山楂的降血脂有效部位提取工艺研究分析开题报告

开题报告 课题名称 山楂的降血脂有效部位提取工艺研究 学生姓名 学号 实习单位 指导教师 职称（职务） 一、课题研究的目的和意义（含国内外研究现状分析）： 心血管疾病是目前威胁我国人民健康的重大疾病之一目前用于高血脂治疗的药物主要有他汀类、贝丁酸类、多烯脂肪酸类、绞股蓝、山楂、刺玫果等。 降血脂药物需要长期服用，患者对药物的副作用敏感，均有一定的副作用，如他汀类影响肝功能、还可能引起横纹肌溶解症、严重时导致急性肾功能衰竭；贝丁酸类有胃肠道反应、皮疹等副作用。当使用两种有效部位组方时，需要考察为何选择这两种有效部位组方和两种有效部位的搭配比例等问题，这就需要做大量的药理药效和处方优选工作，为了减小处方优选时的困难，本文拟按中药山楂中的山楂黄酮和三萜酸的比例3:3：5组方，制成单方制剂。以上研究有效利用了山楂资源，提高了山楂类制剂的技术水平。 钱伟平等认为山楂叶制剂益心酮有降血清胆固醇作用，在五天内，山楂黄酮组降低比例为 15%，对照组下降比例为 9.2%，高出 5.8 个百分点。山楂黄酮，使动物廓清速度加快，廓清时间缩短。 张赛璐认为山楂可能具有抑制β－羟基β一甲基戊二酸辅酶 A 还原酶的活性，从而抑制内源性胆固醇的合成，并能升高高密度脂蛋白，降低低密度脂蛋白，有利于清除外周组织中过多的胆固醇，从而改善体内的脂质代谢。其它研究还包括林启云用 95%的乙醇提取了广西大果山楂，预试验认为其化学成份主要为苷类、有机酸类、黄酮类、萜类，喂服高血脂大鼠后，证明其可以降低大鼠的胆固醇和甘油三酯。葛志英用山楂、山药等为主组成的中药复方水煎后喂服动脉粥样硬化模型的家兔，以非诺贝特喂服同样的家兔作对照，总计做了二批实验 33 只家兔，结果表明此复方有降低血清总胆固醇、甘油三脂的作用，结果均低于对照组。陈红宾等对山楂的不同品种做了药理作用的比较，认为野山楂、山楂有降低胆固醇的作用，以野山楂效果为佳，而云南山楂和山楂属植物山里红则没有降胆固醇作用。 陈武等为了研究熊果酸的保肝作用,分别建立小鼠肝脏损伤模型,测定H种酶ALT、AST、TB和MDA含量为指标,观察熊果酸对肝脏等脏器损伤的作用,并与另一抗巧炎药物齐壞果酸进行对照。结果表明:30mg/kg熊果酸可W显著降低CC14、D-GalN、BCG-LPS、ANIT致肝损伤小鼠血清的ALT和肝MDA值。陈勇等[传统北山植作为实验样品,利用熊果酸作对照,研究大果山植及其果叶,采用娃胶G(0.7%CMC—Na)薄层板,105度活化比,W环己焼一丙S-醋酸乙醋(3:21)为展开剂,结果供试品色谱在对应位置上有类似斑点。由此实验结果表明大果山植及其果叶都含有熊果酸,并且大果山植中熊果酸含量明显高于北山植中的含量。潘莖等大果山植为原料,采用动物实验法,研究其提取物对于也脏和血管功能。钟海雁等为了测定林擒叶对径自由基的清除作用及对动物肝脏匀浆过氧化的抑制作用,分别采用了Feton实验和硫代己比妥酸法(TBA)。上述实验结果表明,乙醇化’理的清除效果最好。陈勇等大果山植为供试品,草酸,梓樣酸,苹果酸和巧巧酸作为参考材料,北山植是实验对照,并用薄层色谱法,判断相应的斑点,结果表明大果山樓中含有苹果酸,草酸,號巧酸,苹果酸是主要的有机酸成分。叶希韵在山楂叶总黄酮防治鹌鹑动脉粥样硬化的试验研究过程中认为：山植叶总黄酮对鹌鹑血液中 TC，TG，LDL-C，MDA，FA，LDH，ALT 含量的上升均有很明显的抑制作用，同时与动脉粥样硬化（Atherosclerosis AS）组相比，其 HDL -C ，SOD，NO 含量有明显的提高。在降血脂方面与脂必妥对照组的效果相近，而在抗脂质过氧化方面比脂必妥效果更好。说明山植叶总黄酮可通过降低血脂，抗脂质过氧化损伤，达到防治 AS 形成的作用。 二、课题研究内容和研究目标： 学者对山楂黄酮调节脂质代谢作用进行了大量研究，山楂及山楂黄酮能显著升高大鼠肝脏 LDLR 蛋白水平，显著增加了大鼠肝脏 LDLR 数目。而对亲和力影响不明显。说明山楂及山楂黄酮通过调节大鼠肝脏 LDLR 转录水平和提高抗氧化能力抑制脂质过氧化物预防脂质代谢紊乱。 山楂叶制剂益心酮有降血清胆固醇作用，山楂黄酮，使动物廓清速度加快，廓清时间缩短。 (2)降压作用： 较小剂量注射对麻醉兔、小鼠有降压作用。山楂乙醇浸出物静脉给药，能使麻醉兔血压缓缓下降，持续3h。。 (3)舒张血管作用： 山楂总黄酮可增加冠脉流量抗实验性心肌缺氧，抗心率失常等作用，这对冠心病等心血管疾病的防治显然是有益的[30]。 (4)抗心率失常作用： 山楂浸膏对垂体后叶素引起的心率不齐，有一定的抑制作用。 (5)抗氧化作用： 山楂叶乙醇提取物对羟自由基和超氧阴离子的生成有清除和抑制作用。 三、课题研究方法和研究思路（含技术路线）： （一）研究方法 本文的研究主要采取文献综述法、实验法。 1． 文献法。本文在进行研究时阅读和参考了大量文献并从中提炼作者的观点，为本文的研究奠定了理论基础，为自己的论文提供了研究思路及研究过程。 