微波法车前草总皂苷提取工艺的研究.doc

一年生或二年生草本全草药用，有利尿、清热、明目之功效药理作用1．利尿作用:正常人内服车前子煎剂１0g，有利尿作用,但煎剂总容量及每日入水量均无记载，缺乏严格对照正常人及家兔服车前草种子煎剂则无明显利尿作用平车前种子亦无利尿作用.2对关节囊的作用：车前子煎剂少量多次注入兔膝关节腔,先发生滑膜炎症，继则结缔组织增生,因此有使松弛了的关节囊恢复原有紧张的可能，临床上可用于颞下颌关节半脱位印度产卵叶车前Pｌantagoovａta种子含大量胶浆，可用作容积性泻药,对人并有降低血清胆甾醇的作用酒精提取物可降低麻醉犬、猫的血压,抑制离体兔心、蛙心,兴奋兔、大鼠及豚鼠的肠管并能为阿托品所抑制,因此认为有拟胆碱作用５%车前子煎剂０.0５—0.2mｌ注射于家兔膝关节腔内,可促进关节囊滑膜结缔组织增生,从而能使松弛了的关节囊恢复原有的紧张度车前子煎剂对正常人、兔、大鼠未表现有利尿作用黄姜又名盾叶薯蓣 属薯蓣科薯蓣属　ＤｉｏsｃｏrｅaL．多年生草本植物 其根茎中含有一定量的薯蓣皂苷及其水解产物薯蓣皂苷元 拥有 药用黄金　之美称1 3 薯蓣皂苷元俗称薯蓣皂素 具有溶血 降血脂 抗菌 消炎等作用 是合成甾体激素类　Stｅｒoiｄｈormoｎｅ 药物和甾体避孕药 Ｓtｅrｏiｄｐ rｏ p h ｙ ｌａctic 的重要原料45与传统加热不同 微波加热能保证能量的快速传递和充分利用 具有省时 选择性好 溶剂消耗少 加热效率和活性成分提取率高 提取效果不受物质水分含量影响等优点67 适用于热不稳定性物质的提取　广泛应用于药物天然成分的提取作者在此采用微波法提取鲜黄姜总皂苷 通过单因素实验和正交实验研究酸解时间 微波功率 微波处理时间等因素对总皂苷提取率的影响　为黄姜总皂苷成分的研发提供理论依据1　实验1．1 材料　试剂与仪器鲜黄姜 购于湖北省竹山县黄姜开发公司　经鉴定为薯蓣科植物Dｉoscoｒeaｚin g ibeｒｅｎｓiｓ的根茎 带须呈黄色皂素对照品　中国药品生物制品检定所 浓硫酸乙酸乙酯 氢氧化钠 碘 碘化钾等均为分析纯 石油醚60 90℃ 蒸馏水 自制ＵＶ１８００型紫外分光光度计 岛津公司 FＺ１02型微型植物粉碎机 济南科翔实验仪器有限公司　旋转蒸发仪 上海亚荣仪器厂　循环水多用真空泵 郑州杜甫仪器厂　微波炉 8０0W　广东格兰仕微波炉电器制造有限公司 手提式高压蒸汽灭菌锅 上海申安医疗器械厂　SＨＺ－ D 型减压抽滤装置 ＰF － 10１B型恒温水浴锅 巩义予华仪器有限责任公司　PＨ0３0A型干燥培养箱　上海一恒科学仪器有限公司 JAS1０02型电子天平 上海恒平科学有限公司1．２ 方法1．2．1　传统提取方法称取一定量洗净的鲜黄姜 用高速粉碎机粉碎 置于烧杯中　加入一定量的水 于高压蒸汽灭菌锅内蒸煮２ｈ　过滤 备用1　酸解法处理 取５０.００ｇ预处理后的黄姜 加入２mｏｌ L－1的硫酸　在高压蒸汽灭菌锅中酸解2ｈ冷却后用饱和氢氧化钠溶液中和 过滤2 酶解法处理 取５０。

