邻二氮菲分光光度法测定微量铁.ppt

单击此处编辑母版标题样式,,单击此处编辑母版文本样式,,第二级,,第三级,,第四级,,第五级,,,,*,单击此处编辑母版标题样式,,单击此处编辑母版文本样式,,第二级,,第三级,,第四级,,第五级,,,,*,邻二氮菲分光光度法测微量铁,,,一、实验目的,⒈,学习确定实验条件的方法，掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理；,,⒉掌握,721,型分光光度计的使用方法，并了解此仪器的主要构造⒈,确定适宜的条件的原因：,,将被测物与显色剂反应，使之生成有色物质，然后测其吸光度，进而求得被测物质的含量因此，显色条件的完全程度和吸光度的测量条件都会影响到测量结果的准确性为了使测定有较高的灵敏度和准确性，必须选择适宜的显色反应条件和仪器测量条件通常所研究的显色反应条件有显色温度和时间，显色剂用量，显色液酸度，干扰物质的影响因素及消除等，但主要是测量波长和参比溶液的选择显色剂用量和测量波长的选择是该实验的内容二、实验原理,根据朗伯－比耳定律：,A=εbc,当入射光波长,λ,及光程,b,一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度,A,与该物质的浓度,c,成正比只要绘出以吸光度,A,为纵坐标，浓度,c,为横坐标的标准曲线，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，即工业盐酸中铁的含量。

邻二氮菲亦称邻菲咯啉（简写,phen,），是光度法测定铁的优良试剂在,pH=2,～,9,的范围内，邻二氮菲与二价铁生成稳定的桔红色配合物（（,Fe(phen),3,）,2+,）配合物的,lgK,稳,,= 21.3,，摩尔吸光系数,ε510 = 1.1×10,4,L·mol-1·cm,-1,，,,而,Fe3+,能与邻二氮菲生成,3∶1,配合物，呈淡蓝色，,lgK,稳,=14.1,所以在加入显色剂之前，应用盐酸羟胺,(NH2OH·HCl),将,Fe,3+,还原为,Fe,2+,，其反应式如下：,,2 Fe,3+,+ 2 NH,2,OH·HCl → 2Fe,2+,+ N,2,+ H,2,O + 4H,+,+ 2Cl,-,,,测定时控制溶液的酸度为,pH≈5,较为适宜，用邻二氮菲可测定试样中铁的总量金属一,EDTA,络合物与其它络合物一样，在溶液中存在着离解平衡，其平衡常数用稳定常数,(,形成常数,),或不稳定常数,(,离解常数,),来表示于金属离子,-EDTA,一般形成,1,：,1,络合物，为讨论方便，略去式中的电荷，简写成：,,,M,＋,Y↔MY,,当此反应达平衡时,,,,,K,稳,越大,(,或,K,不稳,越小,),，说明络合物越稳定。

[MY],,1,,,K,稳,=──── =───,,,[M][Y],,K,不稳,阳离子,lgK,稳,阳离子,lgK,稳,阳离子,lgK,稳,Na+,1.66,Ce3+,15.98,Hg2+,21.80,Li+,2.79,Al3+,16.10,Cr3+,23.00,Ba2+,7.76,Co2+,16.31,Th4+,23.20,Sr2+,8.63,Zn2+,16.50,Fe3+,25.10,Mg2+,8.69,Pb2+,18.04,V3+,25.90,Ca2+,10.69,Y3+,18.09,Bi3+,27.94,Mn2+,14.04,Ni2+,18.67,,,Fe2+,14.33,Cu2+,18.80,,,表,1 EDTA,与各种常见金属离子的络合物的稳定常数,(,溶液离子强度,I=0.1,，温度,20,℃,),络合物稳定性主要决定于,,金属离子本身的离子电荷、离子半径和电子层结构,,溶液的酸度、温度和其它络合剂,,三、仪器试剂,⒈,仪器：,721,型分光光度计；,1cm,吸收池；,10mL,吸量管；,25mL,比色管,(7,个,),⒉试剂：,1.0×10,-3,mol·L,-1,,铁标准溶液；,100μg·mL,-1,铁标准溶液；,,0.15%,邻二氮菲水溶液；,10%,盐酸羟胺溶液（新配）；,,1mol·L,-1,乙酸钠溶液；,,1 mol·L,-1,NaOH,溶液；,,6 mol·L,-1,HCl,（工业盐酸试样）。

试剂配制,1.0×10,-3,mol·L,-1,,铁标准溶液；,,100μg·mL,-1,铁标准溶液； （铁分子量,55.85,，硫酸亚铁,152,）,,0.15%,邻二氮菲水溶液；,,10%,盐酸羟胺溶液（新配）；,,1mol·L,-1,乙酸钠溶液；（分子量,82.03,）,,四、实验步骤,⒈,吸收曲线的绘制和测量波长的选择（略）,,用吸量管吸取,2.00 mL 1.0×10-3mol·L-1,铁标准溶液，注入,50mL,比色管中，加入,1.00mL 10%,盐酸羟胺溶液，摇匀，加入,2.00 mL 0.15%,邻二氮菲溶液，,5.0 mLNaAc,溶液，以水稀释至刻度在光度计上用,1 cm,比色皿，采用试剂溶液为参比溶液，在,440,～,560 nm,间，每隔,10 nm,测量一次吸光度（在最大吸收波长处，每隔,2nm,），以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收曲线，选择测量的适宜波长⒉,显色剂条件的选择（显色剂用量）,,在,6,支比色管中，各加入,2.00mL 1.0×10,-3,mol·L-1,铁标准溶液和,1.00mL 10%,盐酸羟胺溶液，摇匀分别加入,0.10,，,0.50,，,1.00,，,2.00,，,3.00,及,4.00mL 0.15%,邻二氮菲溶液，,5.0 mL NaAc,溶液，以水稀释至刻度，摇匀。

在光度计上用,1cm,比色皿，采用试剂溶液为参比溶液，测吸光度以邻二氮菲体积为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸光度,-,试剂用量曲线，从而确定最佳显色剂用量⒊,工业盐酸中铁含量的测定,⑴,标准曲线的制作,,在,6,支,50mL,比色管中，分别加入,0.00,、,0.20,、,0.40,、,0.60,、,0.80,、,1.00mL 100,,μg/mL,铁标准溶液，再加入,1.00mL 10%,盐酸羟胺溶液，,2.00mL 0.15%,邻二氮菲,,溶液和,5.0 mL NaAc,溶液，以水稀释至刻度，摇匀在,512nm,处，用,1cm,比色,,皿，以试剂空白为参比，测吸光度,A,⑵,试样测定,,准确吸取适量工业盐酸三份，按标准曲线的操作步骤，测定其吸光度五、预备实验,,六、实验注意事项,⒈,不能颠倒各种试剂的加入顺序⒉读数据时要注意,A,和,T,所对应的数据透射比与吸光度的关系为,:A=log(I,0,/I)= log(1/T),；测定条件指：测定波长和参比溶液的选择⒊最佳波长选择好后不要再改变⒋每次测定前要注意调满刻度。