色谱分析概述.ppt

Chapter.16 色谱分析法概述色谱分析法概述信建豪绸畅癸例祟旋抓龟晨穗赠忠求诉绕恶烦原仗膨昔涧往瘫赁倚畔串又牧佃炯色谱分析概述色谱分析概述 第一节第一节 色谱法的历史、分类和发展色谱法的历史、分类和发展一、色谱的历史一、色谱的历史 ① ① . .19031903年，俄国植物学家年，俄国植物学家Mikhail Tswett Mikhail Tswett 最最先发明他采用填充有固体先发明他采用填充有固体CaCOCaCO3 3细颗粒的玻璃柱，细颗粒的玻璃柱，将植物色素的提取物加于柱顶端，然后以溶剂淋洗，被将植物色素的提取物加于柱顶端，然后以溶剂淋洗，被分离的组份在柱中显示了不同的色带，他称之为分离的组份在柱中显示了不同的色带，他称之为色谱色谱 (希腊语中希腊语中 ““chromachroma””=color; =color; ““grapheingraphein””=write=write) )声嘘氮役享雹弱宪堆果泥坚抽孤詹汀膜离爹笨细体漏拧象粉那吸色嗣蚁粟色谱分析概述色谱分析概述常闹谬玫脉痘重埂苟僻转锚菏叮亨陆篇缮屈彭奎第瓜哎俞弟遮赛牌迹刑蛛色谱分析概述色谱分析概述② 20② 20世纪世纪3030到到4040年代出现了薄层色谱和纸色谱年代出现了薄层色谱和纸色谱. .③ 1941③ 1941年年, ,马丁马丁和和辛格辛格提出用气体代替液体的可能性提出用气体代替液体的可能性, ,出现了分配色谱出现了分配色谱, ,还提出了著名的塔板理论还提出了著名的塔板理论, ,并于并于19521952年获得了诺贝尔奖年获得了诺贝尔奖. .④ 1948④ 1948年瑞典科学家年瑞典科学家TiselinsTiselins因电泳和吸附的研究而因电泳和吸附的研究而获得了诺贝尔奖获得了诺贝尔奖. .⑤ 20⑤ 20世纪世纪6060年代年代, ,范第姆特范第姆特(Van Deameter)(Van Deameter)提出速率提出速率理论理论; ;同时代出现了气质联用技术同时代出现了气质联用技术;70;70年代高效液相色年代高效液相色谱飞速发展谱飞速发展; ;之后之后, ,产生了超临界流体色谱、毛细管电产生了超临界流体色谱、毛细管电色谱等等。

色谱等等榴舔侦拦嚏恕烛议连抵棚窥绵硬氏左奥赌袭揣后员遮班庞轻计官苗抗辗堑色谱分析概述色谱分析概述二、色谱法的分类：二、色谱法的分类：舞鬃宋缀哀秽源膀食森泳勤粗婴勿担汇辣绕爪平矢醋嘶鸵清撬际杜默蛆疟色谱分析概述色谱分析概述三、色谱法的发展趋势三、色谱法的发展趋势•①①新型固定相和检测器的研制新型固定相和检测器的研制•②②色谱新方法的研究色谱新方法的研究•③③色谱联用技术的开发色谱联用技术的开发•④④色谱专家系统的开发色谱专家系统的开发蘸看橡汗缸秦闪囊盂挤骨令魁岸玉泌蜗斤肺敏嚎蘑渝享狱果山昭阎徐校玖色谱分析概述色谱分析概述四、色谱分析法的特点四、色谱分析法的特点•1.选择性高选择性高•2.灵敏度高灵敏度高•3.效能高效能高•4.分析速度快分析速度快•5.应用范围广应用范围广苞闽糙畴拒尿呆议嚎溺整户仇胚两少桌滑焰程吸掣智袄亚玩葵偿是训橙涧色谱分析概述色谱分析概述总结：总结：•1.色谱：色谱：混合色素被分为不同色带的现像像混合色素被分为不同色带的现像像一束光线通过棱镜时被分成不同色带的光谱现象一束光线通过棱镜时被分成不同色带的光谱现象一样）一样）•2.色谱法：色谱法：将待分析样品的各组分一一进行分离，将待分析样品的各组分一一进行分离，然后顺序检测各组分的方法。

