简单测定种子的生活力
12页1、8 种 子 生 活 力 测 定Z1 概述种子生活力(Seed viability)是指种子发芽的潜在能力。种子生活力测定在农业生产上具 有重要的意义:测定休眠种子的生活力。许多植物种子因存在休眠,暂时不能萌发,因此 发芽率很低,尤其是新收获的和野生性较强的种子,必须进行生活力测定,才能了解种子的 发芽潜力,以便合理利用种子。播种前对发芽率低而生活力高的种子,应进行适当处理。种 子检验时,若发芽试验末期有新鲜不发芽种子或硬实种子,也应接着进行生活力测定,以正 确评定种子品质。快速预测种子的发芽力。休眠种子可借助于各种处理措施打破休眠,然 后进行发芽试验,但所需时间较长。而种子贸易中,有时因时间紧迫,不可能采用标准发芽 试验来测定发芽力,因为发芽试验所需时间更长,如小麦需8d,水稻需14d,某些蔬菜和 牧草种子需23周,而多数林木种子则需要更长的时间。在这种情况下,可用生物化学速 测法测定种子生活力作为参考。种子生活力测定方法有10多种,根据其测定原理可大致分为4类:生物化学法,如四唑 测定法、溴麝香草酚蓝法、甲烯蓝法、中性红法和二硝基苯法等。组织化学法,如靛蓝染 色法、红墨水染色法和软x
2、射线造影法等。荧光分析法。离体胚测定法。本节主要介 绍四唑测定法、离体胚测定法、染料染色法和软x射线造影法。Z2生活力测定方法一、测定原理有生活力的种子,其活细胞原生质膜具有选择透性,当种子浸入染料后,染料大分子不 能进入活细胞内,所以胚部等活组织不能被染料染色,而死的种胚细胞因原生质膜丧失选择 吸收能力,故可被染料染色。二、测定方法(一)染色法1. 靛蓝染色法此法适用于豆类、谷类、棉花、瓜类和林木等大粒种子的生活力测定。所用试剂为靛蓝 (或称靛蓝洋红),分子式为C18H8O2N2 (SO5Na) 2,系蓝色粉剂,能缓慢溶于水。测定 方法如下:(I)种子预处理:将种子浸人30C水中,水稻、向日葵、蓖麻、花生和棉籽等种子须先 去壳再浸种,浸种时间因种子不同而异,小麦、大麦、大豆、豌豆和向日葵等为3h,燕麦、 芝麻等4h,油菜、花生、棉籽等6 h,蓖麻、红麻、大麻等7 h、黍8 h、水稻12 h、 玉米20 h将充分吸胀的种子(100粒2次重复),沿胚中线纵切(如禾谷类)或剥去种皮 (如双子叶种子),以备染色用。(2) 靛蓝染色:将处理好的种子置于培养皿或小烧杯内,加入靛蓝溶液淹没种子,纵
3、切 种子,用0.1%溶液,剥去种皮种子用0.2%溶液。染色时间禾谷类为15min,油菜、芝 麻、红麻和大麻等30 min,大豆、亚麻、向日葵、蓖麻、花生和棉籽等60 min豌豆18 0 min3)观察鉴定:取出染色后的种子,用清水冲洗后立即进行观察鉴定。凡种胚不染色或染成浅蓝色的、胚根尖端或少部分子叶染色的,为有生活力种子;凡种胚全部染成蓝色的, 或胚根、胚轴、胚芽、子叶等大部分染成蓝色的,为无生活力种子。2. 红墨水染色法其测定原理、种子预处理方法以及染色时间等与靛蓝染色法基本相同,只是所染成的颜 色不同,死胚染成红色,活种子胚不染色。测定时用刚开瓶的红墨水,加水稀释后使用,红 墨水与水的比例:小麦、玉米、大豆和棉花等为1: 60,大麦以1: 120为宜。到达规定 染色时间后取出种子,用清水冲洗并立即观察鉴定。(二) 其他方法四唑测定法(一)四唑测定法概述1. 发展简史四唑测定法于1942年由德国H.Lakon教授发明,二战期间传入美国。1ST A于1950年成立四唑测定技术委员会,1953年首次将四唑测定列入国际种子检验规程。1974年, ISTA四唑测定技术委员会主席美国,为发展
4、和推进四唑测定技术的标准化,主持编写四 唑测定手册,其后经过多次ISTA会议讨论修改,于I984年正式公布发行。该手册汇集 了世界上最先进实用的种子四唑测定技术,以及650多个属和种的农作物、蔬菜、林木、 牧草、药材和花卉种子的具体测定技术,堪称最具权威性的四唑测定参考。种子生活力四唑 测定技术经过不断研究和完善,目前已在全世界广泛应用。2. 特点四唑测定具有原理可靠、简便快速、结果准确、不受休眠限制以及成本低廉等特点。该 法比按细胞膜选择透比不同的染色方法更为可靠,所击仪器设备和物品较少,程序比较简单, 一般 2 4 h 之内即能获得测定结果,不论是休眠种子还是非休眠种子均适用。因此,该法 是世界公认的最有效的种子生活力测定方法。3适用范围根据国际种子检验规程规定,四唑测定适用于下列范围:(1) 测定休眠种子、收获后需马上播种的种子以及发芽缓慢的种子的发芽潜力。(2) 测定发芽试验末期末发芽种子的生活力,特别是怀疑有休眠时。(3)测定种子收获或加工过程中的种子损伤(如热伤、机械损伤、化学伤害等)原因。4)解决发芽试验中遇到的问题,查明不正常幼苗产生的原因和杀菌剂、种子包衣等处理的伤害
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