明胶检验方法.ppt

明胶检验方法,明胶质量指标一般包括：胶冻强度、勃氏粘度(6.67%) 、粘度下降(6.67%) 、水分、灰分、透明度、透过率、二氧化硫、pH值、等电点、水不溶物、铬、重金属（以铅计）、砷、细菌总数、大肠杆菌、沙门氏菌、霉菌和酵母菌等前言,胶冻强度,原理：在严格规定的条件下，直径为12.7mm的圆柱，压入6.67% 明胶胶冻表面以下4mm 时，所施加的力代表胶冻强度，以Bloom g 为单位仪器和设备： 冻力仪冻力瓶：容量150ml，内径53±2mm，高度85mm恒温槽：可控制水浴温度10±0.1℃（带制冷机）水浴锅：可调节到65±1℃测定步骤：称取胶样x克：将x克样品直接称于冻力瓶中，加蒸馏水至120克，盖上瓶塞，胶样吸水膨胀2~3小时，然后在65±1℃水浴槽中15分钟，水浴溶解成均匀胶液取出于室温冷却至胶液温度约25℃，然后置于10±0.1℃低温槽内冷却16~18小时预先按冻力仪操作规程校正冻力仪将冻胶瓶从恒温低温槽中取出，迅速放在冻力仪圆台上进行测定结果表示：直接从冻力仪中读出试验的凝冻强度，单位Bloom g 表示勃氏粘度(6.67%),原理：在60℃温度下，测定6.67% 明胶溶液流过标准毛细管所经过的时间。

仪器： 粘度计恒温槽水浴锅：可调节到65±1℃温度计：准确到0.1℃三角烧瓶：250ml秒表 测定步骤：称取胶样x克将x克样品直接称于三角烧瓶中，加蒸馏水至120克, 加上瓶塞 , 胶样吸水膨胀2～3小时 , 将250mL三角烧瓶放在65±1℃水浴锅中溶解30分钟，并溶解成均匀溶液，待用开启恒温槽，使粘度计夹套的温度保持在60±0.1℃把胶液注入C型管上标线2cm处，将C管置于60℃恒温槽内，当胶液温度稳定在60±0.1℃时，将胶液水平调节到上刻线，按下秒表，当胶液水平达到下刻线时，停下秒表，记下秒数结果表示：粘度（6.67%）= 秒数×C型管常数×1.008 （mPa·s）,粘度下降(6.67%),原理：测定6.67%粘度的胶液在37℃培养箱内，培养24小时后粘度的下降仪器和设备：粘度计恒温槽秒表三角烧瓶温度计：准确至0.1℃水浴锅培养箱：可控制到37±1℃测定步骤将测定6.67%粘度的胶液在37℃培养箱内，培养24小时后取出，用C管按测定粘度的方法再测其粘度结果表示：,,水分,原理：取大约5克明胶，在105℃烘箱烘至恒重，根据质量的减少计算明胶中含水量 仪器和设备： ——平底铝制或不锈钢小盒：直径70mm~75mm，高15mm，质量小于20g； ——烘箱：可控制温度（105±2）℃； ——分析天平：感量1mg； 测定步骤： a）在已知恒重的平底铝制或不锈钢小盒中称取5±0.5克样，准确至0.001g； b）将小盒移至烘箱中，在（105±2）℃下烘干。

在烘箱中将小盒盖严，取出置于干燥器中，冷却至室温，在分析天平上称量； c）将小盒再移至烘箱中烘30min，重复b）操作如此反复数次，直到两次质量相差小于3mg 结果计算： 胶样含水量X1(％)按式(1)计算 m-m2 m1——空盒的质量，g X1(％)=————×100% m2——空盒加烘干后胶样的总质量，g m-m1 m——空盒加原胶样总质量，g允许误差：两次平行测定值相对误差应不超过0.4％灰分,原理：明胶在550℃高温炉中灼烧，留下白色或淡黄色灰分称重，便可计算出灰分 仪器：高温炉；瓷坩埚； 分析天平（精确到1mg）；保干器 测定步骤： a)预先将坩埚灼烧至恒重 b)称取胶样1g(以12％水分计)，准确至1mg，置于坩埚中 c)将坩埚置于弱火上焙灼，直至有机物完全烧去 d)将坩埚置于550℃高温炉中灼烧，使黑色炭质氧化至坩埚中留下白色或淡黄色灰分为止 e)将坩埚放在保干器中冷却至室温, 然后称其质量。

