU来表示11三、病毒感染的血清学诊断四、病毒的快速诊断（一）形态学检查（二）检测病毒抗原 抗体测病毒感染脱落细胞或分泌物细胞中的抗原（三）检测病毒抗体已知抗原测血清中抗体测IgM，或动态测IgG（双份血清）（四）检测病毒核酸 PCR试验 引物 核酸杂交试验 探针 基因芯片技术12病毒感染的检查病毒感染的检查检测内容检测内容查病毒查病毒查特异性抗体查特异性抗体 病毒颗粒病毒颗粒 病毒抗原病毒抗原 病毒核酸病毒核酸 病毒酶类：如逆转录酶病毒酶类：如逆转录酶 电镜直接观察电镜直接观察 光镜检查包含体光镜检查包含体 分离培养分离培养13. .第二节第二节 病毒感染的特异性预防病毒感染的特异性预防14灭活疫苗（灭活疫苗（灭活疫苗（灭活疫苗（inactivated vaccineinactivated vaccine））））活疫苗（活疫苗（活疫苗（活疫苗（living vaccineliving vaccine））））重组载体疫苗（重组载体疫苗（重组载体疫苗（重组载体疫苗（recombinant carrier vaccinerecombinant carrier vaccine））））亚单位疫苗（亚单位疫苗（亚单位疫苗（亚单位疫苗（subunit vaccinesubunit vaccine）））） 化学提取或人工合成疫苗化学提取或人工合成疫苗化学提取或人工合成疫苗化学提取或人工合成疫苗 重组疫苗（重组疫苗（重组疫苗（重组疫苗（recombinant vaccinerecombinant vaccine））））核酸疫苗（核酸疫苗（核酸疫苗（核酸疫苗（nucleic acid vaccinenucleic acid vaccine））））一、人工主动免疫常用生物制品一、人工主动免疫常用生物制品15二、人工被动免疫常用生物制品二、人工被动免疫常用生物制品 免疫球蛋白免疫球蛋白免疫球蛋白免疫球蛋白 血清丙种球蛋白血清丙种球蛋白血清丙种球蛋白血清丙种球蛋白 细胞免疫制剂细胞免疫制剂细胞免疫制剂细胞免疫制剂 IFN-IFN-α α、、、、β β、、、、γ γ 细胞因子细胞因子细胞因子细胞因子 IL-2 IL-2、、、、IL-6IL-6、、、、IL-12 IL-12 TNF TNF 、、、、CSFCSF 淋巴因子激活的杀伤细胞淋巴因子激活的杀伤细胞淋巴因子激活的杀伤细胞淋巴因子激活的杀伤细胞 —— —— —— ——LAKLAK细胞细胞细胞细胞 16人工被动免疫人工被动免疫 （（artificial passive immunizationartificial passive immunization）） 如：如：1.1.血清免疫球蛋白血清免疫球蛋白 用于甲肝、麻疹、脊髓灰质炎预防用于甲肝、麻疹、脊髓灰质炎预防 2. 2.高效价含乙肝病毒表面抗体的免疫高效价含乙肝病毒表面抗体的免疫 球蛋白球蛋白 用于预防母婴乙肝传播用于预防母婴乙肝传播 17 策略：阻断病毒复制周期中策略：阻断病毒复制周期中吸附穿入吸附穿入、、 脱壳脱壳、、核酸复制核酸复制、或、或装配释放装配释放 任一环节，从而抑制病毒复制任一环节，从而抑制病毒复制 要求：抗病毒药物能穿入细胞选择性地要求：抗病毒药物能穿入细胞选择性地 抑制病毒复制又不损伤宿主细胞抑制病毒复制又不损伤宿主细胞第三节第三节 病毒感染的治疗病毒感染的治疗18 核苷类药物核苷类药物 非核苷类反转录酶抑制剂非核苷类反转录酶抑制剂 蛋白酶抑制剂蛋白酶抑制剂 其他抗病毒药物其他抗病毒药物 干扰素和干扰素诱生剂干扰素和干扰素诱生剂 中草药中草药 基因治疗剂基因治疗剂 治疗性疫苗治疗性疫苗 抗抗抗抗病病病病毒毒毒毒化化化化学学学学制制制制剂剂剂剂反义寡核苷酸反义寡核苷酸反义寡核苷酸反义寡核苷酸干扰干扰RNA核核核核酶酶酶酶（（（（ribozymeribozyme）））） 19一、药物治疗一、药物治疗 1. 1.核苷类药物核苷类药物 2.2.病毒蛋白酶抑制剂病毒蛋白酶抑制剂 3. 3.天然药物如中药天然药物如中药二、基因治疗二、基因治疗 1. 1.反义寡核苷酸反义寡核苷酸 2. 2. 核酶核酶 3. 3.干扰干扰RNARNA三、免疫治疗 1.1.中和抗体（单抗）中和抗体（单抗）2.2.治疗性疫苗治疗性疫苗3.3.干扰素干扰素20一、药物治疗一、药物治疗 （一）核苷类药物（一）核苷类药物 1. 1.抑制病毒基因复制抑制病毒基因复制 碘碘尿尿苷苷( (疱疱疹疹净净) )用用异异常常嘧嘧啶啶取取代代胸胸腺腺嘧嘧啶啶, ,眼眼疱疹病毒感染。

也可渗入细胞疱疹病毒感染也可渗入细胞DNA,DNA,故有毒性故有毒性 无环鸟苷无环鸟苷( (啊昔洛韦啊昔洛韦) ) ，竞争病毒复制酶竞争病毒复制酶 2. 2.抑制病毒基因转录：抑制病毒基因转录： 病毒唑病毒唑 （二）蛋白酶抑制剂（二）蛋白酶抑制剂 “ “鸡尾酒鸡尾酒””治疗治疗HIVHIV，，3TC3TC加蛋白酶抑制物加蛋白酶抑制物 （三）天然药物（三）天然药物：：黄芪、板蓝根、大青叶黄芪、板蓝根、大青叶21 二、基因治疗二、基因治疗 1.1.反反义义寡寡核核苷苷酸酸、、反反义义寡寡核核脱脱氧氧核核酸酸( (反反义义RNARNA、、反义反义DNA)DNA)与病毒与病毒DNA RNADNA RNA关键基因互补关键基因互补 2. 2. 核酶：病毒核酶：病毒RNARNA结合结合, ,切割降解靶切割降解靶RNARNA 3. 3. 感染感染RNARNA 三、免疫治疗 1. 1.中和抗体（单抗）中和抗体（单抗） 2. 2.治疗性疫苗治疗性疫苗 3. 3.干扰素干扰素22。