乳与乳制品检验方法1.doc

乳与乳制品检验方法[1]伊利集团内部技术资料乳与乳制品检验方法汇编伊利集团股份有限公司技术中心编制伊利集团内部技术资料乳与乳制品检验方法汇编、乙—刖H本汇编中的掺假检验方法等同采用伊利集团内部检验方法；理化检验方法等同采用GB/T5413（个别项目彳了修改），微生物检验方法等同采用GB4789.本汇编汇集了集团产品常规项目的检验方法，今后如有新的检验方法，将会随时加到此汇编中本汇编由集团技术中心负责编制本汇编主要编制人：马素清姜红云刘丽君刘青本汇编审定人：于飞本汇编自2003年8月1日发布第1页共98页伊利集团内部技术资料乳与乳制品检验方法汇编目录前言1目-2第一部分原料奶新鲜度和掺杂异物的检验方法YLNB1.1酒精实验4YLNB1.2煮沸实验6YLNB1.3美兰8YLNB1.5食盐的检出9YLNB1.6食酸盐，亚硝酸盐的检出10YLNB1.7食粉的检出11YLNB1.8硫酸盐的检出12YLNB1.9蔗糖的检出13YLNB1.10尿素14YLNB1.11饴糖（糖稀）及葡萄糖的检出15YLNB1.12甲-16YLNB1.13乳中不溶性物质的检出17第二部分乳与乳制品理化指标检验YLNB2.,酸度测定18YLNB2.2—分的测定23YLNB2.3全脂乳固体25YLNB2.4冷饮总固形物性测定27YLNB2.5水分29YLNB2.6脂肪的测定31YLNB2.7乳糖和蔗糖的测定40YLNB2.8蛋白质测定48YLNB2.9不溶度指数55YLNB2.10乳与乳粉中杂质度测定60第2页共98页伊利集团内部技术资料乳与乳制品检验方法汇编YLNB2.11硝酸盐，亚硝酸盐测定61第三步分乳与乳制品微生物检验YLNB3.1菌落总数测定69YLNB菌检测79YLNB3.4霉菌和酵母菌的计数84YLNB3.5芽抱和耐热芽抱的测-89YLNB3.6染色技术91YLNB3.7显微技术菌菌菌菌菌菌菌菌菌96第3页共98页伊利集团内部技术资料乳与乳制品检验方法汇编原料奶新鲜度的检验方法酒精实验YLNB1.11原理生鲜牛乳在酸度升高后，与等体积中性酒精混合后会出现絮片；酸度值可根据生成絮片时对应的乙醇浓度粗略地判定出来，参考标准见表1。

表1酒精浓度不出现絮片的参考酸度20oT68o以下19oT70o以下18oT18oT72o以下（包括）1GB/T5409-1985注：、生鲜牛乳新鲜度试验的基准方法为滴定酸度法（参见，使用校pHpH8.3准后的计指示滴定终点）;2试齐1J所有试剂均应为分析纯；实验用水至少应是蒸储水2.1酒精：根据需要用分析纯中性乙醇配制68o,70o,72o的酒精（必要时配制o75的酒精）0.1mol/l1mol/lNaOH5g/l注：如酒精呈酸性，可用或进行中和，中和时推荐使用酚猷指示剂3仪器3.1 80-90mm平皿，直径3.2 温度计3.3 酒精计3.4 25ml量筒，3.5 2ml吸管，4实验步骤4.1准确吸取2ml牛奶于平皿中注:1、该步骤开始后，应将试验连续进行下去直至完成，中间不得间断；2、酒精加入混合均匀后，应在30秒内观察结果；4.2根据需要在加有奶样的平皿中加入2ml酒精，要边加边摇，使酒精与牛奶第4页共98页伊利集团内部技术资料乳与乳制品检验方法汇编均匀混合，观察是否有絮片生成（絮片无论大小）注：试验应在20oC的温度下进行；5结果判定出现絮片的牛乳为酒精试验阳性乳，其酸度可根据表1粗略地判定出来回首页第5页共98页伊利集团内部技术资料乳与乳制品检验方法汇编原料奶新鲜度的检验方法煮沸实验YLNB1.21. .方法提要鲜奶经加热沸腾后，观察残留颗粒的多少，来判定蛋白质热稳定性即新鲜度的好坏。

