分析化学综合性实验.docx

分析化学综合性实验苯的同系物的分离与定性鉴别及麝香祛痛搽剂中樟脑、薄荷脑与冰片的含量测定第一部分苯、甲苯、乙苯、对二甲苯、间二甲苯与邻二甲苯的气相色谱法分离与苯的定性鉴别一、实验目的1. 掌握气相色谱仪的使用2. 掌握利用标准品直接对照定性的原理与方法3. 熟悉色谱系统适用性试验的方法二、实验原理依据同一物质在同一色谱柱和相同操作条件下保留值相同的原理，利用标准品直接对照定性是气相色谱中一种常用的定性鉴别方法它分别测量标准品和样品在同一实验条件时的保留值，通过比较来定性该方法适用于鉴别范围已知的未知物三、仪器与试剂气相色谱仪（FID）,1“L微量注射器苯对照液；苯、甲苯、乙苯、对二甲苯、间二甲苯与邻二甲苯的混合样品液四、实验内容1. 色谱条件色谱柱：2mx3mm,有机皂土一DNP混合固定液，上试102载体（60~80目）；柱温：70°C；检测器：FID,150C;进样器：S/SLIP（分流/不分流毛细管），120C；流动相：载气氮气60ml/min，氢气50ml/min,空气350ml/min2. 分离与鉴定在上述实验条件下,分别取苯对照液及苯、甲苯、乙苯、对二甲苯、间二甲苯与邻二甲苯的混合样品液各0・5皿进样，记录色谱图，用保留时间对照定性。

柱K：2m分析结果表嶂号殂分名保留吋[min.W峰面积[uV*s]面祝嚅含虽燥型1苯3.3561223531979738100.000000.00000P0总计：1223531979738100.000000.00000系统评价表柱长:2m死时间;0.000min峥号组分名保留吋[min,司半砂容总囲子[min]理嚮翩㈱分黙OE子1苯3・3560,2440,00010495肚5250,0002.623峰号组分名保留时间半尚峥帝容量囲子理论塔片岡论塔片有效塔片[块/米]分离度拖尾囲子[min][■in][块][块/米]1苯3.4120.1700.0002236111K111S0.0001.4332甲苯B.4590.3260.00021751OS710S77-2311.3373乙苯11.7330.5970.0002145107210726.7341,1864对:甲苯12.9230,6460.00022181109L1271,0495间：甲苯14.3謂0,6770,0002473124012401.2401,1186邻:甲苯16.4930,762C.&002翊1299伽L77fi1,260死时fe]:0.000min结果与结论：1.苯系物中，至少含有6个成分。

2. 在苯系物色谱图中，1号峰与对照品苯的具有相同的保留时间，因此苯系物中含有苯第二部分气相色谱法测定麝香祛痛搽剂中樟脑、薄荷脑与冰片的含量一、实验目的1. 掌握内标法测定供试品中主成分含量的方法2. 了解气相色谱法在药物制剂含量测定中的应用3. 初步掌握毛细管柱气相色谱仪的操作二、实验原理1•麝香祛痛搽剂是一种外用液体制剂，《中国药典》（2005年版）规定其每1mL含樟脑（C10H16O）应为25・5〜34・5mg；含薄荷脑（C10H0O）应为8.5-11.5mg；含冰片（C18H10O）应为17・0〜23・0mg2. 采用进行内标法测定供试品中樟脑、薄荷脑与冰片的含量分别配制都含有等量内标物的混合对照品溶液（测定校正因子）和供试品溶液各精密吸取一定量，注入色谱仪，测定按下式计算校正因子：校正因子f二（CA）”CA）i,siiss式中，4为内标物质的峰面积或峰高;A.为对照品的峰面积或峰高；c为内标物质溶液的浓度；勺为对照品溶液的浓度供试品中待测成分含量为：含量Ci=f,s-Ai-?s式中，£$为相对校正因子；Ai为供试品峰面积或峰高；C.为供试品溶液的浓度；As为内标物质的峰面积或峰高；cs为内标物质的浓度（指在加内标物的样品中）。