f)重复d）和e）直至二次重量相差小于2mg为恒重 结果计算：灰分百分含量X3（%）按下式计算：G2-G1 G——胶样加坩埚重，g X3（%）=———×100% G1——坩埚重，g G-G1 G2——灼烧后坩埚与残渣总重，g 允许误差：二次平行测定值绝对误差不超过0.2％透明度,原理：测5%的明胶溶液在40℃时在特制的玻璃管中的透明度程度 仪器和设备：透明度测管 测定步骤：称取30克明胶样品，放入500mL的烧杯中，加蒸馏水570g，在室温下膨胀2小时将烧杯置于60℃水浴中溶解均匀沿透明度筒壁小心地倒入40℃以上的明胶溶液，直到从筒口看不清筒下的文字为止，然后慢慢地通过侧管放出胶液，同时观察文字，在能够看清胶液下面的文字时，停止放出胶液结果表示：按筒壁刻度读出筒内留下胶液高度的毫米数就是该胶的透明度透过率,原理：在45℃温度下，用分光光度法来测定6.67%明胶溶液在450nm和620nm的透过率 仪器：分光光度计 测定步骤：a)配制6.67%明胶溶液，温度冷却至48℃。

b)将胶液倒入10mm比色皿，用蒸馏水作基准c)将分光光度计波长调节到波长450nmd)在45℃温度下，测定透过率e)将波长620nm，立即测定透过率结果表示：直接用二个波长的百分透过率来表示允许误差：两次平行测定值绝对误差不超过2%二氧化硫,原理：将明胶中的亚硫酸盐转变成硫酸，用碱滴定，通过所消耗的碱量计算出二氧化硫含量 试剂：硫酸：分析纯，1＋4； 过氧化氢：30％，分析纯，1＋9； 甲基红－亚甲基蓝混合指示剂：0.5g甲基红和0.33g亚基蓝溶于200ml乙醇中 仪器： 二氧化硫测定装置（附后） 测定步骤：在500ml烧瓶内放入75ml蒸馏水和20.0g胶溶胀后加入25ml(1＋4)的硫酸溶液，使烧瓶与冷凝管连接，另外在接受器内放入20ml(1＋9)的过氧化氢，并中和至指示剂终点 (在过氧化氢内加入2滴甲基红－亚甲基蓝指示剂，颜色即呈浅紫色，用氢氧化钠中和到终点时，颜色呈草绿色)将冷凝管用接管导入过氧化氢底部，加热煮沸三角烧瓶中的蒸馏水，将蒸气通入烧瓶的底部,收集80ml馏出液, 包括20ml过氧化氢,接受器内溶液总体积为100ml,补加甲基红─亚甲基蓝指示剂1滴，用氢氧化钠标准溶液滴定至颜色呈草绿色为终点。

图2 二氧化硫测定装置1-24#标准磨塞接管: 2-1000ml 24#标准磨口三角烧瓶(8009/1000/24): 3-可调式控温电阻炉; 4-乳胶管; 5-24#标准磨塞接管; 6-500ml 24#标准磨口短颈平底烧瓶(8007/500/24); 7-24#标准磨口平行三通连接管(U型连接管)(8053/24ⅹ3); 8-24#标准磨口回液管(氮球)(8057/24ⅹ2); 9-400mm 24#标准磨口直形冷凝管(8031/400/24ⅹ2); 10-24#标准磨口蒸馏接受管(105℃)(8086/24); 11-冷凝液接受瓶; 12-冷水浴,明胶二氧化硫含量(X3)按下式计算：M(V-V1)×0.064×1/2 X3=——————————×106 G 式中：X3——二氧化硫含量，mg/kg；M——标准氢氧化钠溶液的摩尔浓度，mol/L；V——消耗标准氢氧化钠溶液的体积，ml；V1——空白消耗标准氢氧化钠溶液的体积，ml；0.064——二氧化硫的毫摩值，即毫摩质量mg/molG——称取样品重量，g允许误差：二次平行测定值绝对误差不超过10mg/kg。

pH值,原理：在35℃，用pH仪测定1％明胶溶液的pH值； 仪器和试剂：pH仪：0.1刻度；磷酸二氢钾：pH6.0 测定步骤：用pH6.0的磷酸二氢钾溶液校正pH仪；配制1％胶液，在35℃温度下，用pH仪测定胶液的pH值 结果表示：直接从pH仪上读出pH值 允许误差：两次测定允许误差为±0.1pH等电点,原理： 通过阳、阴离子交换树脂，将胶液去离子后，测定胶液的pH值 仪器： pH仪恒温水浴锅 试剂： 再生阳离子732：用7%的盐酸溶液浸60~90分钟，然后用纯水洗至pH4~5，备用再生阴离子717：用4%氢氧化钠溶液浸120分钟，然后用纯水洗至pH8~9，备用 测定步骤：精确称取胶样0.50g，放有100mL纯水的250mL三角烧瓶中，在室温膨胀2~3小时，然后在60℃水浴锅中溶解待胶液冷却至32℃左右时，称取阳、阴离子各3.0g，置于胶液中，将三角烧瓶置于磁力搅拌器平台上，于30±2℃水浴中自动搅拌1小时倾出胶液，用pH仪测定pH值（要求胶液的电导率小于25us/mm） 结果表示：pH仪测定的pH值为胶的等电点 允许误差：两次测定允许误差为±0.1pH水不溶物,原理：用玻璃坩埚过滤胶液而得出不溶物的量。

