慢性粒细胞白血病染色体核型分析及其临床意义.doc

1慢性粒细胞白血病染色体核型分析及其临床意义作者：杨颉刘竹珍吴春梅赵洪国陈兵管洪在 【摘要 】目的探讨慢性粒细胞白血病（CML）不同病期染色体核型特点及其临床意义方法采用 R 显带技术对 124 例 CML 病人进行了常规染色体核型分析，并动态观察部分病人病程进展中染色体核型的变化结果 124 例病人中，Ph 染色体阳性 (Ph+)占93.55％(116/124)， Ph 染色体阴性（Ph-）占 6.45％（8/124） Ph+病人中，94.83％ (110/116)为典型 Ph 染色体易位，即 t(9;22)(q34;q11)；5.17％(6/116)为变异型 Ph 染色体11.21%（13/116）的 Ph+病人出现额外染色体，其中慢性期、加速期和急变期额外染色体的检出率分别为 7.48%(8/107)、33.33%（1/3）和 66.67%（4/6）,加速期和急变期额外染色体的检出率明显高于慢性期(χ2=19.285 ，P<0.01)额外染色体以+8、2Ph、 -21 和 i（17q）多见个别病例同时存在多个异常克隆，多见于 CML 急变期结论 CML 病人病程中继发额外染色体的异常改变与其病程进展密切相关，染色体核型分析对 CML 的诊断、治疗及预后判断具有重要意义。

【关键词】白血病，髓样，慢性；费城染色体；额外染色体；核型分析 慢性粒细胞白血病(CML)是起源于多能干细胞的恶性骨髓增殖性2疾病90%以上 CML 病人白血病细胞中有恒定的、特征性的 Ph 染色体，其中绝大多数为典型易位即 t(9;22)(q34;q11)，少数病人可有变异易位（包括简单变异易位和复杂易位） 随着病情进展，加速期和急变期病人可发生染色体核型演变，即出现 Ph 染色体以外的克隆性染色体异常[1]染色体核型分析对 CML 的诊断、治疗、病情监测及预后判断具有重要的价值[2]现将 124 例 CML 病人染色体核型分析结果报告如下 1 资料与方法 1.1 一般资料 124 例 CML 病人为青岛大学医学院附属各医院门诊及住院治疗的病人，其中男 76 例，女 48 例；年龄 13～74 岁，平均 42岁慢性期 114 例，加速期 3 例，急变期 7 例（3 例初诊时为慢性期，分别于 5 个月～3 年后急变） CML 的诊断和分期参照文献标准[3] 1.2 染色体分析方法 采用骨髓细胞短期培养法（24h ）或外周血不加 PHA 的短期培养法制备染色体标本，然后采用热处理姬姆萨 R 显带技术进行核型分析，113 例病人分析 10～20 个分裂中期细胞，11 例病人分析细胞数少于 10 个。

核型异常参照人类细胞遗传学国际命名体制(ISCNI991)中的有关规定进行描述124 例 CML 病人共做 148 例3次染色体检查，其中大多数病例仅做 1 次，部分病例作了 2～3 次检查 2 结果 2.1 染色体的核型特点 本文 124 例病人中，Ph 染色体阳性(Ph+)116 例(占 93.55％)，Ph 染色体阴性 (Ph-)8 例(占 6.45％)其中慢性期病人中有 107 例Ph+(占 86.29%)，3 例加速期病人均为 Ph+(占 2.42%)，急变期病人中 6 例 Ph+(占 4.84%)Ph+病人中，94.83％(110/116)为典型Ph 染色体易位，即 t(9;22)(q34;q11)，5.17％(6/116)为变异型染色体易位，如 t(13;22)(q33;q11)、t(11;22)(p15;q11)、t(9;22;18)(q34;q11;q21)和 t(1;22;7)(p36;q11;q22)等 2.2 染色体核型演变特点 116 例 Ph+病人中有 13 例（11.21%）出现额外染色体，其中 8 例为慢性期病人，占慢性期病人总数的 7.48%(8/107)；1 例为加速期病人，占加速期病人总数的 33.33%（1/3） ；急变期病人 4例，占急变期病人总数的 66.67%（4/6） ，加速期和急变期额外染色体的检出率明显高于慢性期(χ2=19.285，P<0.01)，额外染色体以+8、2Ph 、-21 和 i（17q）多见。