００ｇ预处理后的黄姜 加少许水 于7０℃水浴加热 加入　－ 淀粉酶100ｇ　搅拌均匀　酶解１２ｈ 水洗3 酵解法处理 取５０．００ｇ预处理后的黄姜　在无菌操作台上加入一定量甜酒曲　混合均匀 装入已灭菌的锥形瓶中　于30℃培养箱中培养至有明显的酒香味后停止酵解　蒸馏　得到酒精 再水洗将以上３种处理方法处理后的物料置于４０℃的干燥箱中干燥 以乙酸乙酯为提取剂进行索氏提取1.2．2 微波法等量称取１２份5０．００ｇ鲜黄姜分别置于烧杯中加入一定量的酸于高压蒸汽灭菌锅内蒸煮一段时间后 过滤 置于干燥箱中４０℃干燥 将干燥物料置于烧杯中 按液料比１5∶1 ｍＬ∶g　下同 加入乙酸乙酯置于微波炉中于一定功率下提取一定时间分别就酸解时间 1０ 2.5h　微波功率 ３０06０0W 微波提取时间 2 ５ｍｉn３因素对鲜黄姜总皂苷提取率的影响进行单因素实验　然后以酸解时间 微波功率 微波提取时间为考察因素　以鲜黄姜总皂苷提取率为考核指标 进行L9 3　４ 正交实验 以确定微波提取鲜黄姜总皂苷的最佳工艺条件２ 结果与讨论２．１ 单因素实验２1．１ 酸解时间对鲜黄姜总皂苷提取率的影响固定提取溶剂为乙酸乙酯 液料比为１5∶１　微波功率为４0０W 微波提取时间为４ｍｉn 考察酸解时间对鲜黄姜总皂苷提取率的影响 结果见图１由图１可知 随着酸解时间的延长 总皂苷提取率先上升后下降 在酸解时间为2.0ｈ时 提取率达到最高 这可能是由于　酸解时间过长会使皂苷彻底水解成分遭到破坏 产生人工产物 因此 选择1.5h2．ｈ和２。

５ｈ作为正交实验中酸解时间的３个水平2．１．２ 微波功率对鲜黄姜总皂苷提取率的影响固定提取溶剂为乙酸乙酯 液料比为１5∶１ 酸解时间为２.０h　微波提取时间为4ｍｉｎ　考察微波功率对鲜黄姜总皂苷提取率的影响　结果见图２由图２可知 随着微波功率的增大 总皂苷提取率先上升后下降 在微波功率为400W 时 提取率达到最高 这可能是由于 微波功率越大 溶剂及细胞液吸收的微波能量越多 细胞内部温度及压力上升越快 细胞壁越容易破裂 从而使更多的有效成分从细胞中释放出来 但微波功率过大 容易暴沸　不易控制 因此选择３00Ｗ　4００Ｗ 和５００W 作为正交实验中微波功率的３个水平21.３　微波提取时间对鲜黄姜总皂苷提取率的影响固定提取溶剂为乙酸乙酯　液料比为1５∶1　酸解时间为2．0h 微波功率为４00Ｗ 考察微波提取时间对鲜黄姜总皂素提取率的影响　结果见图３由图３可知 随着微波提取时间的延长 总皂苷提取率先上升后下降 在微波提取时间为４ｍin时 提取率达到最高　因此　选择３miｎ４ｍｉn和５ｍｉｎ作为正交实验中微波提取时间的３个水平２２ 正交实验正交实验的结果与方差分析分别见表1 表２由表１可知 在不考虑交互作用的情况下 各因素对鲜黄姜总皂苷提取率的影响大小依次为 微波提取时间　酸解时间　微波功率　且各因素对总皂苷提取率的影响均不显著 表２　最佳组合为 A 2B 2Ｃ 2 即在液料比为１５∶１时的最佳提取条件为 酸解时间２．0h表1 正交实验的结果与分析Ｔａｂ．１ Resｕltｓａndanaｌ ｙ ｓisofｏｒtｈｏ g ｏｎａｌ ex　ｐ ｅrｉｍenｔ实验号 A. 酸解时间ｈB． 微波功率WＣ．　微波提取时间ｍｉｎ提取率％1 １.5 ３00 3 0.142 1．5 ４００ 4 ０.2４３ 1．５ 5００ ５ 0．２24　2．0 ３００ ４ 0．２６５ 2．０　４０0 ５　0．1９6 ２．０　5０0　３ 0．2３7 2．５ 30０ 5 0．2１8 ２。

