移液器的种类和操作方法大全.docx

名师归纳总结 精品word资料 - - - - - - - - - - - - - - -学习好资料 欢迎下载移液器的种类和使用精确的分析方法对于生物化学试验是极为重要的，在各种生物化学分析技术中，第一要娴熟把握的就是精确的移液技术；为此要用到各种形式的移液管，其中有一些是同学们在化学试验中未用过而在生化试验中是常用的；1 滴管使用便利，可用于半定量移液，其移液量为 1mL ～ 5mL ，常用 2mL ，可换不同大小的滴头；滴管有长、短两种，新出的一种带刻度和缓冲泡的滴管，可以比一般滴管更精确地移液，并防止液体吸入滴头；2 移液管 〔 吸管〕吸管使用前应洗至内壁不挂水珠， 1mL 以上的吸管用吸管专用刷刷洗， 0.1mL 、0.2mL 和 0.5mL 的吸管可用洗涤剂浸泡，必要时可以用超声清洗器清洗；由于铬酸洗液致癌，应尽量防止使用；如有大量成批的吸管洗后冲洗，可使用冲洗桶，将吸管尖端向上置于桶内，用自来水多次冲洗后再用蒸馏水或无离子水冲洗；吸管分为两种，一种是无分度的，称为大肚吸管，精确度较高，其相对误差 A 级为 0.7 ％~0.8 ％， B 级为1.5 ％ ~0.16 ％，液体自标线流至口端 〔留有残液 〕， A 级等待 15s ，B 级等待 3s ；另一种吸管为分度吸管， 管身为一粗细匀称的玻璃管，上面匀称刻有表示容积的分度线，其精确度低于胖肚吸管，相对误差 A 级为0.8 ％～ 0.2 ％， B 级为 1.6％～ 0.4 ％， A 级、 B 级在吸管身上有 A 、B 字样，有 ”快”字就为快流式，有 ” 吹”字就为吹出式，无 ”吹”字的吸管不行将管尖的残留液吹出；吸、放溶液前要用吸水纸擦拭管尖；3 微量进样器微量进样器常用作气相和液相色谱仪的进样器，在生化试验中主要是用作电泳试验的加样器，通常可分为无存液和有存液两种；〔1〕10 μ L以下的极微量液体进样；无存液微量进样器：进样器的不锈钢芯子直接通到针尖端处，不会显现存液；〔2〕10 μL～100μ L 有存液微量进样器：不锈钢的针尖管部分是空管，进样器的柱塞不能到达，因而管内会存有空气或液体，其使用留意事项是：①不行吸取浓碱溶液，以免腐蚀玻璃和不锈钢零件；②由于有存液，所以吸液时要来回多拉几次，将针尖管内的气泡全部排尽；③针尖管内孔微小，使用后特别是吸取过蛋白质溶液后，必需立刻清洗针尖管，防止堵塞；如遇针尖管堵塞，不行用火烧，只能用 φ0.1mm 的不锈钢丝耐心串通；④进样器未润湿时不行来回干拉芯子，以免磨损而漏气；⑤如进样器内发黑，有不锈钢氧化物，可用芯子蘸少量肥皂水，来回拉几次即可除之；4 自动取液器这种取液器在生化试验中大量地使用，它们主要用于多次重复的快速定量移液，可以只用一只手操作，十分便利；移液的精确度 〔即容量误差 〕为±〔0.5 ％～ 1.5 ％ 〕，移液的精密度 〔即重复性误差 〕更小些，为 ≤0.5％；取液器可分为二种：一种是固定容量的，常用的有 100μ L 等多种规格；每种取液器都有其专用的聚丙烯塑料吸头，吸头通常是一次性使用，当然也可以超声清洗后重复使用，而且此种吸头仍可以进行 120 ℃高压灭菌；另一种是可调容量的取液器，常用的有 200μL、 500μL 和 1000μL 等几种；可调式自动取液器的操作方法是用拇指和食指旋转取液器上部的旋钮，使数字窗口显现所需容量体积的数字，在取液器下端插上一个塑料吸头，并旋紧以保证气密，然后四指并拢握住取液器上部，用拇指按住柱塞杆顶端的按钮，向下按到第一停点，将取液器的吸头插入待取的溶液中，缓慢松开按钮，吸上液体，并停留 1～2 秒钟 〔粘性大的溶液可加长停留时间 〕，将吸头沿器壁滑出容器，用吸水纸擦去吸头表面可能附着 第 1 页，共 5 页 - - - - - - - - -名师归纳总结 精品word资料 - - - - - - - - - - - - - - -学习好资料 欢迎下载的液体，排液时吸头接触倾斜的器壁， 先将按钮按到第一停点， 停留一秒钟 〔粘性大的液体要加长停留时间 〕， 再按压到其次停点，吹出吸头尖部的剩余溶液，假如不便于用手取下吸头，可按下除吸头推杆，将吸头推入废物缸；自动取液器的使用留意事项是：①吸取液体时肯定要缓慢平稳地松开拇指，绝不答应突然松开，以防将溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气；②为获得较高的精度，吸头需预先吸取一次样品溶液，然后再正式移液，由于吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时，吸头内壁会残留一层 ”液膜 ”，造成排液量偏小而产生误差；③浓度和粘度大的液体，会产生误差，为排除其误差的补偿量，可由试验确定，补偿量可用调剂旋钮转变读数窗的读数来进行设定；④可用分析天平称量所取纯水的重量并进行运算的方法，来校正取液器， 1mL 蒸馏水 20 ℃时重 0.9982g ；移液枪的操作方法 :用拇指和食指旋转取液器上部的旋钮，使数字窗口显现所需容量体积的数字，在取液器下端插上一个塑料吸头，并旋紧以保证气密，然后四指并拢握住取液器上部，用拇指按住柱塞杆顶端的按钮，向下按到第一停点，将取液器的吸头插入待取的溶液中，缓慢松开按钮，吸上液体，并停留 1～2 秒钟（粘性大的溶液可加长停留时间），将吸头沿器壁滑出容器，用吸水纸擦去吸头表面可能附着的液体，排液时吸头接触倾斜的器壁，先将按钮按到第一停点，停留一秒钟（粘性大的液体要加长停留时间），再按压到其次停点，吹出吸头尖部的剩余溶液，假如不便于用手取下吸头，可按下除吸头推杆，将吸头推入废物缸；使用留意事项是：① 吸取液体时肯定要缓慢平稳地松开拇指， 绝不答应突然松开， 以防将溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气；② 为获得较高的精度， 吸头需予先吸取一次样品溶液， 然后再正式移液， 由于吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时，吸头内壁会残留一层 “液膜 ”，造成排液量偏小而产生误差；③ 浓度和粘度大的液体，会产生误差，为排除其误差的补偿量，可由试验确定，补偿量可用调剂旋钮转变读数窗的读数来进行设定；④ 可用分析天平称量所取纯水的重量并进行运算的方法， 来校正取液器， 1mL 蒸馏水 20 ℃时重 0.9982g ；我们这里用的是日本货 ,质量不错 ,以前在学校里用过国产的和进口的 , 那简直就是没得比 ,在价格上也很悬殊 , 建议仍是使用进口的 .仍有就是枪不用的时候，最好调到最大刻度，这样似乎可以延长寿命；取有溶液的时候不要横放；感觉 eppendorf 的枪不错移液枪的的校准很关键枪头的使用也有讲究，水性和有机性的别混用假如拿水性吸有机液体，连续吸，吸液量会一枪比一枪多原文由 zhang_mssj〔zhang_mssj〕 发表 :有机溶剂滴液的问题确定有的，我现在仍是不明确为什么会滴液？依据移液器原理，是不是有机溶剂挥发这样腔体内体积增加？