注射液无菌检查的方法学验证方案

1、注射液无菌检查方法（中国药典 2022 版）验证方案验证方案编号：2022MEF04105004起早单位(ComposedQA):by)：质检部（QCDepartment）起早人(Composer):日期（Date）:审核人(Reviewed by QC):日期（Date）:审核人(Reviewed by日期（Date）：批准人(Approvedby)：日期（Date）：1.验证目的2 . 验证人员3 . 验证依据及参考文件4 .仪器与设施5 . 验证过程5.1 培育基及稀释液5.2 菌液的培育与制备5.3 方法验证试验6 . 验证总结1.验证目的： 本试验是注射液的抑细菌、抑真菌活性及所用的无菌检查方法的牢靠性进行 验证，以确认该产品在该检验量、该检验条件下无抑菌活性或其抑菌活性已被充 分消退至可以忽视。即：保证所用的无菌检验方法能对该产品进行精 确 、牢靠的检验。2 . 验证人员： 验证小组组长：刘长宏 验证小组副组长：宋芳良 验证小组成员：曲晓燕、常西胜3 . 验证依据及参考文件： 验证依据：中华人民共和国药典 2022 版二部参考 文 件：2022 年版 中 国药典 无 菌检查

2、 方 法、验 证 操作学 习 班讲稿 汇 编（中国 药品检验所）4 .仪器与设施XG1.DM-0.36B 型机动门脉冲真空灭菌器 细菌培育箱 霉菌培育箱 净化工作台5 .验证过程：5.1 培育基及稀释液 培育基及稀释液的配制按“中国药典 2022 版二部附录 XI H 无菌检查法”中，有关规定配制本验证 所需培育基：名称来源生产批号配制批号硫乙醇酸盐流体培育基改良马丁培育基养分肉汤培育基养分琼脂培育基0.1%蛋白陈溶液0.9%无菌 NaCl 溶液改良马丁琼脂培育基培育基的适用性检验.1 培育基无菌性检查 从以上培育基及稀释液中，每批随机取 5 支（瓶），培育 14 天，应无菌生长。结果纪录:名称1#2#3#4#5#结果硫乙醇酸盐流体培育基改良马丁培育基养分肉汤培育基养分琼脂培育基01%蛋白陈溶液0.9%无菌 NaCl 溶液改良马丁琼脂培育基鼻二：无菌生长记为“一”；有菌生长!记为“十”结论:.2 培育基灵敏度检查取每管装量为 12ml 的硫乙醇酸盐流体培育基 9 支，分别接种小于 100cfu 的 金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽抱杆菌、生抱梭菌各 2 支，另 1 支不接 种作为空

3、白对比，培育 3 天，逐日观看结果。取每支装量为 9ml 的改良马丁培育基 5 支，分别接种小于 100cfu 的白色念 珠菌、黑曲霉各 2 支，另 1 支不接种作为空白对比，培育 5 天，逐日观看结果。空白对比管应无菌生长，若加菌的培育基管均生长良好，则可判该培育基的 灵敏度检查符合规定。硫乙醇酸盐流体培育基批号：菌液名称第一天其次天第三天金黄色葡萄球菌铜绿假单胞菌枯草芽抱杆菌生泡梭菌空白对比注：无菌生长记为“一”；有菌生长且生长良好记为“ + ”;有菌生长二但生长较差记为“差二改良马丁培育基 批号:菌液名称第1天第2天第3天第4天第5天白色念珠菌黑曲霉八、l-LLI空白对比注：尢菌生长记为“ 有菌生长且生主长良好记为“十“；有菌生长但【生长较差记为“差结论:5.2 菌液的培育与制备 菌种菌种名称 金黄色葡萄球菌 铜绿假单胞菌 枯草芽狗杆菌 生狗梭菌 白色念珠菌 黑曲霉编号CMCC (B) 26003CMCC (B) 10104CMCC (B) 63501CMCC (B) 64941CMCC (F) 98001CMCC (F) 98003批号代数菌液制备接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞

4、菌、枯草芽抱杆菌的新奇培育物至养分肉 汤培育基中， 3035C 培育 1824 小时。用 0.9%无菌 NaCl 溶液制成每 1ml 含 菌数小于100cfu的菌悬液。取肉汤培育物lml+9ml09%无菌NaCl溶液，十倍稀释至10 一 51()-7稀释级可得约为50loocfUmi的菌悬液。用养分琼脂培育基 做活菌计数备用。接种生胞梭菌的新奇培育物至硫乙醇酸盐流体培育基中，3035C培育 1824小时。用0.9%无菌NaCl溶液稀释至厂厂稀释级制成每 含菌 lml 数小于 100cfu 的菌悬液。接种白色念珠菌的新奇培育物至改良马丁培育基中， 2328C 培育 2448 小 时。用 0.9%无菌 NaCl 溶液制成每 1ml 含菌数小于 100cfu 的菌悬液。取改良马 丁培育物lml + 9ml9.9%无菌NaCl溶液，十倍稀释至10 57稀释级可得约Kr为50loocfumi的菌悬液。用改良马丁琼脂培育基做活菌计数备用。接种黑曲霉的新奇培育物至改良马丁琼脂培育基斜面培育基中，2328C培育57天，加入35ml含0.05% (mimi)聚山梨酯80的0.9%无菌 NaCl溶 液，将

