
光周期途径菊花成花相关基因的筛选及其表达分析.pdf
74页关于学位论文原创性和使用授权的声明 本人所呈交的学位论文,是在导师指导下,独立进行科学研究所取得 的成果对在论文研究期间给予指导、帮助和做出重要贡献的个人或集体, 均在文中明确说明本声明的法律责任由本人承担 本人完全了解山东农业大学有关保留和使用学位论文的规定,同意学 校保留和按要求向国家有关部门或机构送交论文纸质本和电子版,允许论 文被查阅和借阅本人授权山东农业大学可以将本学位论文的全部或部分 内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存 论文和汇编本学位论文,同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文 收录到《中国学位论文全文数据库》,并向社会公众提供信息服务 保密论文在解密后应遵守此规定 论文作者签名:位i 量业 导师签名:苤受盛遄墨 日 英文缩写符号及中英文对照表 I I [ 11 [ 1 1T II l lT i llI IIIf Y 2116 7 9 7 缩写符号英文名称中文名称 A B A A c r A F L P 心 B i s b p C D N A C T A B C T K d d H 2 0 D E P C d N T P E B E D l ’A G A I S S R I P T G L B ‘P A G E P C R P V P R A P D R F L P A b s c i s i ca c i d A c r y l a m i d e A m p l i f i c a t i o nf r a g m e n tl e n g t h p o l y m o r p h i s m A m m o n i u mp e r s u r f a c e N ,N —m e t h y l e n e —b i s —a c r y l a m i d e b a s ep a i r c o m p l e m e n t a r yD N A C e t y l t r i m e t h y la m m o n i u mb r o m i d e C y t o k i n i n D i s t i l l e da n dd e i o n i z e dw a t e r D i e t h y lp y r o c a r b o n a t e D e o x y r i b o n u e l eo s i d e t r ip h o s p h a t e E t m d i u mb r o m i d e E t h y l e n ed i a m i n et e t r a a e e t ia c i d G i b b e r e l l i ca c i d I n t e r - s i m p l es e q u e n c er e p e a t I s o p r o p y l p —D ·l - T h i o g a l a c t o p y r a n o s i d e L u r i a .B e r t a n im e d i u ml u r i a - b e r t a n i P o l y a c r y la m i d eg e le l e c t r o p h o r e s i s P o l y m e r a s ec h a i nr e a c t i o n P o l y v i n y l p y r r o l i d o n e R a n d o ma m p l i f i e dp o l y m o r p h i c D N A R e s t r i c t i o nf r a g m e n tl e n g t h 脱落酸 丙烯酰胺 扩增片段长度多态性 过硫酸铵 甲叉双丙烯酰胺 碱基对 互补脱氧核糖核酸 十六烷基三乙基溴化铵细 胞分裂素 双蒸水 焦碳酸二乙酯 脱氧核糖核苷三磷酸 溴化乙锭 乙二胺四乙酸 赤霉酸 简单重复序列间扩增 异丙基一p —D 一硫代吡喃半 乳糖苷 培养基 聚丙烯酰胺凝胶电泳 聚合酶链式反应 聚乙烯吡咯烷酮 随机扩增多态D N A 限制性片段长度多态性 p o l y m o r p h i s m r _ _ - ●_ ●_ - _ _ I _ ●_ ●_ _ I - 一I l l l l l _ - ●_ _ _ _ _ - _ _ _ - _ - ●- _ _ - _ _ R T - P C R R e v e r s e 吣r i l m o nP C R 反转录P C R S C A RS e q u e n c ec h a r a c t e r i z e d 锄p l i f i e d 特征序列扩增区域 陀g i o n S D S S S R T B E T D F T E M 匝D 弼S X - g a l S o d i u md o d e c y Is u l f a t e 十二烷基硫酸钠 S i m p l es e q u e n c er e p e a t s 简单串联重复序列 T r i s /b o r a t ca c i d /E D T Ab u f f e rT r i s /硼酸/E D l ’A 缓冲液 T r a n s c r i p t i o nd e r i v e df r a g m e n t s 转录衍生片段 t e t r a m e t h y le t h y l e n ed i a m i n e 四甲基乙二胺 T r i s ( h y d r o x y m e t h y l ) a m i n o m e t h a n e 三( 羟甲基) 氨基甲烷 5 - B r o m o - 4 一c h l o r o 一3 ·i n d o l y l p .半乳糖苷酶的底物 p .D .g a l a c t o p y r a n o s i d e 目录 中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯I A B S T R A C T ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.I I I l 弓I 言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.1 1 .1 高等植物成花研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。
l 1 .1 .1 高等植物花发育⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2 1 .1 .2 高等植物成花诱导⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3 1 .1 .3 高等植物成花诱导途径研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3 1 .2 光周期途径诱导植物开花研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4 1 .2 .1 光周期反应类型⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.4 1 .2 .2 光周期刺激的感受和发生作用的部位⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5 1 .2 .3 植物对光周期反应的敏感时期⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5 1 .3 光周期途径诱导高等植物成花的分子调控机制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6 1 .3 .1 光受体感知光信号⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6 1 .3 .2 生物节律钟系统⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7 1 .3 .3 水稻光周期调节成花机制的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1 0 1 .4 光周期对菊花开花的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1 2 1 .4 .1 菊花花芽分化研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.1 3 1 .4 .2 光周期对‘神马’花芽分化和开花的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1 3 1 .5 分子标记技术的原理及特点⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1 4 1 .5 .1R F L P 枥;记⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.1 4 1 .5 .2R A P D 标记⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l5 1 .5 .3S C A R 标记⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..15 1 .5 .4S S R 标记⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.1 6 1 .5 .5I S S R 标记⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。
l6 1 .5 .6A F L P 标记⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.1 7 1 .6C D N A .A F L P 技术及其应用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l8 1 .6 .1C D N A .A F L P 技术的基本原理和实验流程⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1 8 1 .6 .2C D N A .A F L P 技术的优点⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.1 9 1 .6 .3C D N A .A F L P 技术在植物表达分析上的应用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1 9 ●■’’一~———————— 1 .7 本研究的目的意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2 0 2 菊花C D N A - A F L P 分析体系的建立⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2 2 2 .1 试验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2 2 2 .1 .1 材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。
2 2 2 .1 .2 主要仪器与试验试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..2 3 2 .2 试验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2 3 2 .2 .1 总R N A 的提取及纯化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.2 3 2 .2 .2 双链C D N A 的合成及纯化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.2 6 2 .2 .3C D N A 酶切及连接体系的建立⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2 7 2 .2 .4P C R 体系的建立⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2 8 2 .2 .5P I A G E 电泳⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.3 0 2 .2 .6 银染显色体系的建立⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.3 1 2 .3 结果与分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.3l 2 .3 .1 总R N A 的提取⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.3l 2 .3 .2C D N A 酶切、连接和预扩增⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。
3 2 2 .3 .3 选择性扩增产物聚丙烯酰胺凝胶电泳结果分析与银染⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3 3 2 .4 讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..3 3 2 .4 .1 菊花总R N A 的提取和双链C D N A 的合成⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3 3 2 .4 .2C D N A .A F L P 试验体系⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。
