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外科学(泌尿外科)专业毕业论文 [精品论文] 中药复方制剂对膀胱癌细胞株T24增殖影响关键词：中药单体复方 正交试验 膀胱肿瘤 抑制率摘要：目的： 研究通过正交试验设计，进行人参皂甙Rg3，姜黄素，槲皮素三种中药复方对体外培养人膀胱肿瘤T24细胞株作用的优化研究，为进一步的研究与临床应用奠定根底，为解释中药组方的配伍原那么，为科学的组方提供理论依据 方法： 用细胞毒试验分别测定人参皂甙Rg3，姜黄素，槲皮素三种单体中药24小时对人膀胱癌T24细胞株的抑制率，通过IC50计算分析软件得出三种中药单体24小时内作用于膀胱癌细胞株T24的半数抑制率(IC50)根据三种单体中药的IC50值制定正交试验因素水平根据正交试验因素选取L9(34)正交试验表，用细胞毒试验测定表中每组中药复方配伍制剂24小时对人膀胱癌T24细胞株的抑制率，用Annexin V- FITC/ PI检测凋亡，将两种试验所得数据顺序入列，水平对号入座，利用正交试验助手分析软件计算分析试验结果(数据)，采用直观分析法，得出最正确剂量的配伍将所得最正确配伍剂量与各个中药单体和羟基喜树碱进行比照，试验分组为空白对照组，中药复方制剂组，人参皂甙Rg3组，槲皮素组，姜黄素组，阳性对照组(羟基喜树碱)，得到双变量流式细胞仪的散点图，观察中药复方制剂的药物效果。

用荧光显微镜观察中药复方制剂24h作用人膀胱癌T24细胞株后，细胞膜和细胞核的状态 结果： 通过细胞毒试验和IC50计算分析软件得到三种中药的IC50值，人参皂甙Rg3160μmol/L，姜黄素24μmol/L，槲皮素152μmol/L根据所得的IC50值制定出正交试验因素水平，人参皂甙Rg340μmol/L，80μmol/L，160μmol/L，姜黄素6μmol/L，12μmol/L，24μmol/L，槲皮素38μmol/L，76μmol/L，152μmol/L选取L9(34)表格为本次试验的正交表格，通过细胞毒试验和流式细胞检测凋亡率试验，得到数据代入正交表格，通过正交助手试验分析软件，采用直观分析法得到，A3，B3，Cl均较其他水平好，由极差排列出主次顺序为A>C>B，故得出最正确剂量的配伍为人参皂甙Rg3160μmol/L，槲皮素38μmol/L，姜黄素24μmol/L将所得最正确配伍剂量与各个中药单体和羟基喜树碱进行比照流式细胞仪激发光波长用488nm，用一波长为515 nm的通带滤器检测FITC荧光，另一波长大于560nm的滤器检测PI，双变量流式细胞仪的散点图上，中药复方制剂的药效要好于其他分组，其作用后的人膀胱癌肿瘤细胞以凋亡和死亡为主，而活细胞根本没有。

于荧光显微镜观察，可以清晰的观察到细胞凋亡和细胞坏死的存在 结论： 依据国内外的研究成果及以上我们的前期工作根底，本课题应用正交试验技术设计三种中药单体优化配伍复方用于膀胱癌的研究，通过体外实验观察它们对膀胱癌细胞的凋亡诱导效应和生长抑制状况，挖掘其膀胱灌注优势复方并且证实中药复方制剂24h对人膀胱肿瘤细胞株T24细胞，有很好的诱导凋亡的能力但是，试验是利用直观分析法分析正交试验结果后，由于所得的最正确搭配只是相对于被选因素和水平而言的，不是绝对的“最正确〞，因而也有一定的片面性正文内容 目的： 研究通过正交试验设计，进行人参皂甙Rg3，姜黄素，槲皮素三种中药复方对体外培养人膀胱肿瘤T24细胞株作用的优化研究，为进一步的研究与临床应用奠定根底，为解释中药组方的配伍原那么，为科学的组方提供理论依据 方法： 用细胞毒试验分别测定人参皂甙Rg3，姜黄素，槲皮素三种单体中药24小时对人膀胱癌T24细胞株的抑制率，通过IC50计算分析软件得出三种中药单体24小时内作用于膀胱癌细胞株T24的半数抑制率(IC50)根据三种单体中药的IC50值制定正交试验因素水平根据正交试验因素选取L9(34)正交试验表，用细胞毒试验测定表中每组中药复方配伍制剂24小时对人膀胱癌T24细胞株的抑制率，用Annexin V- FITC/ PI检测凋亡，将两种试验所得数据顺序入列，水平对号入座，利用正交试验助手分析软件计算分析试验结果(数据)，采用直观分析法，得出最正确剂量的配伍。

