线栓法制备大鼠视网膜缺血再灌注模型的初步探讨
7页1、线栓法制备大鼠视网膜缺血再灌注模型的初步探讨【摘要】 目的 建立一种理想的视网膜缺血再灌注动物模型。方法 成年Wistar大鼠20只,除2只4眼作为对照组外,余18只36眼作为实验组,分为缺血1 h组及缺血2 h组,每组9只。实验中用预先制备的线栓插入实验组大鼠颈内动脉,造成视网膜缺血,分别于缺血1、2 h后及再灌注6 h后观察眼底,术后摘除缺血1、2 h及再灌注6 h的眼球进行组织学观察。结果 实验组大鼠术后均发生视网膜缺血,视网膜苍白、水肿,以神经纤维层和内网状层最明显,可见白细胞浸润。再灌注6 h后视网膜水肿减退,神经纤维层水肿减轻,造模成功。结论 此方法比较接近视网膜缺血临床病理过程,模型稳定、可靠。 【关键词】 模型 动物 视网膜 缺血 再灌注 大鼠 ABSTRACT Objective To establish an ideal retinal ischemiareperfusion animal model. Methods A segment of prepared thread was introduced into the carotid artery of 18
2、adult Wistar rats and resulted in retinal ischemia of 36 eyes, which was followed by 6 h reperfusion. Fundus changes and morphological changes of eyes were observed after ischemia and reperfusion. According to the period of ischemia, the 36 eyes were divided into two groups: group 1, having 1 h ischemia, group 2, having 2 h ischemia. Four eyes of two rats served as controls. Results The retinal ischemia resulted in retinal pallor and edema with leukocytic infiltrate, especially in nerve fiber la
3、yer and plexiform layer. After reperfusion, retinal edema and nerve fiber layer edema began to decrease. Conclusion The retinal ischemia model established in this study is similar to the natural course of clinical retinal ocular ischemia. The model is stable and reliable. KEY WORDS Models, animal; Retinal; Ischemia; Reperfusion; Rats 视网膜缺血再灌注损伤是眼科常见的病理过程,严重影响病人视功能。其发生机制十分复杂,已成为近年眼科的研究热点之一1。动物模型是研究视网膜缺血的重要途径之一。目前较常用的模型有两种:血管结扎模型及升高眼内压模型。理想的视网膜缺血再灌注模型应当是只阻断视网膜动脉或动静脉,而对视网膜其他部分组织没有任何损伤,而由于实验条件和技术的限制
4、,目前尚无一种模型能够达到这一要求2。本实验旨在探索建立一种理想的视网膜缺血再灌注动物模型,努力使模型接近临床病理过程,为后续研究奠定基础。 1 材料与方法 1.1 材料 健康成年Wistar大鼠(由青岛市药检所提供)20只40眼,雌雄不限,体质量220250 g,取2只4眼作为对照组,余18只36眼作为实验组,随机分为缺血1 h和缺血2 h组,每组9只。术中所用器械为:市售普通2.0鱼线(直径0.23 mm),704硅橡胶,砂纸,眼科常用30皮肤缝线,游标卡尺,动脉夹,电凝器。 1.2 方法 1.2.1 线栓制作 鱼线缠绕一约10 cm5 cm硬性卡片,重物施压12 d,以使鱼线变直;将鱼线切成4 cm长小段,一端用砂纸打磨约34 mm,显微镜下观察表面有凹凸感即可,以方便挂胶;将打磨好的鱼线蘸少许硅橡胶,立即在光滑的玻璃板上打磨,使橡胶在打磨端呈半透明的圆柱状;将制备好的线栓自然气温下晾干,游标卡尺量取1.6、1.8 cm长度并标记,挑选直径0.240.26 mm线栓压直过夜备用。 1.2.2 模型制作 水合氯醛(300 mg/kg)腹腔注射麻醉大鼠,25g/L碘附消毒颈部皮肤,颈
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