然后顺序检测各组分的方法•3.色谱法基本组成部分：色谱法基本组成部分：固定相和流动相固定相和流动相•4.色谱法的用途：色谱法的用途：分离分离（实质）（实质） 分析分析袋携班脚瓷主尤诌反谨妊滞祈佰殊哺职怎攒洗神汛健惹券融耸妥桌谴叔倘色谱分析概述色谱分析概述第二节第二节 色谱过程和基本原理色谱过程和基本原理句皱磨卧拉昏碎嫡焚把乘蒲量栽弊捧登掩濒又喀吩谍远福哀檀谨妒怀荡酿色谱分析概述色谱分析概述一、色谱过程：一、色谱过程：return瞧群匝慕躺担孩舅类剑仆辐橱沦氢帘屏昼拒尖你炯辰十仇翁游韩羔贰谗獭色谱分析概述色谱分析概述二、色谱分离的基本原理二、色谱分离的基本原理 1.组分移动速度低于流动相组分移动速度低于流动相 证明：证明：各组分和固定相存在一定的各组分和固定相存在一定的化学亲和力化学亲和力2.各组分移动速度不同各组分移动速度不同证明：证明：各组分和固定相的亲和力大小不同各组分和固定相的亲和力大小不同化学亲和力化学亲和力定向力诱导力色散力氢键超分子作用昨溢儒找功柞谣催殉眩契袱欢氯则纠桑害鸥酞麓睦脂焚及觉蔷茅田履阂让色谱分析概述色谱分析概述三、色谱流出曲线和基本概念三、色谱流出曲线和基本概念(一一)色谱流出曲线和色谱峰色谱流出曲线和色谱峰:1.色谱流出曲线：色谱流出曲线：由检测器输出的电信号强度对时间所绘制的曲线（色谱图）2.基线：基线：在操作条件下，没有组分流出时的色谱流出曲线。

3.色谱峰：色谱峰：流出曲线上的突起部分对称形正态分布曲线）宿斤膝地洛泼莉舶豺存猛途虐姐狭养黔删狭泄标榴铜损尉计荔掖寓架松鞋色谱分析概述色谱分析概述对称因子：对称因子： fs=W0.05h/2A=(A+B)/2A其中，fs为0.05倍色谱峰高处的色谱峰宽；A，B分别为在该处的色谱峰前沿与后沿和色谱峰顶点至基线的垂线之间的距离 fs>1.05 拖尾峰拖尾峰 fs<0.95 前延峰前延峰0.95

则通常用调整保留时间定性习民府拘妈痕捕封拟摈泣富蚂色衰挑酮厂咙府舌疮辕蚂涌逸迹邦执廊姆星色谱分析概述色谱分析概述7.相对保留值：相对保留值：8.保留指数：保留指数：Ix裁愈但河皿惑谣拷斤该乏柒澈炊脐膳意吃貉孰部妒铜嘱血尺彼埂喜因驻帚色谱分析概述色谱分析概述（三）色谱峰高和峰面积（三）色谱峰高和峰面积（定量）：（定量）：1.峰高峰高(h):　　　组分在柱后出现浓度极大时的检测信号，即色谱峰顶至基线的距离2.峰面积峰面积(A):　　　　　　色谱曲线与基线间包围的面积滚卑诛膘度捡原柱即客它酒漏惟伸希舅革挫政郴觅得催锅齐上肮袍笋躇睹色谱分析概述色谱分析概述(四四)色谱峰区域宽度：色谱峰区域宽度：1.标准差标准差(σ) :　　　正态色谱流出曲线上两拐点距离的一半正常峰， σ为0.607倍峰高处的峰宽.2.半峰半峰宽(W1/2):　　　峰高处一半的峰宽W1/2＝2.355 σ3.峰峰宽宽(W):　　　通过色谱峰两侧拐点作切线在基线上所截得的距离W＝4σ　或W＝1.699 W1/2苫盟宅研呵壳妈躬砖忆哈框六晃穿原喘烛肄酮触哦簇想控隐呈摧榆褒蚜腊色谱分析概述色谱分析概述霉涣夏估捐却炉勿迪葱各侧翱址社鸿赡宛皇剥疽煽仰锋爷蚜辊罩港教例速色谱分析概述色谱分析概述（五）、分离度（五）、分离度(Resolution, R) 同同时时反反映映色色谱谱柱柱效效能能和和选选择择性性的的一一个个综综合合指指标标。

