药物相互作用实验方案
5页1、艾迪注射液(中药)与培美曲塞(西药)相互作用实验方案1、实验目的与任务1.1实验目的本实验的目的是探究艾迪注射液与培美曲塞联合用药时在动物 体内的药动学参数,来进一步探究两者的相互作用。1.2实验任务本次实验任务如下:(1)完成艾迪注射液与培美曲塞生物样品检测条件摸索,并进行方 法学验证。(2)在大鼠体内进行艾迪注射液与培美曲塞的药物代谢动力学研究(3)数据的统计和处理,药动学参数的计算,得出结论。2、实验材料和仪器2.1实验材料艾迪注射液市售品;人参皂苷Re对照品;黄芪对照品;斑鳌对 照品;培美曲塞市售品;培美曲塞对照品;甲醇(色谱纯);乙腈(色 谱纯);磷酸钠缓冲液(分析纯);纯净水等约SD大鼠130只(雌雄各半,体重200土20g)2.2实验仪器LC-15C高效液相色谱仪;AB-135型分析天平;低速离心机;涡 旋混合仪等3、实验方法3.1标准品色谱条件摸索3.1.1艾迪注射液高效液相色谱方法建立艾迪注射液是由斑蝥、人参、黄芪和刺五加组成的纯中药制剂, 根据查阅相关文献,本实验选择斑蝥、人参、黄芪三个有效成分用于 艾迪注射液的方法建立。供试品和对照品分别注入高效液相色谱仪, 并确
2、定最低检测限及内标液的选择。参考色谱条件:色谱柱:Cosmos% (250mmX4.6mm, 5um), 流动相A:纯水,B:乙腈;梯度洗脱程序:0min 6%B; 0-15min 6%-11%B; 15-80min 11%-33%B;流速:1.0mL/min;检测波长:203nm;柱温: 40C ;进样量 20uL。3.1.2培美曲塞高效液相色谱方法建立将供试品和对照品分别注入高效液相色谱仪,并确定最低检测限 及内标液的选择。参考色谱条件:色谱柱:Cosmos% (250mmX4.6mm, Sum); 流动相:50mmol/L;磷酸钠缓冲液(用磷酸调节pH=3.35):乙腈=84:16 (V/V);流速=1mL/min;检测波长 250nm;柱温 30C。3.2生物样品处理方法的确定取空白大鼠血浆100uL置于离心管中,按体积1: 3加入300uL 甲醇作为沉淀剂,涡旋震荡3min后,4000r/min离心15min,沉淀蛋 白,精密吸取上清液200uL,分别加入经稀释过的艾迪注射液标准品 和培美曲塞标准品溶液,过0.22um有机滤膜,20uL进样,用HPLC 进行分析。根据分析结果
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