同型半胱氨酸测定检测操作程序
4页1、概述血清同型半胱氨酸(Hcy)是人体内含硫氨基酸的一个重要的代谢中间产物,可能是动脉粥样 硬化等心血管疾病发病的一个独立危险因子。Hcy水平升高被认为是动脉粥样硬化性疾病独 立的渐进性致病因素,血浆中同型半胱氨酸含量与遗传因素、营养因素、雌激素水平、年龄 因素等有关,同型半胱氨酸又称为高半胱氨酸,Hcy的正常参考值随测定方法和种族人群的 不同而有所不同,一般正常空腹血浆总Hcy水平为5-15umol/L0研究表明:Hcy每升高 5umol/L脑卒中风险升高59%,缺血性心脏病风险升高32%; Hcy每降低5umol/L脑卒中风险 降低24%,缺血性心脏病风险降低16%.Hcy水平与心血管事件风险呈正相关。1目的规范血清同型半胱氨酸检测测试,确保检测结果准确性和重复性。2检测方法和原理2.1检测方法:速率法2.2检测原理:本产品基于一种新型酶法,样本中的氧化型Hcy被转化为游离型Hcy后,进 行一系列循环反应,这种基于共价底物转化产物的酶循环反应系统大大提高了检测的灵敏 度,主要是利用S-腺苷同型半胱麻酸(SAH)水解酶反应原理,在该反应中SAH被水解酶水 解成腺苷和Hcy,腺苷立即水解
2、成氨和次黄嘌吟,氨在谷氨酸脱氢酶的作用下,NADH转化 为NAD,样本中Hcy浓度与NADH转化速率成正比。3标本采集与保护新鲜无溶血血清或EDTA、肝素抗凝血浆遵守以下推荐的血清标本处理,运行和储存步骤3.1用真空采样管采集血液标本时须遵守常规注意事项3.2离心前使标本完全自然形成凝块3.3全程保证样品管的密闭状态3.4尽快分离血清,并及时测定3.5如果标本不能在24小时内检测或运送标本时,将标本保存在4C或更低温度的环境中:3.6冷藏标本室温放置20分钟后再测定;3.7冷冻标本室温解溶后放置20分钟后再测定3.8不符合标本处理3.8.1溶血和乳糜血标本在报告单的备注栏注明3.8.2标本量过少的标本,严重溶血和乳糜血标本与临床沟通并将标本退回,填写不合格标 本拒接登记。4试剂和设备4.1试剂采用深圳奥萨制药有限公司试剂4.1.1试剂组成试剂1 S-腺苷甲硫氨酸(SAM)0. 1 mM烟酸胺腺嘌吟二核苷酸(NADH)0. 3 mM三(2-羧乙基)麟氯化氢(TCEP)0. 5 mMa一酮戊二酸(Oxoglutarate)5. 0 mMHcy 甲基转移酶(HMTase)5.0 KU/L试剂
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