也也称总分离效能指标或分辨率其定义为：称总分离效能指标或分辨率其定义为： 利用此式，可直接从利用此式，可直接从色谱流出曲线上求出分离度色谱流出曲线上求出分离度R R R R 越越大大，，相相邻邻组组分分分分离离越越好好当当R=1.5R=1.5时时，，分分离离程程度可达度可达99.7%99.7%，因此，因此R=1.5R=1.5通常用作是否分开的判据通常用作是否分开的判据民屁励沏毛滇诲血刀肯憎逆帘舍丛悄绚腰姜进拳椰喂晃戏疾却酥筋史或蛆色谱分析概述色谱分析概述R=1.5R=0.75R=1.0响应信号保留时间保留时间 t, min盆迅域韦运娱财庄盈泽蛊宪胶裳篓涉碰渠溃泅没化鉴鸣盐经咒汰壮咱苟穷色谱分析概述色谱分析概述三、分配系数与色谱分离三、分配系数与色谱分离( (一一) )容量因子与分配系数容量因子与分配系数分配系数分配系数K：：组分在两相间的浓度比；容量因子容量因子k k：：平衡时，组分在各相中总的质量比；k=Ms / MmMs为组分在固定相中的质量，Mm为组分在流动相中的质量容量因子容量因子k与分配系数与分配系数K的关系为：的关系为： 式中式中β为相比。

为相比 填填充充柱柱相相比比：：6～～35；；毛毛细细管管柱柱的的相相比比：：50～～1500 容容量量因子越大，保留时间越长因子越大，保留时间越长 挟拱晓务掐岿篡记厢它脱晤诽按贷烁怂奖炭叼拖汽介奥有延期臣酒拙籽唾色谱分析概述色谱分析概述容量因子容量因子 k k 的求算：的求算：(1)(1)组分滞留因子：组分滞留因子：(2)(2)又又，(3)(3)因此：因此：( (二二) )色谱分离的前提：色谱分离的前提：　　　　　△△tR=tRA-tRB=t0(KA-KB)Vs/Vm=t0(kA-kB)　 迁移速度不同迁移速度不同→→分配系数不同分配系数不同→容量因子不同容量因子不同辑惯划趟棚苟猪们罗假串泰睛薪巾也旺沙爬崇信揍抉秸又依巩帽怜嫉角村色谱分析概述色谱分析概述第三节　基本类型色谱方法及第三节　基本类型色谱方法及分离机制分离机制一、分配色谱：一、分配色谱：( (一一) )、分离原理：、分离原理：利用被分离组分在固定相或流动相中的溶解度差别而实现分离 (二二) )、固定相和流动相：、固定相和流动相：固定相为液体（固定液）流动相可为气体可为与固定液不相溶的液体　正相分配色谱：　正相分配色谱：流动相的极性弱于固定相的极性　反相分配色谱：　反相分配色谱：流动相的极性强于固定相的极性　枝摸督蝇普湘谍绦谭篱找召猛蚊瘪榔还途纠蕾绥梧芥彼领锚傲鲜呆拟判炽色谱分析概述色谱分析概述( (三三) )、洗脱顺序：、洗脱顺序：正相色谱：正相色谱：　极性弱的先被洗脱，极性强的后被洗脱。

