实验十三 维生素ad胶丸中维生素a的含量测定.ppt

实验实验实验实验 十三十三 维生素维生素ADAD胶丸中维生素胶丸中维生素A A 的含量测定的含量测定简介简介维生素A的结构为具有一个共轭 多烯醇侧链的环己烷，由于其中 有多个不饱和键，性质不稳定， 易被空气中氧或氧化剂氧化，易 被紫外光裂解，并且其对酸不稳 定其醋酸酯比维生素A稳定，临 床使用一般将本品或棕榈酸酯溶 于植物油中应用因此，维生素A 及其制剂除需密封在凉暗处保存 外，还需充氮或加入合适的抗氧 剂维生素A与氯仿、乙醚、环己 烷或石油醚能任意混合，在乙醇 中微溶，在水中不溶一一 目的要求目的要求掌握UV三点校正法的原理和维生素A含量测定的方法二二 基本原理基本原理1.杂质的无光吸收在310nm～340nm的波长范围内几乎呈一条直线，且随波长的增长吸收度下降2.物质对光吸收呈加和性的原理即在某一样品的吸收曲线上，各波长处的吸收度是维生素A与杂质吸收度的代数和，因而吸收曲线也是二者的叠加 三三 实验仪器与器材实验仪器与器材1.溶液和试剂：维生素A胶丸（规格2.5万单位/粒）、环己烷、乙醚2.仪器和其他用具：紫外可见分光光度仪（具扫描功能）、分析天平、石英比色皿、25mL容量瓶若干、移液管、注射器、刀片、烧杯若干个。

四四 操作步骤操作步骤1.胶丸内容物平均重量的测定取胶丸20粒，精密称定，（2.4641g），用注射器将内容物抽出，再用刀片切开丸壳，用乙醚逐个洗涤丸壳三次，置50mL烧杯中，再用乙醚浸洗1-2次，置通风处，使乙醚挥散，精密称定，得总壳重（0.7213g），算出每丸内容物的平均重量四四 操作步骤操作步骤2.供试品溶液的制备与测定第一种方法方法：精密称取一粒维生素AD胶丸内容物 （0.0048g），用环己烷溶解并定量稀释成 25mL取0.8mL再用环己烷稀释至25mL，即 制成每mL中含9~15单位的溶液按照分光 光度法，测定其吸收峰的波长，并分别在 300nm,316nm,328nm,340nm,360nm五个波长 下测定吸收度四四 操作步骤操作步骤计算：（1）求E1%1cm ：由 A= E1%1cm ×C×L求得 E1%1cm =A/（C×L）（2）求效价（IU/g）：效价系指每克供试品中所含维生素A的国际单位数（IU/g）即IU/g= E1%1cm ×1900四四 操作步骤操作步骤（3）求维生素A占标示量的百分含量： 标示（% ）= （E1%1cm×1900×W）/标示量 ×100%=（A×D×1900×W）/（W×100×L×标示量）×100%四四 操作步骤操作步骤（4） A值的选择首先计算吸收度比值（即Ai/A328）① 如果最大吸收波长在326nm～329nm之 间，并分别计算5个波长下的差值，均不得 超过±0.02时，则不用校正公式计算吸收 度，而直接用328nm处测得的吸收度A328求 得E1%1cm。

四四 操作步骤操作步骤②如果最大吸收波长在326nm～329nm之间， 并分别计算5个波长下的差值，如有一个或 几个超过±0.02，这时应按以下方法判断 ：第一法校正公式：A328(校正)=3.52(2A328-A316-A340)再按下式计算校正吸收度与实测吸收度 的差值对实测吸收度的百分率（d）： d =（A328(校正) —A328(测)）/ A328(测) ×100% ③如果最大吸收波长不在326nm～329nm之间 ，也不能用本法测定，而应用第二法（皂 化法）测定含量四四 操作步骤操作步骤 第二种方法方法：精密称取供试品适量（约相当于维生素A 总量500单位以上，重量不多于2g），置皂化瓶中 ，加乙醇30mL与50％（g/g）氢氧化钾溶液3mL， 依法皂化后用不含过氧化物的乙醚提取并定量稀 释成每1mL中含维生素A为9~15单位的溶液，在300 、310、325、334nm波长处测定吸光度，并确定最 大吸收波长（应为325nm） 计算：计算同第一法，换算因子为1830第二种方法校正公式：A325（校正）=6.815A325－2.555Ａ310－4.260A334四四 操作步骤操作步骤维生素A吸收度差值五五 结果与讨论结果与讨论（1）计算各波长处吸收度与328nm处吸收度 比值，并与规定值比较。

（2）计算校正吸收度，并与实测值比较，即 求d （3）求（E1%1cm） （4）求效价（IU/g） （5）求标示量的百分含量。