仪器： —— 600ml璃烧烧杯；——3号砂芯玻璃坩埚 测定步骤： a)将玻璃坩埚在105～110℃烘干，称重(W1) b)称取（10±1）g胶样(W)，准确至0.1g，倒入烧杯中，加蒸馏水膨胀，加热熔解成500g胶液； c) 将胶液用抽滤法通过玻璃坩埚 d)用热水洗坩埚上残渣3次 e) 将坩埚置于105～110℃烘箱里烘干 f)从烘箱中取出坩埚，置于保干器中冷地至室温 g)取出坩埚称重 h)重复e)~g)操作，直至恒重(W2) 结果计算： W2-W1 W1——坩埚质量，g x=————×100% W2——坩埚与残渣重量，g W W——胶样质量，g 允许误差：两次平行测定值相对误差不超过1％铬的测定,原理：用二苯碳铣二肼(二苯胺基脲)比色法，可使微量铬在540nm波长处呈现明显的吸光度差别 仪器：分光光度计;马弗炉; 试剂： a)、0.5%高锰酸钾溶液：称取0.5g高锰酸钾(分析纯)，溶解并稀释至100ml，贮存于棕色瓶中； b)、10%尿素溶液：称取10g尿素(CO(NH2)2，分析纯)，溶解并稀释至100ml，贮存于棕色瓶中，置于暗冷处； c)、10%亚硝酸钠溶液：称取10g亚硝酸钠，溶解并稀释至100ml，贮存于棕色瓶中，置于暗冷处，或随用随配； d)、二苯碳酰二肼丙酮溶液：称取0.125g二苯碳酰二肼[CO(NH•NH•C6H5)2分析纯]，溶于由25ml丙酮和25ml水配成的混合液中，随用随配，放置于暗处； e)、0.5%焦磷酸钠溶液：称取0.5g焦磷酸钠(分析纯)，溶解并稀释至100ml，贮存于试剂瓶中； f)、铬标准溶液(0.02mg/ml)：准确称取0.0566g重铬酸钾(优级纯，在玛瑙研钵中研细，并在105℃~110℃干燥3h~4h后，置于保干器中冷却)，置于小烧杯中，用水溶解，移入1000ml容量瓶中，加水至刻度； g)、1mol/L硫酸溶液：量取28ml硫酸(分析纯)，缓缓加入盛有一定量纯水的500ml容量瓶中，再加纯水至刻度；,测定步骤： a)、绘制标准工作曲线：吸取铬标准溶液0, 0.20, 0.40, 0.60, 1.00, 1.60, 2.00, 2.60ml，分别相当于溶液含铬0, 4, 8, 12, 20, 32, 40, 52 μg。

置于烧杯中，分别加入1mol/L硫酸溶液10ml及纯水10ml，加热煮沸，滴加0.5%高锰酸钾至溶液不褪色，冷却，移入50ml容量瓶中，加入10%尿素溶液10ml，在剧烈振摇下滴加10%亚硝酸钠溶液至溶液褪色加入0.5%焦磷酸钠溶液2.0ml，二苯碳酰二肼丙酮溶液0.5ml补足纯水至刻度，摇匀，放置30min后于波长540nm处测定吸光度值，以吸光度值为横坐标，铬含量为纵坐标，在坐标纸上绘制出标准工作曲线 b)、样品预处理及测定：准确称取明胶样品(G)3.000g，于坩埚中，缓慢升温，使之炭化，冷却，加浓硝酸数滴，慢慢加热，气体停止逸出时移入马弗炉中，在600℃下加热至黑色颗粒消失(2h)，取出待冷却后加1mol/L硫酸溶液10ml及纯水20ml使残渣溶解，在水浴上加热5min滴加0.5%高锰酸钾溶液煮沸，溶液紫红色消失时再滴加0.5%高锰酸钾溶液煮沸，如此反复直至紫红色不褪为止，冷却，加10%尿素溶液10ml，在剧烈振摇下滴加10%亚硝酸钠溶液，直至过量的高锰酸钾完全消除，溶液呈无色，如二氧化锰明显存在则过滤把溶液移入50 ml容量瓶中，加入0.5%焦磷酸钠溶液2.0ml，二苯碳酰二肼丙酮溶液0.5ml。

补足纯水至刻度，摇匀，放置30min取上述溶液，在540nm波长处测定吸光度值，即可在ccr-D540标准工作曲线上查到该称量明胶样品总的铬含量(G1) G1 计算结果：明胶铬含量（mg/kg）=—— G——样品的重量，g G G1——在ccr-D540标准工作曲线上查到的铬含量μg,。