2． 实验法。本文在进行研究的过程中采用了大量实验证明研究的观点。 （二）技术路线 其中常用的提取方法概述如下： （1）水煮浸提法： 流程为：山楂叶→水浸煮（2 次）→滤液浓缩→沉淀→过滤→干燥。 （2）溶剂萃取法： 流程为：山楂叶→用 70%乙醇提取→减压回收乙醇→水分散→用正丁醇萃取→回收正丁醇→总黄酮。 （3）聚酰胺分离法： 流程为：山楂叶→用 70%乙醇提取→回收乙醇→加入聚酰胺粉→用乙醇梯度洗脱→收集各级洗脱液→合并浓缩。 （4）树脂吸附法： 流程为：山楂叶→浸渍→回收乙醇→过滤→树脂分离→回收乙醇→干燥 四、预期研究结果： 1采用乙醇提取－大孔树脂精制的方法提取山楂叶中的总黄酮。 2确定工艺为：精密称取 500g 山楂叶粗粉（20 目），先用 60％乙醇 11.5L 浸泡 1h，加热至 70℃提取 40min，滤过，滤渣再加入 11.5mL60%乙醇提取 40min， 合并过滤液，减压浓缩，浓缩至无乙醇，加入一定量的水溶液，制成每 1mL 相当于药材 1g 的流浸膏，将上述水溶液以 6BV/h 的流速通过大孔吸附树脂柱，用 12BV 的水以 14BV/h 的流速洗去杂质，最后用 15BV70％乙醇用同一流速洗脱。洗脱液真空干燥，得总黄酮提取部位。 3从山楂果实中提取三萜酸类成分。 4进行了山楂黄酮、山楂三萜酸的比色法含量测定，双波长薄层色谱扫描法测定。 五、计划进度表： 第一阶段：2019.8.10-2019.10.20：确定论文题目，并收集与论文相关的资料 第二阶段：2019.12.20-2019.12.25：组织论文内容，交开题报告初稿 第三阶段：2019.12.25-2020.01.10：开题报告定稿 第四阶段：2020.03.05-2020.04.28：在各大网站搜索文献资料等，补充所需 第五阶段：2020.05.01-2020.05.28：经过导师多次指导与修改完成毕业论文 第六阶段：2020.06.10-2020.06.15：论文答辩 六、参考文献： 参考文献： [1]钟丽霞,江震宇,汪嘉妮,李旭枫,徐丽珊.山楂多糖提取工艺优化及其降血糖、降血脂活性[J].食品工业科技,2019,40(13):119-124+147. [2]赵尹铭,王雨,周波,王凯月,王小莹.影响山楂降脂功效发挥的因素[J].时珍国医国药,2017,28(11):2722-2723. [3]罗嘉琪,许滨,陈雨,梁生旺.山楂药材中八种降血脂有效成分的提取与HPLC含量测定[J].广东化工,2017,44(04):17-20. [4]张明,陈珍.山楂黄酮提取物降血脂研究[J].安徽农业科学,2016,44(16):109-110+113. [5]荆雪冰,孙晓萌.不同的山楂提取物其降血脂作用的对比[J].当代医药论丛,2015,13(22):151-152. [6]高光跃，山楂叶的采收对化学成分的影响，西北药学杂志，1993，8(4)：157～ 158 [7]孙家莉，山楂叶维生素含量及稳定性的研究，特产研究，1991，(4)：8～10 [8]Harry H.S. Fong ， Jerry L. Bauman ， Hawthorn ， The Journal of CardiovascularNursing，2002，16(4)：1-8 [9]W.Vierling，N.Brand，F.Gaedcke，Investigationofthepharmaceutical and pharmacological equivalence of different Hawthorn extracts ， Phytomedicine，2003，10：8-16 [10]刘霞，山楂黄酮类成分的分析测定，吉林农业大学学报，1997，19(3)：47 [11]陈坚，山楂果肉、核、叶中总黄酮的含量测定与比较，基层中药杂志，1999， 13(4)：8 [11] 陈坚，山楂果肉、核、叶中总黄酮的含量测定与比较，基层中药杂志，1999， 13(4)：8 [12]丁杏苞，姜岩青，仲英，等，山楂叶化学成分的研究，中国中药杂志，1990， 15(5)：39 [13]董英杰，张乃先，张明磊，等，大果山楂叶黄酮成分研究，沈阳药科大学学报，1996，13(1)：31 [14]斯建勇，陈迪华，高光跃，等，云南山楂叶化学成研究，中国中药杂志，1998， 23(7)：422 [15]容小翔，丁在兰.山楂研究新进展述略，黑龙江中医药，1995，(4)：54 [16]张培成，山楂化学成分及其药理活性的研究，沈阳药科大学博士论文，2000， 21 [17]许洛，赵福岐，张昌军，等，.山楂叶总黄酮的提取与分析，泰山医学院学报，1988，9(2)：116 [18]沈映君，中药药理学，北京：人民卫生出版社，2000.574～578 指导教师意见（包括课题难度是否适中、工作量是否饱满、进度安排是否合理、工作条件是否具备、是否同意开题等）： 指导教师签字: 年 月 日