土壤中分解尿素的细菌的分离与计数试题(二)

1、土壤中分解尿素细菌的分离与计数试题(二)1. 在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或者阻止其他种类微生物生长的培 养基称做()A. 鉴别培养基B.加富培养基C.选择培养基D.基础培养基答案 C解析 选择培养基可选择目标微生物，同时抑制或杀死其他微生物。2. 可以分离并鉴定出分解尿素的细菌的方法是()A. 以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂B. 以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂C. 以尿素为唯一氮源的培养基中加入刚果红试剂D. 以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂答案 A解析 尿素在尿素分解菌的作用下分解产生氨和CO2，氨会使培养基的碱性增强，pH升高， 酚红指示剂变红。3. 尿素是尿素分解菌的氮源，因此在配制选择培养基时()A. 葡萄糖在培养基中越多越好B. 尿素分解菌有固氮能力，故培养基中只需无机氮C. 尿素在培养基中越少越好D. 尿素分解菌无固氮能力，故培养基中的尿素为化合态氮答案 D解析 尿素既可以作为尿素分解菌的氮源，也可以作为其碳源，葡萄糖在培养基中并不是越多越好，葡萄糖过多会使培养基的渗透压过高，不利于尿素分解菌的生长繁殖，A错误；尿素 分解

2、菌没有固氮能力，故培养基中需要添加尿素作为氮源，B错误；添加尿素的目的是筛选尿 素分解菌，其他微生物不能很好地生活在该培养基上，尿素在培养基中不是越少越好，过少 就失去选择作用，过多又会使细胞失水死亡，C错误；尿素分解菌无固氮能力，故培养基中的 尿素为化合态氮，D正确。4. 产生标准形态菌落的细菌的最初数目和培养基分别是()A 一个细菌、液体培养基B.许多细菌、液体培养基C.一个细菌、固体培养基D.许多细菌、固体培养基答案 C解析 菌落是一个细菌的子细胞群体，在固体培养基上形成，有一定的形态结构，肉眼可见(液 体培养基中肉眼不可见)，菌落可作为菌种鉴别的重要依据，而多种细菌形成的菌落，就不可 能有比较标准的形态。5. 下列关于土壤取样的叙述，错误的是()A. 土壤取样，应选取肥沃、湿润的土壤B. 先铲去表层土，选取距地表38 cm左右的土壤层C. 取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌D. 应在火焰旁称取土壤答案 C解析 土壤取样过程中，为防止杂菌污染，取样用的小铁铲和信封在使用前必须灭菌。6. 某同学对101、 102、 103倍稀释液中的细菌进行计数，平均菌落数分别为2 760、 2

3、95和 16，则样品中菌落总数为(所用稀释液体积为0.1 mL)()A. 2.76X104 个/mLB.2.95xl05 个/mLC.4.6X104 个/mLD.3.775X104 个/mL答案 B解析 为保证结果准确，一般选择菌落数在30300间的平板进行计数，因此只有295符合 要求，其稀释倍数为102，所用稀释液体积为0.1 mL,套入计算公式得样品中菌落总数为 2.95X 105 个/mL。能力提升7. 在“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”课题中，以土壤中的细菌为研究对象，要达到的目的是()从土壤中分离出能够分解尿素的细菌 从土壤中分离出能够分解氨的细菌 统计每克 土壤样品中究竟含有多少分解尿素的细菌 统计所取土壤样品中究竟含有多少分解尿素的 细菌A. B.C.D.答案 A解析 从土壤中分离分解尿素的细菌并对其计数，统计的是每克土壤样品中含多少分解尿素的细菌，用公式“每克样品中菌株数=(C/V)XM”进行推测，其中，C代表某一稀释度下平 板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。8. 给无氮培养基接种土壤稀泥浆的正确方法是()A. 打开

4、培养皿盖，取一根接种环沾取少许稀泥浆，轻轻地点接在培养基的表面上B. 取一根接种环在酒精灯的火焰上灭菌后沾取少许稀泥浆，略微打开培养皿盖，在培养基的表 面轻点C. 打开培养皿盖，取一根接种环在酒精灯的火焰上灭菌后沾取少许稀泥浆，在培养基的表面轻 点D. 略微打开培养皿盖，取一根接种环在酒精灯的火焰上灭菌，冷却后沾取少许稀泥浆，在培养 基的表面轻点答案 D解析 接种过程中要防止外来杂菌的入侵，左手将培养皿打开一条缝隙，右手将接种环在火 焰上灭菌，冷却后沾取少许稀泥浆，在培养基的表面轻点，用未冷却的接种环沾取稀泥浆会 杀灭菌种。9. 实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应，用3种细菌在事先准备好的琼脂平板上画3 条等 长的平行线（3条线均与图中的链霉素带接触），将平板置于37 C条件下恒温培养3天，结果如 图所示。从实验结果分析，以下叙述不正确的是（）A. 链霉素能阻止结核杆菌的生长B. 链霉素对结核杆菌比对霍乱菌更有效C. 链霉素对结核杆菌比对伤寒菌更有效D. 链霉素可以用于治疗伤寒病人答案 D解析 分析题图可知，该培养基是含有链霉素的选择培养基，接种的三种细菌中，霍乱菌和 结核杆菌都可以