三、仪器和试剂仪器：气相色谱仪（FID）,10pL微量注射器，分析天平等试剂：樟脑、薄荷脑与冰片对照品、麝香祛痛搽剂、水杨酸甲酯（内标物）、无水乙醇等四、实验方法与步骤1.色谱条件：仪器型号：GC-14C,色谱柱：PEG-20M毛细管柱（长30m,内径0・32mm,膜厚0.33pm）；柱温：130°C氢火焰离子化检测器：温度250°C；载气为氮气，流量1~3mL/min,尾吹流量20~40mL/min,气化室：温度230C分流比：20:12.溶液配制：（1）测定校正因子用对照品溶液的配制：内标溶液的配制：内标物：水杨酸甲酯，精密称取40.73mg置于10ml量瓶中，加无水乙醇至刻度，摇匀即得混合对照品溶液的配制：精密称取樟脑6・70mg,薄荷脑2.30mg,冰片4・44mg,内标物水杨酸甲酯溶液1ml,置于10ml量瓶中，加无水乙醇至刻度，摇匀即得2）供试品溶液制备：供试品溶液的配制：精密量取0.2ml样品和1ml内标溶液，置于10ml量瓶中，加无水乙醇至刻度，摇匀即得3. 测定：（1）取上述测定校正因子用混合对照品溶液1uL，注入气相色谱仪，测定，记录色谱图012345678910111213[min]峰序组分名保留时间[min]峰高[uV]峰面积[uV*s]峰面积%含量[%]峰类型1樟脑4.1741881220233042.5363642.53636BB2薄荷脑5.56047076830014.3588914.35889BV3龙脑6.16233605740412.0682412.06824VV4异龙脑6.83936107138415.0071515.00715VB5水杨酸甲酯9.13931107624616.0293516.02935BB峰序组分名保留时间[min]半高峰宽[min]容量因子理论塔片数分离度拖尾因子1樟脑4.1740.1430.00047510.0002.0232薄荷脑5.5600.2060.00040514.6871.5813龙脑6.1620.2450.00034941.5711.7314异龙脑6.8390.2780.00033531.5221.8015水杨酸甲酯9.1390.3600.00035724.2431.497校正因子的计算：根据f二(Ac)J(Ac)i,sssii0.670x762460.4073x2023300.230x762460.4073x683000.444x762460.4073x(57404+71384)=0.6454(2)取供试品溶液1uL,注入气相色谱仪，测定，记录色谱图。

01234567891011[min]分析结果峰序组分名保留时间[min]峰高[uV]峰面积[uV*s]峰面积%含量[%]峰类型1樟脑4.0741479215668041.4111941.41119BB2薄荷脑5.45936615322314.0671214.06712BV3龙脑6.06423703961710.4710210.47102VV4异龙脑6.74733226313816.6876116.68761VB5水杨酸甲酯9.03826666569417.3630617.36306BB系统评价：峰序组分名保留时间[min]半高峰宽[min]理论塔片数理论塔片数/米分离度拖尾因子1樟脑4.0740.143450200.0001.9832薄荷脑5.4590.209379004.6351.6603龙脑6.0640.235369301.6041.4904异龙脑6.7470.270346401.5941.5475水杨酸甲酯9.0380.364341004.2511.5434．分析的结果计算：注：供试品中的冰片，以龙脑、异龙脑峰面积之和计算的含量根据c二f•A/(A'c')ii,sissC0.407310樟=0.6199x156680xx=30.1mg/ml656940.2C0.407310薄=0.6304x53223xx=10.4mg/ml656940.2C0.407310冰=0.6454x(39617+63138)xx=20.6mg/ml656940.25•结论：经测定黑龙江***公司生产的批号为101001麝香祛痛搽剂，每1mL含樟脑30・1mg,符合规定（规定其每1mL含樟脑（C10H16O）应为25・5〜34・5mg）；每1mL含薄荷脑10.4mg,符合规定（规定每1mL含薄荷脑（C10H20O）应为8.5-11.5mg）；每1mL含冰片20・6mg,符合规定（规定每1mL含冰片（C18H10O）应为17・0〜23・0mg）。

五、思考题1・内标法定量时,进样量是否要十分准确？2・在什么情况下可以采用内标法？3・FID属何种类型检测器？它有什么特点？#实验七.综合性实验——心可舒片中葛根素的高效液相色谱法系统适用性试验、定性鉴别与含量测定一. 实验目的1. 掌握色谱中系统适用性试验目的意义与包含的内容2. 掌握高效液相色谱法定性鉴别的方法3. 掌握外标法的实验方法和结果计算4. 熟悉高效液相色谱仪的操作与使用二. 实验原理通过系统适用性试验，考察所配置的分析系统与设定的参数是否适用，以便给出分析方法在分析状态下应必须满足的条件系统适用性试验包含的内容有理论塔板数n分离度R,拖尾因子T与重复性（平行进样对照品溶液五次，其RSD应V2.0%）然后利用葛根素对照品品与试样中待测成分保留值的一致性进行定性鉴别采用外标法测定心可舒中葛根素含量药典规定心可舒片中每片含葛根以葛根素（C21H20O2）计不得少于3.5mg外标法计算公式：C=CXA/A样对样对三. 仪器与试剂仪器：低压四元梯度高效液相色谱仪P680型（美国戴安公司）、C18柱、UV170紫外检测器、容量瓶、微量注射器试剂：葛根素对照品、心可舒片、蒸馏水、冰醋酸四.实验内容一）色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇－水（25：75）为流动相；检测波长为250nm。

理论塔板数按葛根素峰计算应不低于2000系统适用性试验的色谱参数：① 理论塔板数。