5、泡子洗脱。然后，吸出范I子悬液至无菌试管中，用含0.05% (mimi)聚山梨酯 80 的 0.9%无菌 NaCl 溶液制成每 1ml 含抱子数小于 100cfu 的抱子悬液。 取培育物lml+9ml().9%无菌 NaCl溶液(含0. 05% (ml/bl)聚山梨酯80)十 倍稀释至10 4稀释级可得约为50loBcfUmi的抱子悬液。用改良马丁琼脂培育 基做活菌计数备用 。 菌液制备后在常温下放置， 并在 2 小时内使用 。 若保存在 2-8 C,可在24小时使用。结论：5.3 方法验证试验按中国药典 2022 版二部规定，依据下表中预定检验方案，将规定量的注射 液供试品按薄膜过滤法过滤，冲洗，在最终一次的冲洗液中分别加入小于 100cfu 的试验菌之一，过滤。取出滤膜接种至相应培育基中（金黄色葡萄球菌、铜绿假 单胞菌、枯草芽抱杆菌、生抱梭菌接种于硫乙醇酸盐流体培育基中；白色念珠菌、 黑曲霉接种于改良马丁培育基中）。另取一装有同体积培育基的容器，加入等量 的相应试验菌，作为对比。按规定温度培育 3 5 天，观看各试验管生长状况。 各试验菌同法操作。0.1 %蛋白豚溶液PH7.0氯化

6、 钠 缓冲0ml100ml800ml苦参素氯化钠注射液、法莫替丁氯化钠注射液、 胞磷胆碱钠氯化钠注射液、维生素C注射液、 胞磷胆碱钠注射液、利巴韦林注射液、肌昔注射 液、毗拉西坦注射液、曲克芦丁注射液、复方氨 林巴比妥注射液、盐酸奈福泮注射液、酚磺乙胺 注射液、苦参素注射液、氢化可的松注射液、尼 莫地平注射液、维生素 B6注射液、葡萄糖酸锦 钠注射液、盐酸曲马多注射液、甲硫胺酸VBI 注射液、乙酰胺注射液、盐酸曲马多氯化钠注射 液、磷酸川茸嗪注射液、盐酸纳洛酮注射液、果 糖二磷酸钠注射液 地塞米松注射液克林霉素磷酸酯注射液、硫酸小诺霉素注射液、 硫酸妥布霉素注射液、硫酸阿米卡星注射液、硫 酸庆大霉素注射液、盐酸林可霉素注射液、硫酸 奈替米星注射液无直接 接种 法与对比管（只加阳性菌）相比较，如含供试品各容器中的试验菌均生长良好 则该供试品的该检验量在该检验条件下无抑菌作用或其抑菌作用可以忽视不计 可以照此检查法进行该产品的日常无菌检查。如含供试品的任一容器中微生物生长微弱、缓慢或不生长，则该供试品的该 检验量在该试验条件下有抑菌作用，可逐一采纳以下方法消退或减小该供试品的 抑菌性并重新

7、进行方法验证：（1）增加冲洗量（2）增加培育基的用量（3）使用中和剂或灭活剂（4）更换滤膜品种同法每个注射液产品至少平行测定三次。第一次试验结果:品名：批号：规格：接种量：冲洗量：稀释液：菌种名称结果纪录种类i天天天金黄色葡萄球菌供试品+阳性菌性菌 （对比）铜绿假单胞菌供试品+1阳性菌性菌 （对j比枯草芽泡杆菌供试品+阳性菌性菌 （对J比生抱梭菌供试品+1阳性菌性菌 （对f比白色念珠菌供试品+1阳/ . *性菌性菌 （对r比黑曲霉供试品+阳性菌阳性菌（对比）注：试验管无菌生长记为“一 有菌生长且生长良好记为“十十;有菌生长但生 长状况较差记为“差工其次次试验结果:品名：批号：规格：接种量:冲洗量：稀释液：菌种名称结果纪录种类1天金黄色葡萄球菌供试品+阳性菌-寸性菌 （对比）铜绿假单胞菌供试品+1阳性菌性菌 （对j比）枯草芽泡杆菌供试品+阳性菌性菌 （对1比）生抱梭菌供试品+阳性菌阳性菌（对比）-白色念珠菌供试品+1阳性菌寸性菌 （对1比）黑曲霉供试品+1阳/ -性菌性菌 （对1比）注：试验管无菌生长记为“一；有菌生长且生长良好记为“十有菌生长但生 长状况较差记为“差二第三次试验结果:品名：批号：规格：接种量：冲1洗量：稀释液：菌种名称结果纪录类1大4大5大金黄色葡萄球菌供试品+1阳性菌寸性菌 （对j比）铜可绿假单胞菌供试品+1阳性菌寸性菌 （对j比）枯草芽抱杆菌供试品+阳性菌阳性菌（对比）生泡梭菌供试品十阳/ . *性菌1性菌 （对1比）白色念珠菌供试品+1阳/ . *性菌1性菌 （对1比）黑曲霉、匸、t 倉 上上 一r r a r 供试品+1阳性菌1性菌 （对1比）注二：试验官尢菌生长记为“ ”；有菌生长且生长良好

《注射液无菌检查的方法学验证方案》由会员re****.1分享，可在线阅读，更多相关《注射液无菌检查的方法学验证方案》请在金锄头文库上搜索。