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番鸭细小病毒病.docx

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  • 卖家[上传人]:206****923
  • 文档编号:41591760
  • 上传时间:2018-05-30
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    • 番鸭细小病毒病(Muscovy Duck Parvovirus Disease)雏番鸭细小病毒病是由番鸭细小病毒(Muscovy duck parvovirus,MDPV)引起的一种急性、败血性传染病,其特点是具有高度传染性和死亡率该病主要发生于3周龄以内的雏番鸭,因此又称雏番鸭“三周病”;发病率和死亡率可达40%~50%以上,是目前番鸭饲养业中危害最严重的传染病之一,严重影响养鸭业的发展本病的发生无季节性,一年四季均可发病我国是发现和研究番鸭细小病毒最早的国家,1985年以来,在我国福建等南方多省均出现该病pJ,而后,法国、美国、日本等地也相继报道本病的流行1988年,程由铨等首次分离并鉴定该病的病原为番鸭细小病毒一)病原番鸭细小病毒(Muscovy duck parvovirus,MDPV)为细小病毒科(Parvoviridae)细小病毒属(Parvovirus)成员,含单股线状DNA,约5.2kb在电镜下病毒呈晶格状排列,有实心和空心两种病毒粒子,直径24~25nm,无囊膜,正20面体对称,直径约3~4nm病毒无血凝特性MPV在氯化铯中沉淀时具有三条区带,其密度分别为1.28~1.30、1.32、1.42g/cm3,其中第3条具有感染性。

      病毒具有的4种结构多肽及其相对分子质量分别为:VP1(89000)、VP2(68000)、VP3(58000)和VP4(40000),其中VP3为主要结构多肽病毒目前只有一个血清型尿囊腔途径接种11~13日龄番鸭胚、11~12日龄麻鸭胚、12~13日龄鹅胚能够感染并一定程度致死胚体不感染鸡胚能适应番鸭胚成纤维细胞(MDEF)、番鸭胚肾细胞(MDEF)生长并形成细胞病变对鸡、番鸭、麻鸭、鸽、猪等动物红细胞无凝集作用能抵抗乙醚、胰蛋白酶、酸和热,但对紫外线辐射敏感二)免疫成年番鸭自然或人工感染MDPV均无临床症状,但可产生中和抗体,康复番鸭血清中也有中和抗体,成年番鸭免疫可产生中和抗体并可使后代获得保护,番雏鸭注射康复番鸭或免疫番鸭血请后可获得被动免疫弱毒疫苗接种雏鸭后3d,部分番雏鸭产生免疫,7d全部产生免疫,21d抗体水平达到高峰三)疫苗[雏番鸭细小病毒病活疫苗](1) 种毒 番鸭细小病毒P1株2) 制造要点 接毒:使用番鸭胚成纤维细胞培养,在接种时将培养液弃去,加入适量种毒,置37℃吸附1h后加入维○1持液继续培养培养和观察:接毒后观察细胞病变,待75%以上的细胞出现细胞病变时即可收获。

      收获:将○2○3细胞摇下,连同培养液收获于灭菌容器内配苗:收获细胞培养液制备的液体苗或加适宜稳定剂,经冷冻真空○4干燥制成冻干苗3) 质量标准 除按《成品检验的有关规定》检验外,进行如下检验:安全检验:用一日龄健康易感雏鸭5只,各腿部肌肉注射疫苗0.2ml(病毒含量为2×103.5TCID50,即10个使用剂量),○1观察20d,应全部健活效力检验:下列方法任择其一○2用1日龄健康易感雏鸭5只,各腿部肌肉注射疫苗0.2ml(病毒含量为2×102.5TCID50),观察15d后,分别心脏采血,分离血清,测定血清中胶乳凝集抑制效价(LPAI)应≥4为合格,若其中有1份血清LAPI≤2,可重检一次用1日龄健康易感雏鸭5只,各腿部肌肉注射疫苗0.2ml(病毒含量为2×102.5TCID50),7d后,连同条件相同的对照雏番鸭5只,各胸部肌肉注射强毒F株含毒胚液0.5ml,观察15d对照组鸭至少2只死亡,免疫组鸭全部保护为合格否则重检一次4) 保存与使用 冻干苗在-20℃保存,有效期为3a;在2~8℃为2a液体苗在-20℃保存,有效期为18个月可用于预防雏番鸭细小病毒病,腿部肌肉注射,免疫后7d产生免疫力,免疫期为6个月。

      四)诊断制剂应用活疫苗及强毒抗原免疫兔或鹅制备高免血清,用于中和试验及雏番鸭保护试验也可应用单克隆抗体或纯化的MDPV抗原免疫等获得高免血清(多克隆抗体),建立荧光抗体试验(FA)或乳胶凝集试验(LA)MDPV抗原用一定的方法获得纯化的抗原,可用于包被酶标板建立酶联免疫吸附试验(ELISA)或琼脂扩散沉淀试验(AGP),检测MDPD抗体五)治疗制剂用活疫苗反复免疫健康成年鸭,AGP效价为1:32以上时,收集鸭血清用于5日龄雏番鸭,可大大地减少发病率,用量为每只雏鸭皮下注射1ml对发病鸭进行治疗时,使用剂量为每只雏鸭皮下注射3ml,治愈率可达70%。

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