实验五 胰岛素、肾上腺素对血糖浓.ppt

实验五 激素对血糖浓度的影响及血糖浓度的测定v 血糖是指血液中糖，由于正常人血液中糖主要是葡萄糖，所以一般认为，血糖是指血液中的葡萄糖正常人空腹血糖浓度为4.4～6.7mmol/L（80～120mg/100ml）v血糖是糖在体内的运输形式全身各组织都从血液中摄取葡萄糖以氧化供能，特别是脑、肾、红细胞、视网膜等组织合成糖原能力极低，几乎没有糖原贮存，必须不断由血液供应葡萄糖当血糖下降到一定程度时，就会严重妨碍脑等组织的能量代射，从而影响它们的功能所以维持血糖浓度的相对恒定有着重要的临床意义血糖浓度的调节v血糖浓度能维持相对恒定是由于机体内存在一整套高效率的调节机制，精细地控制着血糖的来源与去路，使之达到动态平衡神经系统的调节作用神经系统对血糖浓度的调节作用主要通过下丘脑和自主神经系统对所控制激素的分泌，后者再通过影响血糖来源与去路关键酶的活性来实现神经系统的调节最终通过细胞水平的调节来达到目的激素v使血糖浓度降低的激素 胰岛素v使血糖浓度升高的激素 胰高血糖素、肾上腺素、肾上腺皮质激素、生长素、甲状腺素v它们对血糖的调节主要是通过对糖代谢各主要途径的影响来实现的v在激素发挥调节血糖浓度的作用中，最重要的是胰岛素和胰高血糖素。

肾上腺素在应激时发挥作用，而肾上腺皮质激素、生长激素、甲状腺素等都可影响血糖水平，但在生理性调节中仅居次要地位胰岛素v使肌肉和脂肪组织细胞膜对葡萄糖的通透性增加，利于血糖进入这些组织进行代谢v诱导葡萄糖激酶、磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶的合成，加速细胞内葡萄糖的分解利用v通过使细胞内cAMP含量减少，激活糖原合成酶和丙酮酸脱氢酶系，抑制磷酸化酶和糖异生关键酶等，使糖原合成增加，糖的氧化利用、糖转变为脂肪的反应增加，血糖去路增快；使糖原分解和糖异生减少或受抑制，使血糖来源减少，最终使血糖浓度降低胰高血糖素 主要通过提高靶细胞内cAMP含量达到调节血糖浓度的目的细胞内的cAMP可激活依赖cAMP的蛋白激酶 ，后者通过酶蛋白的共价修饰改变细胞内酶的活性 ，即激活糖原分解和糖异生的关键酶，抑制糖原合 成和糖氧化的关键酶，使血糖升高肾上腺素 通过cAMP激活肝中糖原磷酸化酶使糖原分解，还有诱导肝中磷酸烯醇式丙酮酸激酶及果糖二磷酸酶 的合成促进糖异生作用，使氨基酸转化成葡萄糖， 从而使血糖上升激素对血糖浓度的影响-------邻甲苯胺法测血糖目的及要求：掌握邻甲苯胺测血糖的原理和方法掌握血糖的正常范围和意义掌握胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响及作用机制 基本原理v葡萄糖在有机酸溶液中能与某些芳香胺类化合物如 苯胺、联苯胺、邻甲苯胺等起缩合反应，生成希夫 氏（Schiff)碱式有色衍生物，再通过分光光度计 比色测定得到葡萄糖浓度。

v本实验用的是邻甲苯胺法v邻甲苯胺不与非糖还原性物质显色，而与已醛糖显 色葡萄糖的醛基在热醋酸溶液中与邻甲苯胺的氨 基互相缩合成兰绿色的希夫氏碱，该兰绿色在一定 范围内与葡萄糖浓度成正比此法测得正常人的空 腹血糖值为70-100mg/dl,兔约为130mg/dl左右操作 1.取预先饥饿14-16小时的正常家兔2只，称重 2.从耳缘静脉采血：剪毛→二甲苯棉球擦拭→干棉球 擦干→碘酒、酒精消毒→7号针头穿刺取血→放入加 有抗凝剂（草酸钠：2mg/ml）的烧杯中→摇匀 3.1只家兔肌肉注射胰岛素（5u/Kg），另一只家兔皮 下注射肾上腺素（0.5mg/每只动物） 4.30分钟后，分别从耳缘静脉取血 5.无蛋白血滤液的制备：取短试管3只，各加空腹、胰 岛素、肾上腺素处理抗凝血0.4ml，5%三氯醋酸 3.6ml，混匀，3000rpm离心5min，上清即为无蛋白 血滤液6.取4支试管按下表操作（单位：ml）空白管 标准管 样品管1（空腹） 样品管2（用药）蒸馏水 1.0 - - - 标准液 - 1.0 - - 血滤液 - - 1.0（空腹） 1.0（用药）邻甲苯胺试剂 2.5 2.5 2.5 2.5 混匀，100℃水浴8分钟，冷却。

630nm比色，读取光密度血糖mg/dl =(mg%)计算测定管吸光度标准管吸光度×100注意事项1.离心机的使用⑴.离心前一定要配平（位置配平和重量配平）⑵.使用时离心机的盖子一定要盖紧，以免发生意外⑶.要等离心机完全静止后才能打开盖子2.微量移液器的使用3.取血时的注意事项⑴.注射器、刀片的使用⑵.注射器在取血前要肝素化⑶.心脏取血时要注意进针的位置和深度⑷.注意不要将空气注入动物体内⑸血液放入试管中时要先将注射器的针头取下，以防溶血4.邻甲苯胺具有毒性和腐蚀性，操作时要注意v临床意义1.血糖升高：病理性主要见于糖尿病，其他内分泌疾病如肾上腺皮质机能亢进，垂体前叶机能亢进等2.血糖降低：病理性如胰岛细胞瘤、胰岛素分泌过多，过量胰岛素治疗，肾上腺皮质功能减退等本次实验报告已论文形式书写标题作者单位 邮编【摘要】目的： 方法： 结果： 结论：【关键词】3-5个正文简介材料与方法1 实验材料1.1仪器1.2试剂2 实验方法 详述实验步骤（如给药、取血等）结果 各管OD值，给药前后OD及计算讨论 参考文献 作者（3人以上就写等） 标题 杂志名 年，卷（期）：页码（起-止）。