2. .仪器2 三角瓶:250ml2 量筒:50ml2 电炉及石棉网3. .操作步骤量取50ml鲜奶于250ml三角瓶中，置于电炉上加热，在加热过程中不停摇动当三角瓶中的牛奶沸腾后，将三角瓶取下，稍稍冷却后将牛奶倒掉，用少量水（约10ml）轻轻冲洗三角瓶，观察三角瓶底白色颗粒的多少4.结果判定将三角瓶底白色颗粒的多少与《生鲜牛乳煮沸实验颗粒标准板》进行比较，颗粒数量小于等于图3为合格（液态奶事业部），否则为不合格回首页第6页共98页伊利集团内部技术资料乳与乳制品检验方法汇编原料奶新鲜度的检验方法4. 兰实验YLNB1.31.原理美兰还原试验是用来判断原料乳新鲜程度的一种色素还原试验新鲜乳加入亚甲基兰后染为蓝色如污染大量微生物产生还原酶使颜色逐渐变浅，直至无色，通过测定颜色变化时间，间接推断出鲜奶的卫生质量2.试剂亚甲蓝水溶液:0.01g/300ml1. .仪器1 试管，20mrK200mm1 水浴锅：可恒温到38?2. .步骤2 吸取10ml牛奶于灭菌试管中，在水浴中加热到38?,再加入亚甲基兰溶液1ml,混匀2 将试管放入水浴中，每30min观察一次褪色情况，并记录每个样品褪色时问3. .结果评估通常，通过溶液的褪色时间可以估算出牛奶中细菌总数。

6.影响因素1 细菌的活性：由于原奶在实验前冷藏时间的延长，传统的适温菌丛（产酸菌的牛奶菌丝），逐渐转换为嗜冷菌型（分解蛋白质和脂肪的菌丝），脱色时间和细菌总数之间的相关性变弱1 溶液的退色时间与染色液的浓度有关5.3此方法对体细胞（白细胞）及其他细胞的还原作用也敏感，因此还可检验异常乳（乳房炎及初乳或末乳）回首页第7页共98页伊利集团内部技术资料乳与乳制品检验方法汇编原料奶中掺杂异物的检验方法碱性物质的检出——玫瑰红酸法YLNB1.41. .原理鲜奶中如掺碱，可使指示剂变色，根据颜色的不同，粗略判断加碱量的多少2. .试剂配制：玫瑰红酸（0.05%乙醇溶液）：称取0.05g玫瑰红酸溶于100ml95%的乙醇中3.检验方法于盛有2ml牛乳的试管中加入2ml玫瑰红酸溶液，摇匀，观察颜色变化4.结果判定正常乳：呈黄色，PANTONG色卡021C掺碱乳：呈玫红色，且掺入量与颜色的深浅成正比a量碱:PANTON酰色卡REDCb量碱:PANTON酰色卡032Cc量碱:PANTON酰色卡REDC注：编号为REDcfi勺卡中有一系列的颜色回首页第8页共98页伊利集团内部技术资料乳与乳制品检验方法汇编原料奶中掺杂异物的检验方法食盐的检出YLNB1.51原理鲜奶中氯化物与硝酸银反应，生成氯化银沉淀，用铭酸钾指示剂，当牛奶中的氯化物与硝酸银作用后，过量的硝酸银与铭酸钾生成砖红色的AgCOK淀。

2r42试剂配制2.1. 0.1N硝酸银溶液：取分析纯硝酸银置于105?烘箱内烘30min,取出放在干燥器内冷却后，称取9.6g溶于1000ml蒸储水中2.2. 100g/l铭酸钾溶液：称取分析纯铭酸钾10g溶于100ml蒸储水中注：两种试剂均应储存于棕色试剂瓶备用3仪器2.3. 吸管:2ml2.4. 试管：18X180mm,4实验方法取2ml牛乳于试管中，加入100g/l铭酸钾溶液5滴，摇匀，再加入0.1N硝酸银溶液1.5ml,摇匀后，观察结果注:在加入硝酸银后，应立即观察颜色，做出判定；否则，判定结果会偏高5结果判定正常：呈砖红色，PANTON色色卡471C;掺盐乳：呈黄色，且随着掺入量的增多，颜色由土黄色向鲜黄色变化a量盐:PANTON酰色卡138U;b量盐:PANTON酰色卡124U;c量盐:PANTON酰色卡141U6注意事项6.1试剂加入顺序不同影响测定结果，先加入硝酸银具结果偏高10-20mg%因此应按“牛奶+指示剂+硝酸银”或“指示剂+牛奶+硝酸银”的顺序进行6.2日常试验应尽量在20oC左右的室温下进行，仲裁试验必须在20oC条件下进行回首页第9页共98页伊利集团内部技术资料乳与乳制品检验方法汇编原料奶中掺杂异物的检验方法亚硝酸盐，硝酸盐检出YLNB1.61. .原理鲜奶中的亚硝酸盐与显色试剂作用，形成红色的化合物;鲜奶中的硝酸盐被还原成亚硝酸盐后，再与显色试剂形成红色化合物。