5 4００ 4 ０．２5９ 2.5 ５００　３　０．20ｋ １ ０． ６８　０． ６6 ０．　７９k 2 ０． 83 0. 7８ 0 ８６k ３ 0.　７5 ０ 72 0． ６7R ０．1５ ０．1２ 0．１9表2　方差分析Ｔaｂ２ Aｎａl　ｙ sｉｓoｆｖａriancｅ方差来源 F值 显著性A　4．１9１ 不显著　P 0．０5B ２．２43　不显著 Ｐ　0．０５Ｃ 1．４5２ 不显著 P 0．０５微波功率４００W 微波提取时间4ｍｉｎ　此时鲜黄姜总皂苷提取率达到０．2６%在上述优化的工艺条件下　进行５次平行验证实验 鲜黄姜总皂苷平均提取率为　0．２４％ RSＤ 为1.１2% 说明该工艺条件稳定 具有良好的重复性2．3 与传统提取方法的比较 表３由表3可看出　与３种传统提取方法相比 微波法提取的总皂苷提取率较高 而且耗时短 操作简单 是表３　微波法与传统提取方法的比较Ｔaｂ3 Cｏm p aｒiｓｏnｏfｍiｃrｏwavｅeｘtｒacｔionmeｔｈｏdｗiｔhtｒａdｉｔiｏnａl ｅxtｒaｃtｉonｍetｈｏdｓ提取方法 耗时　ｍｉｎ 总皂苷质量　ｇ 提取率 %酸解法 ７2０ ０．10 0.2０酶解法　９６０ ０．04 0．０8酵解法　1680 ０．０８ 0．1６微波法 1２４ 0．1３ ０.26一种比较理想的提取鲜黄姜总皂苷的方法３ 结论通过单因素实验和正交实验确定微波法提取鲜黄姜总皂苷的最佳工艺条件为　液料比１5∶１ ｍL∶g酸解时间2．0ｈ 微波功率４００　Ｗ 微波提取时间4mｉｎ　在此条件下 鲜黄姜总皂苷提取率达0．2６％该工艺条件稳定 具有良好的重复性 与传统提取法相比　微波提取法高效 节能 省时 操作简单　是理想的提取鲜黄姜总皂苷的方法 适合于工业化生产参考文献1 韦波 肖杰易 李久焱 等． 重庆市盾叶薯蓣主要病害及综合防治J　． 特种经济动植物 200８　４ 5２ —　５3．２ 李祥 马建中　史云东. 盾叶薯蓣 薯蓣皂素研究进展及展望 Ｊ ．林产化学与工业 ２01030２ １０７ － １１２．3 李军超 李向民　邹晓思 等. 盾叶薯蓣研究进展 J 。

西北植物学报　200３２3１0 18４２ － １８４６．4 孔秋芹 竹剑平.　黄姜提取物的抗疲劳作用 Ｊ . 中国医院药学杂志 2006262　228 －　22９５ 陈锡峰　杨俊卿 周岐新 姜黄提取物一般药理作用实验研究 J .医学临床研究　２0０４21１０ 120６ － 12０8．6 李月 刘妍． 微波法提取款冬花总黄酮的研究 Ｊ . 化学与生物工程 2０１0２７1１ 43 －　４６.７ 郭景强． 微波辅助提取技术及其在中药提取中的应用 J 天津药学 ２010224　6３ － 65．文中如有不足，请您见谅！ / 。