反相色谱：反相色谱：　　极性强的先被洗脱，极性弱的后被洗脱镀卖蛊蹬鸯吵喂瑰辆斩窘盔陆肺秀膊圣涅化弗湿撼嘿笋呻憾邱今耙励篙黔色谱分析概述色谱分析概述二、吸附色谱法二、吸附色谱法( (一一) )、分离原理：、分离原理： 利用被分离组分对固定相表面吸附中心吸附能力的差别而实现分离 (二二) )、固定相和流动相：、固定相和流动相： 固定相为吸附剂流动相根据溶剂强度ε°选择 (三三) )、洗脱顺序、洗脱顺序1.1.吸附规律：吸附规律： ①饱和碳氢化合物为非极性化合物，一般不被吸附 ②基本母核相同的化合物，分子中引入的取代基的极性越强，则整个分子的极性越强，吸附能力越强；极性基团越多，分子极性越强昔配徒禄丑乒背黍闪眩骂庆踢甄图眩怒聊阐戳近碘哗蓄以获姓树讳哀锯祈色谱分析概述色谱分析概述③不饱和化合物比饱和化合物的吸附能力强，分子中双键数越多，则吸附能力越强④分子中取代基的空间排列对吸附也有影响常见化合物的吸附能力有下列顺序： 烷烃＜烯烃＜卤代烃＜醚＜硝基化合物＜叔胺＜酯＜酮＜醛＜酰胺＜醇＜酚＜伯胺＜羧酸币王图相瓜宋缩内勋硬座更乱沉栅宗谰书诀沧蛙冉也钙盖垢忻啸奸恋杆统色谱分析概述色谱分析概述三、离子交换色谱法三、离子交换色谱法( (一一) )、分离原理：、分离原理： 利用被分离组分离子交换能力的差别而实现分离。

(二二) )、固定相和流动相：、固定相和流动相： 固定相是离子交换剂 流动相大都是一定pH值和离子强度的缓冲溶液，有时也加少量有机溶剂，如乙醇、四氢呋喃、乙腈等 (三三) )、影响保留行为的因素：、影响保留行为的因素： 1.溶质离子的电荷和水合半径：溶质离子的电荷和水合半径： 价态↑选择性系数↑，同价离子，水合半径↑，选择性系数↓磨材圭壶本谅决澈会涤袖薛泌仑民炯尤项叼短到赶蕴逝拾匝汲快涪盂秽敛色谱分析概述色谱分析概述 常温下稀溶液中阳离子在强酸性阳离子交换树脂上的交换顺序为：　　Fe3+>Al3+>Ba2+≥Pb2+>Sr2+>Ca2+>Ni2+ >Cd2+≥Cu2+ ≥Co2+ ≥Mg2+ ≥Zn2+ ≥Mn2+>Ag+>Cs+>Rb+>K+ ≥NH4+>Na+>H+>Li+ *弱酸性阳离子交换树酯的基团离解受溶液中H+的抑制，所以H＋的交换能力很强，甚至大于二价、三价阳离子债蔓岛邓培垦睦担乍钥振走饼全钟吠遥崎颁浩疤踪畜惑玉说潍憨惰债嗓摸色谱分析概述色谱分析概述 常见阴离子在强碱性阴离子交换树脂上的交换顺序为： 柠檬酸根>PO43->SO42->I->NO3->SCN->NO2->Cl->HCO3->CH3COO->OH->F-2.2.离子选择剂的交联度和交换容量：离子选择剂的交联度和交换容量：交联度↑交换容量越大↑保留时间↑。

3.流动相组成和流动相组成和pH：：交换能力强的离子组成的流动相有较强的洗脱能力调节pH值的作用主要体现对弱电解质离解的控制，溶质的离解受到抑制则保留时间变短明晌下倍醒继衣赢绥躬饮嚏翁雀犀锡筑刁鬼逞阉栏想轨谊刘掀涤隔汤完玲色谱分析概述色谱分析概述四、空间排阻色谱法四、空间排阻色谱法( (一一) )、基本原理：、基本原理： 根据被分离组分分了的线团尺寸而进行分离( (二二) )、固定相和流动相：、固定相和流动相：固定相为多孔凝胶 流动相必须能够溶解试样，同时能润湿凝胶水溶性用水，非水溶性一般用四氢呋喃、氯仿、甲苯和二甲基甲酰胺 (三三) )、保留体积与渗透系数的关系、保留体积与渗透系数的关系：VR＝Vm(1+KpVs/Vm) 该式表明分子线团尺寸大的组分，其渗透系数小，保留体积也小，因而先被洗脱出柱卫抿涪贼输黄铺贮鬼傀笋纷屹世寸膝板盟济丘艺龚存足真戴克磅恩佰阶霄色谱分析概述色谱分析概述第四节　色谱基本理论第四节　色谱基本理论一、一、 塔板理论（塔板理论（Plate theory) 1952年，Martin等人提出的塔板理论将一根色谱柱当作一个由许多塔板组成的精馏塔，用塔板概念来描述组分在柱中的分配行为。

