您所在位置：网站首页 > 机械/制造/汽车 > 综合/其它高效液相色谱法测定水杨酸及其羟基化产物

高效液相色谱法测定水杨酸及其羟基化产物

2页

卖家[上传人]：hs****ma

文档编号：494872777

上传时间：2023-07-14

文档格式：DOCX

文档大小：58.27KB

文档加载中……请稍候！
如果长时间未打开，您也可以点击刷新试试。

下载文档到电脑，查找使用更方便

10 金贝

/ 2 举报版权申诉马上下载

文本预览

下载提示

常见问题

1、高效液相色谱法测定水杨酸及其羟基化产物实验目的】掌握高效液相色谱法测定水杨酸及其羟基化产物。熟悉高效液相色谱仪的工作原理及操作方法。【实验原理】本实验采用高效液相色谱法测定水杨酸及其羟基化产物，以pH 4.75 27.7 mmol/L醋酸盐缓冲液为流动相， C18 色谱柱分离，电化学检测器 Range=500nA,Ec= +0.85V 下检测水杨酸和 2,3-DHBA，根据保留时间定性，外标法定量。【仪器和试剂】1仪器：高效液相色谱仪；电化学检测器；自动进样器超纯水机等。2. 试剂：醋酸钠；冰醋酸；超纯水；水杨酸（SA）和2,3-二羟基苯甲酸（2,3-DHBA）的标准品。实验步骤】、对仪器的原理及使用进行介绍（30min）二、样品的前处理（10min）模拟SA与H2O2紫外汞灯光解产生的OH发生反应:配制含2.5ymol/L SA、2.5ymol/L 2,3-DHBA待测混合混合溶液，然后用高效液相色谱测定 SA的浓度变化以及2,3-DHBA的浓度。三、样品测定1. 仪器工作条件设置（5min）电化学检测器Range=500nA,Ec= +0.85V；流动相为pH4.75

2、27.7 mmol/L醋酸盐缓冲液;流速： 1ml/min；温度：30C ；进样体积50 “l；读数方式为峰面积。2. 工作曲线的绘制（80min）配制标准系列：分别配制一系列浓度在0.1ymol/L10ymol/L范围内的SA标准溶液和0.1ymol/L10ymol/L范围内的2,3-DHBA标准溶液。按照仪器条件进行检测，记录峰面积, 以标准系列浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。3. 样品测定（30min）按仪器测定条件测定处理好的样品中SA和2,3-DHBA的含量，以峰面积值带入绘制好的标准曲线中计算相应待测样品中SA和2,3-DHBA的浓度。【实验结果】1. 绘制标准曲线SA （卩mol/L）峰面积A0.1494490.5288401180115654445492109556120乙3-DHBA （卩mol/L）峰面积A0.1868580.5210396154766252934137105144874待测样品中水杨酸峰面积 A1=2073310 待测样品中 2,3-二羟基苯甲酸峰面积 A2=2446502 2. 结果计算待测样品SA乙 3-DHBA峰面积20733102446502浓度（ymol/L）2.204.62【注意事项】1. 检测器基线噪音增加，灵敏度低可能是由于流动相中溶解的气体使得压力降低而产生气泡，增加了基线噪音，造成灵敏度下降，甚至无法分析；规范操作：流动相使用前必须进行脱气处理（超声脱气1020min）,以除去流动相中溶解的气体。2. 泵的维护：流动相使用高质量色谱纯（HPLC级）的，并在使用前脱气处理；每次开机后先对泵进行清洗，使用后关机前从泵中洗去缓冲液，防止水和腐蚀性溶剂滞留在泵中。3. 色谱柱的保护：流动相使用前应根据不同的性质选用不同的滤膜（水性/油性）；样品溶液进样前也要经过过滤，防止色谱柱的堵塞。4. 流动相的选择：对被测物质有适宜的溶解度；不与样品及固定相间发生化学反应；黏度小；纯度高，用前要经过过滤和除气等处理。

《高效液相色谱法测定水杨酸及其羟基化产物》由会员hs****ma分享，可在线阅读，更多相关《高效液相色谱法测定水杨酸及其羟基化产物》请在金锄头文库上搜索。

点击阅读更多内容

TA的资源