5、被杀灭，并且链霉素对结核杆菌杀灭的有效程度大于对霍乱菌的有效程度， 而伤寒菌的生长不受影响，所以选项D错误。10. 下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是（）A. 用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨固体培养基，经高温、高压灭菌后倒平板B. 取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL,分别涂布于各组平板上C. 将实验组和对照组平板倒置，37 C恒温培养D. 确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数答案 D解析 检测土壤中细菌总数的实验中，用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板，A项正确；取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL,分别涂布于不 同的平板上，B项正确；接种后要将培养皿倒置，置于37 C恒温培养，C项正确；在确定对 照组无菌后，应选择菌落数在30300之间的平板进行计数，D项错误。11. 广东省是我国甘蔗生产区之一。甘蔗是一种高光效的C4植物，单位面积产量很高，种植面 积日益扩大，目前已成为南方地区燃料酒精生产的重要原料。利用甘蔗生产燃料酒精的一般 工艺流程为：甘蔗f榨汁（蔗糖）酵母发酵一蒸

6、馏一成品（燃料酒精）。(1) 具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛 选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下：步骤 1：野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。步骤 2：制备选择培养基。在基本培养基的基础上，注意和，加琼脂后灭菌，制成固体平板。步骤 3：将紫外线照射后的菌液稀释涂布平板。步骤 4：根据，筛选出突变菌。(2) 上述步骤2、3和 4的依据分别是。答案 (1)添加高浓度蔗糖(葡萄糖) 调低 pH 是否能在选择培养基上生长 (2)提供高糖和酸 性的筛选环境；获得单菌落；能生长的菌落具有耐高糖和耐酸的特性解析(1)要筛选耐高糖和耐酸的菌种，培养基中必须加入高浓度蔗糖和调低pH,能在选择培 养基上生长的即为所需菌种。(2)步骤 2 是给其提供高糖和酸性的筛选环境；步骤3 是为了获 得单菌落；步骤4是根据能生长的菌株具有耐高糖和耐酸的特性筛选出突变菌。12. 请回答下列有关微生物的问题：(1) 微生物的分布：微生物主要分布在富含的土壤表层；不同微生物对pH的要求不同，细菌常生活在酸碱度的潮湿土壤中。(2) 微生物的消毒和灭菌

7、：在微生物培养中，对培养基常用法进行灭菌。如果要检测灭菌是否彻底，可以采用的方法是。(3) 微生物的应用：在葡萄酒的自然发酵过程中，运用吸附在葡萄皮上的野生酵母菌发酵产生酒精，请写出该过程的化学反应式： 。在果醋制作时，运用醋酸菌在和糖源充足的条件下，将糖分解成醋酸。(4) 微生物的接种：微生物接种的方法很多，最常用的是和。(5) 微生物的鉴定：为检测尿素分解菌的存在与否，在以尿素为唯一氮源的 (填“选择”或“鉴别”)培养基中加入指示剂，如果存在尿素分解菌，则指示剂将变色。答案 (1)有机质 接近中性 (2)高压蒸汽灭菌 将灭过菌的培养基在适宜的温度下放置一段时间，观察培养基上是否有菌落产生(3)C6H12O6-2C2H5OH+2CO2有氧(4)平板划线法 稀释涂布平板法 (5)选择 酚红 红解析 (1)微生物主要分布在有机质丰富的土壤表层，细菌常生活在酸碱度接近中性的潮湿土壤中。(2)对培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌；可通过在适宜的温度下放置灭过菌的培养基， 看其是否有菌落产生来确定培养基灭菌是否彻底。(3)醋酸菌为需氧型微生物。(4)最常用的微 生物接种方法有平板划线法和稀释涂布平板

8、法。(5)用选择培养基筛选目的菌尿素分解菌， 加入酚红指示剂，若存在尿素分解菌，指示剂将变红色。真题体验13. (2017全国I , 37)某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。回答下 列问题：(1) 有些细菌能分解尿素，有些细菌则不能，原因是前者能产生。能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物 CO2 作为碳源，原因是，但可用葡萄糖作为碳源，进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是(答出两点即可)。(2) 为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择 (填“尿素”“nh4no3”或“尿素+nh4no3”)作为氮源，不选择其他两组的原因是。(3) 用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有(答出两点即可)。答案(1)脲酶分解尿素的细菌是异养型生物，不能利用CO2来合成有机物为细胞生命活动提供能量，为其他有机物的合成提供原料(2)尿素其他两组都含有NH4NO3,能分解尿素 的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3,不能起到筛选作用(3)为细菌生长提供无机 营养，作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定解析 (1)细菌分解尿素是由于细菌体内能合成

9、脲酶,尿素是有机物,分解尿素的细菌是分解者,属于异养型生物,因此不能利用 CO2 作为碳源合成有机物。葡萄糖通常既作为碳源,也 作为能源。(2)筛选分解尿素的细菌,通常只能用尿素作为唯一氮源, “ NH4NO3” 或“ 尿素NH4NO3”均含有无机氮源NH4NO3，能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3，不能起到筛选作用。KH2PO4和Na2HPO4可为微生物提供P元素和无机盐离子如钾离子和钠离子，还可作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定。14. (2016 四川，10)图甲是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程，图乙是脲酶基因转录的mRNA部曲选苗种分序列。请据图回答下列问题：细菌10匕壤捽品鉴别甲(1) 图中选择培养基应以为唯一氮源；鉴别培养基还需添加作指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变成色。(2) 在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为105的土壤样品溶液0.1 mL,培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为 13、156、462、178 和 191。该过程采取的接种方法是 ，每克土壤样品中的细菌数量为X 108个;与血细胞计数板相比， 此计数方法测得的细菌数目较。(3) 现有一菌株产生的脲酶由于基因突变而失活，突变后基因转录的mRNA在图乙箭头所示的位置增加了 70个核苷酸，使图乙序列出现终止密码(终止密码有UAG、UGA和UAA)。突变基因转录的mRNA中，终止密码为，突变基因表达的蛋白质含个氨基酸。答案 (1)尿素 酚红 红 (2)稀释涂

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