脑脊液总蛋白检测试剂盒
2页1、脑脊液总蛋白检测试剂盒(邻苯三酚红钼比色法)简介:脑脊液(Cerebro-Spinal Fluid , CSF)是存在于脑室、蛛网膜下腔和脊髓中央管内的无 色透明液体,由脑室中的脉络丛产生,与血浆和淋巴液的性质相似。正常成年人的脑脊液 约100150ml,弱碱性,不含红细胞。正常脑脊液具有一定的化学成分和压力,对维持颅 压的相对稳定有重要作用,当中枢神经系统受损时,脑脊液的检测成为重要的辅助诊断手 段。总蛋白(Total Protein,TP)由白蛋白和球蛋白组成。对于生物体液(血清、尿液、脑脊 液)中总蛋白质含量的测定,一般要基于如下两个假设:1、所有蛋白质分子由纯多肽组成, 含氮量的质量百分比为16% ; 2、体液中含有数百个蛋白质分子,每个分子对测定反应都 具有非常相似的特性。目前常用的方法有:双缩脲法、紫外分光光度法、染料结合法、凯 氏定氮法、沉淀法等。Leage ne脑脊液总蛋白检测试剂盒(邻苯三酚红钼比色法)其检测原理是在酸性条件下, 首先邻苯三酚红和钼酸络合形成红色复合物,该复合物与蛋白质形成复合体,其吸收峰移 至604nm,通过比色法求出样本中蛋白质的含量。本试剂盒专门
2、用于人或动物脑脊液样本 中的总蛋白含量测定,但易受表面活性剂影响。本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床 诊断或其他用途。编号名称-.TC059350TTC0593100TStorage试剂(A):TP显色液A1:邻苯三酚红溶液50ml100mlRT避光A2: TP assay buffer50ml100mlRT临用刖,按A1:A2混匀,即为显色试剂,即配即用。试剂(B):蛋白标准20mg20mgRT试剂(C):蛋白标准配制液5ml5mlRT使用说明书1份自备料:1、离心管、小试管2、比色杯3、分光光度计操作步骤(仅供参考):1、取蛋白标准配制液或稀释液加入到蛋白标准中,充分溶解后配制成蛋白标准溶液,配制 后可立即使用,溶解后的蛋白标准溶液应-20保存。取蛋白标准溶液用蛋白标准配制 液或稀释液继续进行稀释。特别提示:待测蛋白溶解于什么样的稀释液中蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中。例如待测蛋白溶解于蔗糖中亦取蛋白标准溶解于蔗糖中。 一般也可以用NaCI或PBS作为稀释液。2、TP加样操作,按下表依次加入试剂:加入物(ml)空白管标准管待测管蛋白标准配制液0.04蛋白标准溶液(0.5mg/ml)0.04待检样品(脑脊液)0.04TP显色液2.02.02.03、混匀,室温孵育。4、比色杯光径,分光光度计测定波长处的吸光度。以空白管调零,卖取标准管和各待测管的吸光度。一般1h内测完。计算:脑脊液总蛋白(mg/L) = (待测管吸光度/标准管吸光度)x 500注意事项:1、蛋白标准粉末溶解于蛋白标准配制液后,即获得蛋白标准原液,该原液中含有防腐剂,不影响后续检测,该蛋白标准原液-20弋长期保存。2、如果没分光光度计,也可以使用酶标仪测定。使用酶标仪测定蛋白浓度时,每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著增加。3、CTAB、Triton X-100、Tween-80等对本实验有影响,应注意避免上述物质的污染。4、该方法蛋白含量2g/L以下称线性关系,如果脑脊液中所含蛋白浓度过高,应稀释后再进行检测,否则影响结果。有效期:12个月有效。蛋白标准配制成溶液后应-20冻存。
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