似乎有有机型的移液器；不过我没有用过； 第 2 页，共 5 页 - - - - - - - - -名师归纳总结 精品word资料 - - - - - - - - - - - - - - -学习好资料 欢迎下载你的推测是对的，沸点越低试剂滴液越明显（当然排除本身的密封系统问题），这个是由于饱和蒸汽压的问题；移去低沸点，高粘度，易发泡等特别液体，应当挑选的是外置活塞式移液器，而不是我们常规见到的空气排液式移液器；移液器（移液枪）的使用、爱护与选购来源：互联网在进行分析测试方面的讨论时，一般采纳移液枪（ pipette ）量取少量或微量的液体；对于移液枪的正确使用方法及其一些细节操作，是很多人都会忽视的；现在分几个方面具体表达；量程的调剂在调剂量程时，假如要从大体积调为小体积，就依据正常的调剂方法，逆时针旋转旋钮即可；但假如要从小体积调为大体积时，就可先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度，再回调至设定体积，这样可以保证量取的最高精确度；在该过程中，千万不要将按钮旋出量程，否就会卡住内部机械装置而损坏了移液枪；枪头（吸液嘴）的装配在将枪头（ pipette tips ）套上移液枪时，很多人会用劲地在枪头盒子上敲几下，这时错误的做法，由于这样会导致移液枪的内部配件（如弹簧）因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散，甚至会导致刻度调剂旋钮 卡住；正确的方法是将移液枪（器）垂直插入枪头中，略微用力左右微微转动即可使其紧密结合；假如是多道（如 8 道或 12 道）移液枪，就可以将移液枪的第一道对准第一个枪头，然后倾斜地插入，往前后方向摇动即可卡紧；枪头卡紧的标志是略为超过 O 型环，并可以看到连接部分形成清楚的密封圈；移液的方法移液之前，要保证移液器、枪头和液体处于相同温度；吸取液体时，移液器保持竖直状态，将枪头插入液面下 2 － 3 毫米； 在吸液之前， 可以先吸放几次液体以润湿吸液嘴 （特别是要吸取粘稠或密度与水不同的液体时）；这时可以实行两种移液方法；一是前进移液法； 用大拇指将按钮按下至第一停点， 然后渐渐松开按钮回原点； 接着将按钮按至第一停点排出液体，稍停片刻连续按按钮至其次停点吹出残余的液体；最终松开按钮；二是反向移液法；此法一般用于转移高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体，其原理就是先吸入多于设置量程的液体，转移液体的时候不用吹出残余的液体；先按下按钮至其次停点，渐渐松开按钮至原点；接着将按钮按至第一停点排出设置好量程的液体，连续保持按住按钮位于第一停点（千万别再往下按），取下有残留液体的枪头，弃之；移液器的正确放置使用完毕，可以将其竖直挂在移液枪架上，但要当心别掉下来；当移液器枪头里有液体时，切勿将移液 第 3 页，共 5 页 - - - - - - - - -名师归纳总结 精品word资料 - - - - - - - - - - - - - - -学习好资料 欢迎下载器水平放置或倒置，以免液体倒流腐蚀活塞弹簧；爱护保养时的留意事项如不使用，要把移液枪的量程调至最大值的刻度，使弹簧处于放松状态以爱护弹簧； 最好定期清洗移液枪，可以用肥皂水或 60 ％的异丙醇，再用蒸馏水清洗，自然晾干；高温消毒之前，要确保移液器能适应高温；校准是可以在 20-25 度环境中，通过重复几次秤量蒸馏水的方法来进行；使用时要检查是否有漏液现象；方法时吸取液体后悬空垂直放置几秒中，看看液面是否下降；假如漏液，缘由大致有一下几方面：1、枪头是否匹配；2、弹簧活塞是否正常；3、假如是易挥发的液体（很多有机溶剂都如此） ，就可能是饱和蒸汽压的问题；可以先吸放几次液体，然后再移液；移液器的选购应当考虑以下几个方面的问题1. 高质量的性能2. 独一无二的体积掌握系统3. 一样的精确度和重复性4. 牢靠耐用5. 人体工程学设计假如一支移液器能够同时具备可变容量或者固定容量，那就意味着在一把移液器中同时具备一个可变量程活塞和一个固定量程活塞；这意味着该品牌移液器在单支移液器的价格水平上为用户供应了两种功能；有的品牌的移液器的功能仍不仅限于此，不仅每支移液器带有固定容量活塞，而且您仍可以购买其它量程的固定活塞安装于移液器上，其价格远远低于购买一支固定量程移。