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试验三果蝇的伴性遗传

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    • 1、-/实验七 果蝇的伴性遗传14级生物技术 1 班王堽 20140322142一、目的1、记录交配结果和掌握统计处理方法 ;2、正确认识伴性遗传的正、反交的差别。二、原理1910 年,摩尔根在实验室中无数红眼果蝇中发现了一只白眼雄蝇。 让 这只白眼雄蝇与野生红眼雌蝇交配,F1全是红眼果蝇。让F1的雌雄 个体相互交配,则F2果蝇中有3/4为红眼,1/4为白眼,但所有白眼 果蝇都是雄性的。这表明, 白眼这种性状与性别相连系,外祖父的性 状通过母亲遗传给儿子。 这种与性别相连的性状的遗传方式就是伴性 遗传。摩尔根等对这种遗传方式的解释是: 果蝇是 XY 型性别决定动 物,控制白眼的隐性基因(W)位在X性染色体上,而Y染色体上 却没有它的等位基因。 如果这种解释是对的, 那么白眼雄蝇就应产生 两种精子:一种含有 X 染色体,其上有白眼基因( W) ,另一种含有 丫染色体,其上没有相应的等位基因;F1杂型合子(Ww)雌蝇则应 产生两种卵子:一种所含的 X染色体,其上有红眼基因(W);另一 种所含的X染色体,其上有白眼基因(W);后者若与白眼雄蝇回交, 应产生1/4红眼雌蝇,1/4红眼雄蝇,1/4白

      2、眼雌蝇,1/4白眼雄蝇。实 验结果与预期的一样,表明白眼基因( W)确在X染色体上。 果蝇的性染色体有 X 和 Y 两种类型 .雌蝇细胞内有 2 条 X 染色体 ,为 同配性别(XX),雄蝇为XY是异配性别.性染色体上的基因在其遗传过 程中,其性状表达规律总是与性别有关 .因此 ,把性染色体上基因决定 性状的遗传方式叫伴性遗传。果蝇的红眼与白眼是一对由性染色体上的基因控制的相对性状。 用红 眼雌果蝇与白眼雄果蝇交配,F1代雌雄均为红眼果蝇,F1代相互 交配,F2代则雌性均为红眼,雄性红眼:白眼=1: 1;相反用白 眼雌果蝇与红眼雄果蝇交配,F1代雌性均为红眼,雄性都是白眼, F1相互交配得F2代,雌蝇红眼与白眼比例为1:1,雄蝇红眼与 白眼比例亦为1:1。由此可见位于性染色体上的基因,与雌雄性别 有关系。伴性遗传可归纳为下列规律:1. 当同配性别的性染色体(如哺乳类等为XX为雌性,鸟类ZZ为雄 性)传递纯合显性基因时, F1 雌、雄个体都为显性性状。 F2 性状的 分离呈 3 显性: 1 隐性;性别的分离呈 1 雌: 1 雄。其中隐性个体的 性别与祖代隐性体一样,即 1/2的外孙与其外

      3、祖父具有相同的表型特 征。2. 当同配性别的性染色体传递纯合体隐性基因时, F1 表现为交叉遗传, 即母亲的性状传递给儿子, 父亲的性状传递给女儿, F2 中,性状与性 别的比例均表现为 1: 1。3. 存在于 Y 染色体差别区段上的基因在进行伴性遗传实验时, 也会出现例外个体, 即在 B 杂交组合, F1 代中出现不应该出现的雌性白眼,这是由于两条 x 染色体不分离造成的,不过这种情况极为罕见,约几千个个体中才有一个。三、仪器、设备、试剂及材料1、器材恒温培养箱 ,双筒解剖镜,架盘天平 ,高压灭菌锅 ,培养瓶 ,麻醉瓶 ,白瓷 板,毛笔,镊子,棉花塞。2、试剂乙醚,丙酸 ,酵母粉 ,玉米面 ,琼脂条 ,葡萄糖,蒸馏水。3、材料黑腹果蝇(Drosophila melanogastei)品系,野生型红眼(+)和突变型白 眼(white eye,w).决定黑腹果蝇红眼和白眼的基因位于 X染色体上,是 一对等位基因 .四、步骤1、配制培养基果蝇培养基配方 :A :糖6.2克,加琼脂0.62克,再加水38mm煮沸溶解;B:玉米粉8.25克,加水38mm,加热搅拌均匀,再加0.7克酵母粉;A和B

      4、混合加热成糊状后,加0.5mm丙酸,即可分装到培养瓶中。倒入培养基的厚度约 2厘米,在培养基中插入一张消过毒的干燥硬纸 片,以扩大果蝇的活动场所。将培养瓶置入高温高压灭菌锅内,以121 C, 1.5大气压消毒30分钟。 消毒完成后, 待灭菌锅内压力降至常压后开启锅盖使其半开, 再以灭 菌锅干燥培养瓶之棉塞 30 分钟,完成后取出使其冷却备用。 待培养基冷却后, 用酒精棉花擦去瓶壁上的水珠。 因为瓶里有了积水, 移入的果蝇容易淹死或粘住。2、收集处女蝇 雌果蝇自羽化开始 10 小时之内尚未成熟而无交配能力。选择处女蝇 时,先把培养瓶中的老果蝇全部除去,收集 10 小时之内羽化出来的 新果蝇,麻醉后用放大镜在百瓷板上将果蝇雌雄分开, 这时得到的雌 果蝇应该全部都是处女蝇。 如果要验证选取的处女蝇是否准确, 先不 要放入雄蝇, 3 天后看雌蝇是否产卵,如果产卵就不是处女蝇了。3、接种按照无菌操作技术,一手持培养瓶,一手持广口瓶,轻轻地旋转 广口瓶棉塞,使果蝇掉离棉塞,迅速取下两瓶的棉塞,瓶口相对,培 养瓶在上,果蝇触角根部的感觉神经能和人类的耳朵一样感知声音和 重力,受惊吓后会向上逃走,轻轻