将所得最正确配伍剂量与各个中药单体和羟基喜树碱进行比照，试验分组为空白对照组，中药复方制剂组，人参皂甙Rg3组，槲皮素组，姜黄素组，阳性对照组(羟基喜树碱)，得到双变量流式细胞仪的散点图，观察中药复方制剂的药物效果用荧光显微镜观察中药复方制剂24h作用人膀胱癌T24细胞株后，细胞膜和细胞核的状态 结果： 通过细胞毒试验和IC50计算分析软件得到三种中药的IC50值，人参皂甙Rg3160μmol/L，姜黄素24μmol/L，槲皮素152μmol/L根据所得的IC50值制定出正交试验因素水平，人参皂甙Rg340μmol/L，80μmol/L，160μmol/L，姜黄素6μmol/L，12μmol/L，24μmol/L，槲皮素38μmol/L，76μmol/L，152μmol/L选取L9(34)表格为本次试验的正交表格，通过细胞毒试验和流式细胞检测凋亡率试验，得到数据代入正交表格，通过正交助手试验分析软件，采用直观分析法得到，A3，B3，Cl均较其他水平好，由极差排列出主次顺序为A>C>B，故得出最正确剂量的配伍为人参皂甙Rg3160μmol/L，槲皮素38μmol/L，姜黄素24μmol/L。

将所得最正确配伍剂量与各个中药单体和羟基喜树碱进行比照流式细胞仪激发光波长用488nm，用一波长为515 nm的通带滤器检测FITC荧光，另一波长大于560nm的滤器检测PI，双变量流式细胞仪的散点图上，中药复方制剂的药效要好于其他分组，其作用后的人膀胱癌肿瘤细胞以凋亡和死亡为主，而活细胞根本没有于荧光显微镜观察，可以清晰的观察到细胞凋亡和细胞坏死的存在 结论： 依据国内外的研究成果及以上我们的前期工作根底，本课题应用正交试验技术设计三种中药单体优化配伍复方用于膀胱癌的研究，通过体外实验观察它们对膀胱癌细胞的凋亡诱导效应和生长抑制状况，挖掘其膀胱灌注优势复方并且证实中药复方制剂24h对人膀胱肿瘤细胞株T24细胞，有很好的诱导凋亡的能力但是，试验是利用直观分析法分析正交试验结果后，由于所得的最正确搭配只是相对于被选因素和水平而言的，不是绝对的“最正确〞，因而也有一定的片面性目的： 研究通过正交试验设计，进行人参皂甙Rg3，姜黄素，槲皮素三种中药复方对体外培养人膀胱肿瘤T24细胞株作用的优化研究，为进一步的研究与临床应用奠定根底，为解释中药组方的配伍原那么，为科学的组方提供理论依据。

方法： 用细胞毒试验分别测定人参皂甙Rg3，姜黄素，槲皮素三种单体中药24小时对人膀胱癌T24细胞株的抑制率，通过IC50计算分析软件得出三种中药单体24小时内作用于膀胱癌细胞株T24的半数抑制率(IC50)根据三种单体中药的IC50值制定正交试验因素水平根据正交试验因素选取L9(34)正交试验表，用细胞毒试验测定表中每组中药复方配伍制剂24小时对人膀胱癌T24细胞株的抑制率，用Annexin V- FITC/ PI检测凋亡，将两种试验所得数据顺序入列，水平对号入座，利用正交试验助手分析软件计算分析试验结果(数据)，采用直观分析法，得出最正确剂量的配伍将所得最正确配伍剂量与各个中药单体和羟基喜树碱进行比照，试验分组为空白对照组，中药复方制剂组，人参皂甙Rg3组，槲皮素组，姜黄素组，阳性对照组(羟基喜树碱)，得到双变量流式细胞仪的散点图，观察中药复方制剂的药物效果用荧光显微镜观察中药复方制剂24h作用人膀胱癌T24细胞株后，细胞膜和细胞核的状态 结果： 通过细胞毒试验和IC50计算分析软件得到三种中药的IC50值，人参皂甙Rg3160μmol/L，姜黄素24μmol/L，槲皮素152μmol/L。