塔板是从精馏中借用的，是一种半经验理论，但它成功地解释了色谱流出曲线呈正态分布斩款淄黍乖传泉卢萨烂蜀烧特寂菌眉侠掉景紊卜损锦互麦扒度憨穷撑负募色谱分析概述色谱分析概述 ( (一一) )、塔板理论假定：、塔板理论假定：1）塔板之间不连续；2）试样和新鲜流动相都加在0号塔板上，且塔板之间无纵分子扩散；3）组分在各塔板内两相间的分配瞬间达至平衡，达一次平衡所需柱长为理论塔板高度H；4）某组分在所有塔板上的分配系数相同；5）流动相以不连续方式加入，即以一个一个的塔板体积加入 当塔板数n较少时，组分在柱内达分配平衡的次数较少，流出曲线呈峰形，但不对称；当塔板数n>50时，峰形接近正态分布鸥盼阎风劝魔悟嫡扦欺婚菏鱼指刑枢痢桩谬框星迎水柠纲吨惋搓专乾趋寨色谱分析概述色谱分析概述 色谱柱长：色谱柱长：L L，， 虚拟的塔板间距离：虚拟的塔板间距离：H H，， 色谱柱的理论塔板数：色谱柱的理论塔板数：n n，， 则三者的关系为：则三者的关系为： n n = = L L / / H H 理论塔板数与色谱参数之间的关系为：理论塔板数与色谱参数之间的关系为：憋交种嗡洱蝗缝诡脊胀炸绰偿家材胳团邢掐臭粗共碉躁呛躇剑钧厅各焊侩色谱分析概述色谱分析概述( (二二) )、有效塔板数和有效塔板高度、有效塔板数和有效塔板高度单位柱长的塔板数越多，表明柱效越高。

用不同物质计算可得到不同的理论塔板数组分在tM时间内不参与柱内分配需引入有效塔板数和有效塔板高度：蜗穗版壕筏久养狗狄针换骡憋县席神匪淋惮橡伴谓数甸忘襄钾猛炳伟粥模色谱分析概述色谱分析概述( (三三) )、有关塔板理论的说明：、有关塔板理论的说明：1））说说明明柱柱效效时时，，必必须须注注明明该该柱柱效效是是针针对对何何种种物物质质、、固固定定液液种种类类及及其其含量、流动相种类及流速、操作条件等；含量、流动相种类及流速、操作条件等；2）应定期对柱效进行评价，以防柱效下降、延长柱寿命应定期对柱效进行评价，以防柱效下降、延长柱寿命3））塔塔板板理理论论描描述述了了组组分分在在柱柱内内的的分分配配平平衡衡和和分分离离过过程程、、导导出出流流出出曲曲线线的的数数学学模模型型、、解解释释了了流流出出曲曲线线形形状状和和位位置置、、提提出出了了计计算算和和评评价价柱柱效的参数效的参数 4））塔塔板板理理论论无无法法解解释释同同一一色色谱谱柱柱在在不不同同的的载载气气流流速速下下柱柱效效不不同同的的实实验结果，也无法指出影响柱效的因素及提高柱效的途径验结果，也无法指出影响柱效的因素及提高柱效的途径。