      5、敲击广口瓶,果蝇会陆续飞入培养 瓶,塞好瓶口,进行伴性遗传杂交时 ,应该同时配置正交和反交试验组 合.因为决定性状的基因在性染色体上,正 ,反交的结果会出现性状和性别的差异 .在果蝇培养前 ,要在杂交培养瓶上贴上标签 ,标明实验题 目,杂交组合,杂交日期,实验者姓名 最后,把培养瓶放在2025C恒温 培养箱内饲养果蝇标签如下:A组B组+x WYWW x+Y日期日期姓名姓名4、去亲本:果蝇饲养几天以后,肉眼可见培养瓶中出现了幼虫和蛹,这时可以将亲 本移出,以防亲本与F1果蝇混杂,影响实验结果。5、F1代性状观察和统计:再经过几天饲养之后,培养瓶中会陆续羽化出F1代果蝇,仔细观察F1 代果蝇性状,统计正,反交F1代表型性状的观察结果,并将结果填入表6、F1代自交:把正交试验得到的F1代果蝇转入一个新培养瓶中进行相互交配,把反 交试验得到的F1代果蝇也转入一个新培养瓶中进行互交 (不需挑选 处女蝇),以期获得F2代.7、去亲本:经过78天的培养,当培养瓶里出现了 F2代幼虫和蛹时,把培养瓶里的成蝇转移出去,防止与F2代果蝇混杂.& F2代性状观察和统计:再经过几天饲养之后,F2代果蝇会陆续羽

      6、化来,仔细观察F2代果蝇的 性状,统计正,反交F2代表型性状的观察结果,并将结果填入表格。9、伴性遗传试验结果分析:根据实验观察和统计结果,应用统计学分析方法,分析果蝇眼色遗传的现象和特点,深入理解伴性遗传的本质和规律。五、结果1、实验记录表1果蝇观察记录(A )瓶日期室温C气压Kp恒温箱温度各类果蝇数目红眼红+)白眼s (w)红眼早什)白眼早(w)10.2118.582.1124.1接种:早(+) X s(W)=10:1010.2716.281.8123.8瓶中出现幼虫,放出亲本10.3016.882.1423.215016011.218.882.3922.416019011.418.481.5622.612015011.518.181.7621.4挑出6对转接入新培养瓶中11.1018.481.5221.6放出F1代亲本11.1217.681.4921.45613011.1319.581.2323.17513011.1416.581.5722.78512011.1715.583.2323.1454885011.2116.883.1521.55757106011.2414.883.1

      7、222.03128650表2果蝇观察记录(B )瓶日期室温C气压Kp恒温箱温度各类果蝇数目红眼红+)白眼父(w)红眼早什)白眼早(w)10.2118.582.1124.1接种:早(w) XS (+) =10:1010.2716.281.8123.8瓶中出现幼虫,放出亲本10.3016.882.1423.201517011.218.882.3922.401312011.418.481.5622.601916011.518.181.7621.4挑出6对转接入新培养瓶中11.1018.481.5221.6放出F1代亲本11.1217.681.4921.4987611.1319.581.2323.1697811.1416.581.5722.7468911.1715.583.2323.14442473911.2116.883.1521.55654574911.2414.883.1222.0363426382、结果统计表3F代统计结果(A )瓶察结果统计日期各类果蝇的数目红眼(+)红眼早(+)10.30151611.2161911.41215合计5043表4.Fi代统计结果(B)瓶观察结果统计日期

      8、各类果蝇的数目白眼父(W)红眼早(+)10.30151711.2131211.41916合计4745表5.F2代统计结果(A )瓶观察结果 统计日期、各类果蝇的数目红眼红+)白眼父(w)红眼早什)白眼早(w)11.125613011.137513011.148512011.17454885011.215757106011.243128650合计1531492940百分比26%25%49%0表6.F2代统计结果(B)瓶观察结果 统计日期、各类果蝇的数目红眼红+)白眼父(W)红眼早什)白眼早(w)11.12987611.13697811.14468911.174442473911.215654574911.2436342638合计155153152149百分比25%25%25%23%六、结果分析表16 F2代A组合X2表红眼S什)白眼S (w)红眼早什)白眼早(w)观察值1531492940(0)理论值(e)1491492980(o- e)40-40(o- e)2160160(o - e)2/e0.0500.050x20.1p0.800.70查x2表得:当x2=0.1时,0.70VPV0.80,艮卩P0.05,说明实验结果与理论预期值相符,他们之间的误差属于随机误差,说明此实验F2代值科学,正交试验成功。表

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