根据所得的IC50值制定出正交试验因素水平，人参皂甙Rg340μmol/L，80μmol/L，160μmol/L，姜黄素6μmol/L，12μmol/L，24μmol/L，槲皮素38μmol/L，76μmol/L，152μmol/L选取L9(34)表格为本次试验的正交表格，通过细胞毒试验和流式细胞检测凋亡率试验，得到数据代入正交表格，通过正交助手试验分析软件，采用直观分析法得到，A3，B3，Cl均较其他水平好，由极差排列出主次顺序为A>C>B，故得出最正确剂量的配伍为人参皂甙Rg3160μmol/L，槲皮素38μmol/L，姜黄素24μmol/L将所得最正确配伍剂量与各个中药单体和羟基喜树碱进行比照流式细胞仪激发光波长用488nm，用一波长为515 nm的通带滤器检测FITC荧光，另一波长大于560nm的滤器检测PI，双变量流式细胞仪的散点图上，中药复方制剂的药效要好于其他分组，其作用后的人膀胱癌肿瘤细胞以凋亡和死亡为主，而活细胞根本没有于荧光显微镜观察，可以清晰的观察到细胞凋亡和细胞坏死的存在 结论： 依据国内外的研究成果及以上我们的前期工作根底，本课题应用正交试验技术设计三种中药单体优化配伍复方用于膀胱癌的研究，通过体外实验观察它们对膀胱癌细胞的凋亡诱导效应和生长抑制状况，挖掘其膀胱灌注优势复方。

并且证实中药复方制剂24h对人膀胱肿瘤细胞株T24细胞，有很好的诱导凋亡的能力但是，试验是利用直观分析法分析正交试验结果后，由于所得的最正确搭配只是相对于被选因素和水平而言的，不是绝对的“最正确〞，因而也有一定的片面性目的： 研究通过正交试验设计，进行人参皂甙Rg3，姜黄素，槲皮素三种中药复方对体外培养人膀胱肿瘤T24细胞株作用的优化研究，为进一步的研究与临床应用奠定根底，为解释中药组方的配伍原那么，为科学的组方提供理论依据 方法： 用细胞毒试验分别测定人参皂甙Rg3，姜黄素，槲皮素三种单体中药24小时对人膀胱癌T24细胞株的抑制率，通过IC50计算分析软件得出三种中药单体24小时内作用于膀胱癌细胞株T24的半数抑制率(IC50)根据三种单体中药的IC50值制定正交试验因素水平根据正交试验因素选取L9(34)正交试验表，用细胞毒试验测定表中每组中药复方配伍制剂24小时对人膀胱癌T24细胞株的抑制率，用Annexin V- FITC/ PI检测凋亡，将两种试验所得数据顺序入列，水平对号入座，利用正交试验助手分析软件计算分析试验结果(数据)，采用直观分析法，得出最正确剂量的配伍。

将所得最正确配伍剂量与各个中药单体和羟基喜树碱进行比照，试验分组为空白对照组，中药复方制剂组，人参皂甙Rg3组，槲皮素组，姜黄素组，阳性对照组(羟基喜树碱)，得到双变量流式细胞仪的散点图，观察中药复方制剂的药物效果用荧光显微镜观察中药复方制剂24h作用人膀胱癌T24细胞株后，细胞膜和细胞核的状态 结果： 通过细胞毒试验和IC50计算分析软件得到三种中药的IC50值，人参皂甙Rg3160μmol/L，姜黄素24μmol/L，槲皮素152μmol/L根据所得的IC50值制定出正交试验因素水平，人参皂甙Rg340μmol/L，80μmol/L，160μmol/L，姜黄素6μmol/L，12μmol/L，24μmol/L，槲皮素38μmol/L，76μmol/L，152μmol/L选取L9(34)表格为本次试验的正交表格，通过细胞毒试验和流式细胞检测凋亡率试验，得到数据代入正交表格，通过正交助手试验分析软件，采用直观分析法得到，A3，B3，Cl均较其他水平好，由极差排列出主次顺序为A>C>B，故得出最正确剂量的配伍为人参皂甙Rg3160μmol/L，槲皮素38μmol/L，姜黄素24μmol/L。

将所得最正确配伍剂量与各个中药单体和羟基喜树碱。