γ-干扰素释放试验在涂阴肺结核患者诊断中的应用研究
6页1、 -干扰素释放试验在涂阴肺结核患者诊断中的应用研究 黄振超(广东省清远市慢性病防治医院检验科,广东 清远 511500)0 引言肺结核(pulmonary tuberculosis,TB)是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)引起的呼吸道传染病,在我国具有较高的发病率。MTB感染严重危害人类健康,据WHO报道,MTB感染人数超过全球1/3以上人数,而我国MTB感染率高达44.5%,高居全球第2位。快速准确地检测结核分枝杆菌的感染是减少肺结核病传染的关键手段。目前面临困惑是虽然临床诊断检测技术不断更新但MTB的漏诊以及误诊概率仍不容乐观。现有TB诊断方法中,虽然细菌学检查(痰抗酸染色涂片、MTB分离培养鉴定)是TB诊断的金标准,但敏感性不高且培养耗时长,在TB感染早期诊断中受限;影像学、结核菌素皮肤实验(TST)、抗体检查、免疫球蛋白(TB-Ig)等均存在一定灵敏度、特异性局限。因此,研发新型诊断方法对TB早期诊断与治疗意义重大。近年来,分子生物学技术在潜伏感染、TB、耐药TB和非MTB等方面应用广泛,具有快速、方便以及安全性高等优点。且对于痰液
2、中存在结核杆菌的肺结核患者可以通过痰液细菌学检测进行诊疗,但半数左右的肺结核患者痰液中并不存在MTB,导致其痰涂片细菌检测结果为阴性,被称为涂阴肺结核患者1。-干扰素释放试验是一种免疫检测方式,其具体原理是结核分枝杆菌在特异性抗原刺激下能使T细胞致敏,致敏后的T细胞与同类抗原结合将产生-干扰素,因此通过检测肺结核患者血液中-干扰素水平或者T细胞数量可以判断该患者是否发生MTB感染2,结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)便是根据该原理设计的一种检测方式。本研究通过对比分析不同检测方式对涂阴TB的诊断效能,以为T-SPOT.TB应用于涂阴TB患者的诊断提供依据。1 资料与方法1.1 临床资料选取2019年9月至2021年9月我院收治的涂阴TB患者300例。纳入标准:(1)所有患者存在咳痰、咳嗽等临床症状,同时采用影像学检查存在肺部阴影;(2)对本研究相关操作知情同意。涂阴TB诊断标准:具有典型TB临床症状和影像特征性表现。予以抗TB治疗有效。排除其他非TB肺部疾患,包括肺炎、肺癌、慢阻肺等。直接痰涂片显示可见抗酸杆菌呈现阴性。支气管或者是肺组织病理显示TB改变。排除标准:(1)合并
3、原发性免疫缺陷性疾病患者;(2)伴有糖尿病、高血压等基础疾病患者。300例患者中男216例,女84例,年龄15-87岁,平均(47.0017.65)岁。表1 不同检测方式诊断效能比较1.2 方法300例患者均进行PPD试验、MTB -RNA恒温扩增实时检测技术(SAT-TB)、T-SPOT.TB检测,其中PPD试验具体做法为将0.1mLPPD剂注入患者1/3前臂内侧皮肤处,使其形成一个皮肤硬结,观察3天,根据皮肤硬结直径对结果进行判定,阴性:硬结直径小于5mm或者是未发现硬结;弱阳性:硬结直径大小在5mm-9mm之间;中度阳性:硬结直径大小在10mm-19mm之间;强阳性:硬结直径大小20mm。SAT-TB具体做法:收集300例患者的痰液标本,根据SAT-TB试剂盒(上海仁度生物科技有限公司)中的操作指南进行操作,并根据仪器厂家设置参数自动判读结果。T-SPOT.TB试验操作:首先,收集所有患者血液各5mL,将滤过蛋白(CFP)和结核特异度抗原(Tuberculosis specific antigen,ESA)对靶向抗原早期分泌作为刺激原,然后经温箱进行24h培养后,利用记录斑点数,
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