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正交试验法优选壮腰膝五味药材组方提取工艺研究

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1、正交试验法优选壮腰膝五味药材组方提取工艺研究龚卫红韩立炜郑海云赵希贤摘要目标经过正交试验，优选处方的最好提取工艺。方法采取水提取方法，以水为溶剂进行提取，选择加水倍数，提取时间，提取次数三个原因，每个原因设计三个水平，原因水平见表1，根据正交试验L9（34）表进行试验。分别以总黄酮作为标志性成份，综合考虑，选定最优提取工艺。结果原因相关性RCRARB，药材的加水量(C)为关键原因。提取的最好工艺条件为加8 倍量水，提取时间为1.5 h 一次。结论优选得到的提取工艺简单、稳定、可行。关键词正交试验；提取工艺Abstract Objective To experiment, the best extraction optimization prescription. Methods The water extraction method, water as solvent extraction, multiple choice with water, extraction time and number of the three factors, each of th

2、e three levels of design, factor levels in Table 1, in accordance with the orthogonal L9 (34) Table experiment.Respectively, as a symbol of the composition of total flavonoids, considering the selected optimal extraction. Results Factors related to RC RA RB, herbs amount of water (C) as the main factor.The optimum extraction conditions for 8 times the amount of water, extraction time 1.5 h, once. Conclusion The optimized extraction process is simple, stable and feasible.keywords Orthogonal; extr

3、action 骨碎补含有补肾强骨、养伤止痛之功效。用于肾虚腰痛、耳鸣耳聋、牙齿松动、跌扑闪挫、筋骨伤折等症1。其活性成份为柚皮苷等二氢黄酮类化合物。据报道，用水提取和醇提取，提取的活性成份含量相差不多2。骨碎补浸膏以水为溶剂时提取效果很好3，淫羊藿，含有补肾阳、强筋骨、祛风湿等功效；黄酮类化合物及淫羊藿苷是淫羊藿主要的活性成份。可用水提或乙醇提取4。怀牛膝，含有活血祛瘀、补肝肾、强筋骨、利尿通淋、引血下行功效。甾酮，皂苷，多糖为关键成份。枸杞有清肺、明目、滋肝、补肾之功效，多糖为关键成份。延胡索含有活血化疲，行气止痛功效。五味配伍组方则有补肾，壮腰膝，强筋骨止痛之功效。为了确保制剂质量，用正交设计法研究其最好提取工艺，分析加水倍数，提取时间，提取次数对总黄酮得率的影响，优选出最好提取条件。 1 仪器和材料 1.1 仪器 uv2800H 型紫外可见分光光度计（尤尼柯（上海）仪器有限企业）。 1.2 材料全部药材均购于北京本草方源药业有限企业。 2 方法和结果 2.1 样品的制备按处方投料，加要求量的水，煎煮要求的时间和次数，滤过，滤液浓缩至稠膏，放入真空干燥箱，干燥得干膏作为样品，进

4、行测定。 2.2 正交试验设计选取L9(34)正交试验，结合影响该药材提取效率的关键原因，考察药材加水量、提取时间、提取次数对总黄酮含量的影响，同时考虑生产实际,选择3 个水平，见表1。 2.3 总黄酮含量的测定方法 2.3.1 对照品溶液制备精密称取芦丁（批号100080202107，购于药品生物制品判定所）5.1 mg，加甲醇溶解并定容至100 mL，即得0.051 mg/mL。 2.3.2 标准曲线的制备吸收芦丁标准溶液：0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL 于10 mL 比色管中，加甲醇至刻度，摇匀，于波长360 nm 比色。求得回归方程，Y=31.29X+0.0018 R2 = 0.9997，计算试样中总黄酮含量。 2.3.3 供试品溶液的制备称取一定量的试样(大约0.5 g)，加乙醇定容至25 mL，摇匀后，超声提取20 min，放置，吸收上清液1.0 mL，于蒸发皿中，加1g 聚酰胺粉吸附，于水浴上挥去乙醇，然后转入层析柱。先用甲苯洗，甲苯液弃去，然后用甲醇洗脱黄酮，定容至25 mL。此液于波长360 nm 测定吸收值。计算试样中总黄酮含量。 3 结果见表2。 4 结果分析影响原因大小次序为CAB，即提取为最主要，其次为含醇量。 5 讨论中药复方常含多个药材，若以某个药材的成份为标准考察提取工艺则不能反应全方面，故多选取总成份做标准。但单一成份也不能全方面反应，提议选择几个总成份综合评定。试验室正交设计研究时和生产存在差异，通常试验室提取更完全，出膏率高，有效成份含量略高；生产应依据情况进行调整。参考文件1国家药典委员会编.中国药典S.一部.北京:化学工业出版.2021.2 张琳,杨中林.水提法和醇提法对骨碎补中总黄酮含量的影响比较J.江苏药学和临床研究,2021,12 卷(3):3031.3 王允,刘毅,姚干.骨碎补提取和含量测定研究概况J.药业,2021,16(6):63.4 申庆亮,丁涛.正交设计法研究淫羊藿提取工艺条件J.试验方剂学杂志,2021,10(5):56.

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