“针刺五脏俞穴调五脏神”针法对失眠大鼠脑内细胞因子调节作用及.docx

针刺五脏俞穴调五脏神”针法对失眠大鼠脑内细胞因子调节作用及 　　目的：观察针刺五脏俞穴对失眠大鼠脑内细胞因子的影响方法：Wistar大鼠，雄性，体重180～220 g，40只随机分为4组，空白组：空白对照；模型组：腹腔注射PCPA；安定组：腹腔注射PCPA后，连续5个周期给予安定灌胃治疗；针刺组：腹腔注射PCPA后，连续5个周期给予针刺治疗分别观察各组大鼠下丘脑内IL1、TNF含量的变化结果：模型组脑内IL1、TNF含量明显降低，与空白组比较有显著性差异(P＜0.05)安定组脑内IL1、TNF含量均有明显升高，与模型组比较有显著性差异(P＜0.05)针刺组脑内IL1、TNF含量有明显升高，与模型组比较有显著性差异(P＜0.05)结论：针刺五脏俞穴对失眠大鼠脑内细胞因子的影响显著,针刺五脏俞是治疗失眠症的一种有效方法失眠 针刺疗法 细胞因子 穴 背俞 大鼠基金项目:吉林省科学技术厅课题(课题编号20050574)　　失眠症中医称之不寐、不得卧，是临床常见病症之一，常因脏腑功能紊乱、气血亏虚、阴阳失调导致持续失眠可影响自主神经系统、内分泌系统和免疫功能白细胞介素1(IL1)和肿瘤坏死因子(TNF)是具有多种生物学功能的细胞因子，现已证明，IL1和TNF是参与睡眠的免疫调节中有代表性的细胞因子，内源性的IL1和TNF随着睡眠的变化而呈现节律性的含量改变，外源性的IL1和TNF则均可诱发动物睡眠［1］。

笔者在总结导师东贵荣教授“调五脏神治疗失眠”经验的基础上［2］，观察了“针刺五脏俞穴调五脏神”针法对失眠大鼠下丘脑内IL1和TNF含量的影响，进一步研究了“针刺五脏俞调五脏神”针法干预失眠的机制，为“调五脏神治疗失眠”学说提出实验依据1实验材料1.1实验动物健康Wistar大鼠，雄性，体重180～220 g［长春高新动物实验中心提供，为普通级动物，许可证号：SCKE—(吉)2003］在长春中医药大学第一附属医院新药研究开发实验室常温下饲养1周后用于实验1.2动物分组空白组不做任何处置，每日空抓，反映未做任何处置大鼠下丘脑内IL1、TNF的含量模型组腹腔注射PCPA造模成功后，不作任何处理，反映大鼠治疗前下丘脑内IL1、TNF的水平安定组腹腔注射PCPA后，给予安定灌胃治疗，观察造模后安定对大鼠下丘脑内IL1、TNF的影响针刺组取肺俞(双)、心俞(双)、脾俞(双)、肾俞(双)，观察针刺对失眠大鼠下丘脑内IL1β、TNF的影响2实验方法2.1造模方法采用PCPA腹腔注射的方法，临用前按大鼠450 mg/kg用量，用弱碱性生理盐水配置成混悬液备用除空白组外，其余3组腹腔注射PCPA混悬液，连续注射2 d，空白组不做任何处理，于第1次腹腔注射28～30 h后，大鼠出现昼夜节律消失，白天夜晚活动不停，表示模型复制成功。

2.2针刺疗法参照华兴邦大鼠穴位图谱，于第3胸椎棘突下旁开7 mm取肺俞(双)，于第5胸椎棘突下旁开7 mm取心俞(双)，于第12胸椎棘突下旁开7 mm取脾俞(双)，于第2腰椎棘突下旁开7 mm取肾俞(双)　　操作：常规消毒后，采用0.35 mm20 mm不锈钢毫针，直刺6 mm，将Hj68051型经穴治疗仪，正极接肺俞的毫针，负极接肾俞的毫针，疏密波(8/80 Hz，疏密波转换14次/min，电压强度从1V随针刺时间和次数逐渐增加，保持局部轻微抖动为度，终强度为3V电流为1mA)通电时间为10 min，留针20 min为一个针刺周期，连续重复5个针刺周期共计2.5 h，出针后0.5 h处死大鼠2.3西药疗法安定片，按成人催眠剂量10 mg/d，用大鼠给药剂量体表面积公式算出大鼠给药剂量为0.92 mg/kg，连续5 d给药后处死2.4测定方法用放射免疫检测法测定各组大鼠下丘脑内的IL1β、TNF的含量。