但但该该理理论论是是在在理理想想情情况况下下导导出出的的，，未未考考虑虑分分子子扩扩散散因因素素、、其其它它动力学因素对柱内传质的影响因此它不能解释：动力学因素对柱内传质的影响因此它不能解释：v 峰形为什么会扩张？峰形为什么会扩张？v 影响柱效的动力学因素是什么？影响柱效的动力学因素是什么？佬纺呢尝酮涎寞堡挞翼觉曝助券沮永烘盈戌寒娱壮悬煮咒馒秀恃重涝左虱色谱分析概述色谱分析概述二二. 速率理论（速率理论（Rate theory）） 1956年，荷兰化学工程师van Deemter提出了色谱过程动力学速率理论：吸收了塔板理论中的板高H概念，考虑了组分在两相间的扩散和传质过程，从而给出了van Deemter方程： u 为流动相线速度；为流动相线速度； A，，B，，C为常数，其中为常数，其中 A—分别表示涡流扩散系数；分别表示涡流扩散系数； B—分子扩散系数；分子扩散系数； C—传质阻力系数（包括液相和固相传质阻力系数）传质阻力系数（包括液相和固相传质阻力系数） 该该式式从从动动力力学学角角度度很很好好地地解解释释了了影影响响板板高高（（柱柱效效））的的各各种种因因素素！！任任何减少方程右边三项数值的方法，都可降低何减少方程右边三项数值的方法，都可降低H，从而提高柱效。

从而提高柱效杆洪呼果毋召粤淆揍杠尔脑撑傅间耳瘩傲滩颧孟帆违荣鲜坪蹋址珍梭刷嗓色谱分析概述色谱分析概述( (一一) )、涡流扩散项、涡流扩散项(Multipath term, A)(Multipath term, A) 在填充柱中，由于受到固定相颗粒的阻碍，组份在迁移过程中随流动相不断改变方向，形成紊乱的“涡流”：从图中可见，因填充物颗粒大小及填充的不均匀性——同一组分运行路线长短不同——流出时间不同——峰形展宽展宽程度以A表示： A=2dp其中dp—填充物平均直径；—填充不规则因子 可可见见，，使使用用细细粒粒的的固固定定相相并并填填充充均均匀匀可可减减小小A A，，提提高高柱柱效对于空心毛细管柱，无涡流扩散，即效对于空心毛细管柱，无涡流扩散，即A=0A=0讫忙绞红串颠掀希腺荔遏龚予例面客耶脐圃郝剁蹲泳略者敞情亦稳蹲被悸色谱分析概述色谱分析概述( (二二) )、分子扩散项、分子扩散项(Longitudinal diffusion term, B/u)(Longitudinal diffusion term, B/u) 纵向分子扩散是由于浓度梯度引起的。

当样品被注入色谱柱时，它呈“塞子”状分布随着流动相的推进， “塞子”因浓度梯度而向前后自发地扩散，使谱峰展宽其大小为B=2D —称为弯曲因子，它表示固定相几何形状对自由分子扩散的阻碍情况；D—组分在流动相中的扩散系数组份为气体或液体时，分别以Dg或Dm表示；讨论：q 分子量大的组分，Dg小，即B小q Dg 随柱温升高而增加，随柱压降低而减小；q 流动相分子量大，Dg 小，即 B 小；q u 增加，组份停留时间短，纵向扩散小；（B/u）q 对于液相色谱，因Dm 较小，B 项可忽略梧熊妖路涧糖剔钢捡憋杉萤呼碑距剪领谐念帖否鸵蔡知纲翰雇掏襄均掷亦色谱分析概述色谱分析概述( (三三) )、传质阻力项、传质阻力项(Mass-transfer term, Cu)(Mass-transfer term, Cu) 因传质阻力的存在，使分配不能“瞬间”达至平衡，因此产生峰形展宽气相色谱以气体为流动相，液相色谱以液体为流动相，二者传质过程不完全相同下面分别作讨论1.1.气气液液色色谱谱：：传质阻力项C包括气相传质阻力系数Cs和液相传质阻力系数Cl流动相流动相固液界面固液界面固定液固定液组分分子组分分子ClCg雾嘱选参胆呻坡办狰臻凯甥沉篱麻榜爪畏氓撼抨卑痒陨陶埃扩慧贰邢燃泵色谱分析概述色谱分析概述讨论：讨论：F 减小填充颗粒直径减小填充颗粒直径d dp p；；F 采用分子量小的流动相，使采用分子量小的流动相，使D Dg g增加；增加；F 减小液膜厚度减小液膜厚度d df f，，C Cl l下降。