2. .试齐1J哈尔滨龙泽科技有限公司的鲜奶亚硝酸盐和硝酸盐试剂3.操作方法取鲜奶亚硝酸盐或硝酸盐试剂一耳勺(0.04-0.05g)倒入试管中，加入被检奶样1ml,振荡溶解，1-2分钟观察结果2 .结果判定：正常乳：呈无色掺亚硝酸盐或硝酸盐乳：呈粉红色，且由掺入量的增加，颜色逐渐加深a量：PANTONG匕色卡182Cb量：PANTONG匕色卡182U3 .注意事项3.1 伊利集团各事业部统一使用“哈尔滨龙泽科技有限公司”所生产的药品，且一次性采购量不超过6个月的用量3.2 药品贮存3 药品瓶必须用颜色较深的纸包好避光保存3 药品置于干燥的环境中保存，最好放在干燥器中3 已打开包装的药品要密封好后于干燥器中避光保存，如果发现有结块现象应立即停止使用回首页第10页共98页伊利集团内部技术资料乳与乳制品检验方法汇编原料奶中掺杂异物的检验方法淀粉的检出YLNB1.71.. .原理：淀粉遇碘呈兰色反应2.. .试剂：KI—I试剂：碘化钾20g加碘5g先用大约20ml的蒸储水溶解，然后定容至250ml3.. .方法：取乳2ml,加热煮沸，观察乳液是否有沉积现象，然后加入3-5滴KI—I试剂4.. .判定结果：正常奶：呈黄色；掺淀粉奶：呈兰色，且颜色深浅与掺入量成正比。

a量:PANTON叱色卡277Cb量:PANTON叱色卡278Cc量:PANTON叱色卡279C回首页第11页共98页伊利集团内部技术资料乳与乳制品检验方法汇编原料奶中掺杂异物的检验方法硫酸盐的检出YLNB1.84 .原理鲜奶中的硫酸盐与氯化钢形成硫酸钢沉淀，过量的钢离子与玫红酸钠反应生成玫红酸钢呈玫瑰红色若鲜奶中掺入硫酸盐后，因氯化钢被硫酸盐全部沉淀，无游离的钢离子，因而不能与玫红酸反应，故呈黄色5 .试剂配制:5.1 称取氯化钢3克，加蒸储水少许溶解后，加浓盐酸20ml,加蒸储水至250ml2.2玫红酸钠1克，氯化钠49克，干燥研磨至粉末状，密闭保存3.方法：取乳2ml于小试管中，加入玫红酸钠指示剂约0.3克混匀，加氯化钢溶液4-5滴混匀，放置3—5分钟后观察结果4（结果判定：正常乳：呈玫瑰红色最低检出量:0.1%0掺入硫酸盐乳呈黄色或土黄色5（注意事项：1 严格控制酸度，酸度过大易褪色，酸度不足不显色1 对不能判定奶样可取奶10ml,加10%R化钢溶液0.5—1ml离心沉淀，正常鲜奶沉淀物很少，掺硫酸盐奶有较多量硫酸钢沉淀回首页第12页共98页伊利集团内部技术资料乳与乳制品检验方法汇编原料奶中掺杂异物的检验方法蔗糖的检出YLNB1.91.. .原理蔗糖在酸性溶液中水解产生的果糖与溶于强酸内的间苯二酚溶液加热后显红色沉淀反应。

2.. .试剂配制称取问苯二酚0.4克用少量蒸储水溶解，加浓盐酸200ml,再加蒸储水稀释至600ml置棕色瓶，室温保存三个月，冰箱保存半年3.. .方法取问苯二酚盐酸溶液1—2ml于小试管中，加鲜乳5滴，加热煮沸2—3分钟。