3 例病人同时存在 2 个异常克隆，1 例病人同时存在 3 个异常克隆，这些病人均多见于急变期43 讨论 CML 是一种造血干细胞的高度异质性疾病，Ph 染色体是其最特异的染色体异常，由此而产生的 bcr/abl 基因重排是 CML 较为特征性的分子标志，也是客观准确地确定 CML 的主要依据[1] 文献报道，大约 93％的 CML 病人 Ph 染色体阳性， 7%的病人 Ph 染色体阴性我们所检测的 124 例病人中 Ph 染色体阳性病人占93.55％，阴性病人占 6.45%，与文献报道一致 [4]对于 Ph-的CML 可进一步分为 Ph(-)bcr abl(+)和 Ph(-)bcr abl(-)，前者仍属于 Ph+的 CML，后者可能并非真正的 CML，而是不典型的其他骨髓增殖性疾病[5]由此可见，染色体及融合基因的检测不仅有助于CML 的诊断和鉴别诊断，而且可以对其进行细胞遗传学分型，细胞遗传学分型对 CML 的治疗具有重要的临床价值 有资料显示，在 Ph+的 CML 中，大约有 94%病人有典型的Ph 易位，而仅有约 6%病人发生变异型 Ph 染色体易位，包括简单变异易位（22 号与非 9 号之间的易位）和复杂变异易位（3 条或更多条染色体易位） 。

在变异易位的病例中除 Y 染色体外，所有其他染色体均可被累及[6,7]本研究结果与上述文献结果基本一致，大约94.83％的 CML 病人为典型 Ph 染色体易位，5.17％为变异易位，如 t(13;22)(q33;q11)、t(11;22)(p15;q11)、t(9;22;18)(q34;q11;q21)和 t(1;22;7)(p36;q11;q22)等简单易位的分子生物5学研究结果显示，位于 9 号染色体长臂上的 abl 癌基因总是受累，都存在 9q34 和 22q21 的易位，表明简单变异易位实际上都存在着9q34 和 22q21 的易位，也就是说所有的简单变异型 Ph 染色体都可以看作是一定的检测手段检测不出来的复杂变异型 Ph 染色体[8,9]由此可见，变异易位和复杂易位都有共同的分子病理学改变，因此二者在临床、血液学表现和预后特征等方面几乎没有区别一般认为，在 CML 急变时 70%的病人常出现额外染色体的改变，最多见的改变依次为+8,2Ph 和 i(17q)CORTES 等[9] 报道，慢性期、加速期和急变期 CML 病人核型演变的发生率分别为7.5%、40.0%、80.0%。

本文 CML 病人慢性期、加速期和急变期核型演变的发生率分别为 10.28%、66.67%和 83.33%，与文献基本相似本文还显示存在 2 个或 3 个异常克隆者主要见于急变期，这说明染色体核型演变主要和 CML 病情进展相关最常见的额外染色体异常依次为+8、2Ph 、-21 和 i（17q） ，三者可单独或联合出现，以+8 合并 2Ph 最多见另外，我们的临床随访还显示，部分病人检出额外染色体异常时，临床上尚无急变征象，表明核型演变往往和急变同时或更早发生因此，CML 病程中监测染色体核型的改变对预测 CML 病情进展及预后判断有一定价值 一般而言，Ph 染色体存在于 CML 的整个病程中，常规化疗对其无明显影响但近来研究显示，Ph 染色体的消长与治疗有一定的相关性，部分病人经骨髓移植或某些化疗药物治疗后 Ph+细胞的6百分比有所下降，少数甚至完全转阴[10]因此，CML 病程中进行染色体核型监测还有助于判断疗效 【参考文献】 [1]许文荣,王建中. 临床血液学与检验[M].第 4 版. 北京：人民卫生出版社,2007:268 272. [2]姜道滋,陈志妹 ,楼基余,等.1193 例慢性粒细胞白血病细胞及分子遗传学分析[J].中华血液学杂志,2007,28:1 5. [3]张之南.血液病诊断及疗效标准 [M].第 2 版.北京: 科学技术出版社,1998:219 221. [4]HEIMS,BILLSTROMR,KRISTOFFERSSONU,etal.VariantPhtranslocationinchronicmyeloidleukemia[J].CancerGenetCytogenent,1985,18:215 227. [5]薛永权,过宇 ,顾建明,等.Ph 染色体阴性和少见 Ph 易位慢性粒细胞白血病的细胞遗传学及分子生物学研究[J].中华医学杂志,1993,73:209 212. 7[6]AGSSADM,OREBG,ZABEDL.Karyotypeanalysisinchronicmyelogenousleukemia.Athree yearexperienceattheAmericanUniversityofBeirutMedicalCenter[J].JMedLiban,1998,46:16 19. [7]HAGEMEIJERA,BARTRAMCR,SMITEME,etal.Isthechromsomealregion9q34alwaysinvolvedinvariantofthePhtranslocation[J]?CancerGenetCytogenet,1984,13:1 16. [8]ISHIHARAT,MINAMIHISAMATSUM.ThePhiladephiachromosome,considerationsbasedonstudiesofvariantPhtranslocations[J].CancerGenetCytogenet,1988,32:75 92. [9]CORTESJE,TALPAZM,GILESF,etal.Prognosticsignificanceofcytogeneticclonalevolutioninpatientswithchro nicmyelogenousleukemiaonimatinibmesylatetherapy[J].Blood,2003,101:3794 3800. [10]王术国,管洪在, 扈新花，等.慢性粒细胞白血病 smac 和survivin 基因表达及意义[J]. 青岛大学医学院学报,2008,44(1):851 53.。