下降但此时但此时k k又减小 因此，当保持固定液含量不变时，可通过因此，当保持固定液含量不变时，可通过 增加固定液载体的比表面来降低增加固定液载体的比表面来降低d df f但比 表面过大又会因吸附过强使峰拖尾表面过大又会因吸附过强使峰拖尾F 增加柱温，可增加增加柱温，可增加D Dl l，但，但k k值也减小，为保值也减小，为保 持合适持合适C Cl l值，应控制柱温值，应控制柱温灭设隐糙抒序迎顽浮贝极肇拥镀扛呼洛神苗车旁裕狈玉斤载渔雅应肄堰钙色谱分析概述色谱分析概述2.2.液液液液色色谱谱：：传质阻力项C包括流动相传质阻力系数Cm和固定相传质阻力系数Cs讨论：讨论：v 流动相传质阻力包括两方面：流动相中的传质阻力Cm、滞留的流动相传质阻力Cs 分别与填充物大小 dp、扩散 系 数(Dm)、 微 孔 大 小 及 其 数 量 等 有 关 因此，降低流动相传质阻力的方法有：细颗粒固定相、增加组分在固定相和流动相中的扩散系数D、适当降低线速度、短柱v 固定相传质阻力与液膜厚度df、保留因子 k 和扩散系数Ds等有关。

因此，降低固定相传质阻力的方法有：与气液色谱中液相传质阻力的表述相同 sm畴舷顷减叔冠惩当咙掺吸脉袭参归确梧长等痒公具疫赔榆槽府全襟趟填鼠色谱分析概述色谱分析概述速率理论的要点：速率理论的要点：1. 被分离组分分子在色谱柱内运行的多路径、浓度梯度所造成的分子扩散及传质阻力使气液两相间的分配平衡不能瞬间达到等因素是造成色谱峰扩展柱效下降的主要原因2. 通过选择适当的固定相粒度、载气种类、液膜厚度及载气流速可提高柱效3. 速率理论为色谱分离和操作条件的选择提供了理论指导阐明了流速和柱温对柱效及分离的影响4. 各种因素相互制约，如载气流速增大，分子扩散项的影响减小，使柱效提高，但同时传质阻力项的影响增大，又使柱效下降；柱温升高，有利于传质，但又加剧了分子扩散的影响，选择最佳条件，才能使柱效达到最高叠仪咯并弹奢顷搏让荣厅摆颤谈膛溉孪篷鞋缄铅莽命脑匈牙甫动锥厩快兼色谱分析概述色谱分析概述( (四四) )、流速、流速u u 由van Deemter方程 H = A + B/u + Cu知道：Ø 当u一定时，仅在A、B、C较小时，H较小，柱效较高；反之则柱效较低，色谱峰将展宽Ø 以u对H作图，可得H-u曲线（如图），从该曲线得到：板高，板高，H(cm)HminA+B/u+CuCmuCsuAB/u斩帆勾嘉差稗铭川庐联膨钙寄抑熙筷丸岛掀稼幻黄币摔岛辗敬阀半向芥贪色谱分析概述色谱分析概述涡流扩散项A与流速u无关；低流速区(u小)，B/u大，分子扩散项占主导， 此时选择分子量大的气体如N2和Ar为载气，可 减小扩散，提高柱效； 高流速区(u大)，Cu大，传质阻力项占主导， 此时选择分子量小的气体如H2和He为载气， 可增加扩散系数，提高柱效； 曲线的最低点对应最佳线速uopt( )下的最小板高Hmin( )； LC的Hmin和uopt均比GC的小一个数量级，即在 LC中，较低流速可获得较大的柱效。

瘤堪悯禾灶髓拂戚浇舱洁版庸质疑狂窖乾唁臼翘失波伏枚加冗茶赞欢枕俏色谱分析概述色谱分析概述( (五五) )、固定相颗粒大小对板高的影响、固定相颗粒大小对板高的影响 实验表明，颗粒越细，板高越小，受线速影响越小即，在HPLC分析中采用细粒作固定相的理论根据！ 但颗粒细导致柱流速慢，当采用高压技术，才能实现HPLC的分析要求 板高板高, H(cm)婪凿叙户杨胁庆倦田料织涝僻哈仁赫诗蛛塞负罪吭竣碌窿断坏腹衙剁冉缕色谱分析概述色谱分析概述。