石墨炉原子吸收光谱测定人血中铅的含量ppt课件.ppt

石墨炉原子吸收光谱石墨炉原子吸收光谱测定测定人血中铅的含量人血中铅的含量 马  璐石墨炉原子吸收光谱测定人血中铅的含量石墨炉原子吸收光谱测定人血中铅的含量 l实验目的实验目的l实验原理及意义实验原理及意义l实验步骤及方法实验步骤及方法l本卷须知本卷须知l实验报告实验报告实验目的实验目的1. 了解石墨炉原子吸收法检测血铅的根本原理2. 了解血铅的测定在职业铅中毒诊断和职业性安康检查中的意义 3.了解不同基体改良剂对石墨炉原子吸收法测定血铅的影响实验原理实验原理职业性慢性铅中毒：        由于接触铅烟或铅尘所致的以神经、消化、造血系统妨碍为主的全身性疾病 铅的代谢及分布铅的代谢及分布铅尘、铅烟肺血液〔红细胞、血浆〕骨骼肝、肾、脑尿液铅中毒铅中毒  线粒体卟啉代谢紊乱δ-氨基-r-酮戊酸 〔ALA)血原卟啉〔FEP) 血锌原卟啉(ZPP) 血红素合成抑制神经系统：周围神经病                  中毒性脑病消化系统：   腹绞痛血液系统：   贫血                     点彩红细胞血管、肾脏：牙龈铅线                      Fanconi中毒诊断中毒诊断血铅血铅≥2.9μmol/L(0.6mg/L、、600μg/L) 轻、中、重轻、中、重铅中毒实验室诊断铅中毒实验室诊断指标职业接触限值   诊断值血锌原卟啉(ZPP)μmol/L(μg/gHb) 2.91(13.0)  血原卟啉(EP) μmol/L(μg/L) 3.56(2000)  血铅(PbB) μmol/L(μg/L)  1.9(400)   2.9(600)  尿铅(PbB) μmol/L(μg/L) 0.34(70) 0.58(120)  尿δ-氨基-r-酮戊酸(ALA) μmol/L(μg/L)  61.0(8000) 　 结合职业接触史、作业环境调查、临床表现作出诊断〔GBZ37-2019)察看对象察看对象血铅血铅≥1.9μmol/L(0.4mg/L、、400μg/L,) 石墨炉原子吸收法石墨炉原子吸收法----血铅血铅根本原理：血液经硝酸处置后进入石墨炉原子化器中进展原子  化，被测元素〔Pb〕构成基态原子蒸气；    铅空心阴极灯辐射出的特征谱线283.3 nm通被基态原子态吸收，生成相应吸光度值；    在一定实验条件下，其吸光度与试样中的铅浓度成正比，据此进展血液中铅的定量分析。

石墨炉原子吸收法石墨炉原子吸收法----血铅血铅l根本步骤：枯燥灰化原子化〔搜集信号〕   氩气〔维护、去除    基体蒸汽及杂质〕l调整气流量、温度、继续时间对实验条件进展优化石墨炉原子吸收法石墨炉原子吸收法----血铅血铅l基体改良剂l作用：维护被测物质l           消除基体干扰l血铅：Triton X-100 、磷酸二氢铵 意义及运用意义及运用l血液中95%的铅在红细胞中，其浓度与机体铅吸收、分布、排出处于平衡形状 l当生活或消费环境不变，铅暴露根本稳定的情况下，血铅不仅反映了近期的铅接触程度，也一定程度上作为内暴露程度反映体内的铅负荷l采样方便、不易污染、灵敏度高，血铅常被用于反映铅对人体危害的目的实验器材与试剂实验器材与试剂l仪器：原子吸收分光光度计〔有石墨炉原子化l              器和背景校正安装〕；l              铅空心阴极灯；l器材：15ml、1.5 ml 离心管；肝素钠抗凝真空采血管l               烧杯、100ml容量瓶、移液管、胶头滴管、移l               液枪〔1ml及200ul)及枪头l试剂：血样；铅规范贮藏液〔1.00 mg/ml〕，l               硝酸〔G.R〕；Triton X-100〔G.R〕；l               磷酸二氢铵溶液〔A.R〕；高纯水。

实验方法与步骤实验方法与步骤〔一〕溶液配制      铅规范运用液、基体改良剂、血铅规范液实验方法与步骤实验方法与步骤l铅规范运用液配制〔已配好〕l    l 1.00 mg/ml的铅规范贮藏液用1%的硝酸稀释为：l    1 mg/L Pb规范运用液I，l    0.1 mg/L的Pb规范运用液II实验方法与步骤实验方法与步骤l基体改良剂l基体改良剂1l   100 ml溶液含0.1% Triton X-100〔WS/T 20-2019〕，0.1% 硝酸l基体改良剂2l   100 ml溶液含0.2%磷酸二氢铵，0.3% Triton X-100，0.1% 硝酸实验方法与步骤实验方法与步骤l血铅规范液配制〔基体改良剂---血液---Pb规范液〕l分别用基体改良剂1、基体改良剂2配置两组血铅的规范溶液，l浓度分别为0，10，,20，40，80，μg/L Pb标准溶液浓度（μg/L）010204080血液（μl）100100100100100Pb标准应用液I（μl）00040 80 Pb标准应用液II（μl）0100 200 00基体改进剂（μl）900800700860820实验方法与步骤实验方法与步骤〔二〕被测样品制备1.采用肝素钠抗凝真空采血管采集被测血样，混匀后保管于4°C冰箱；2.汲取100 μl血样分别加两种基体改良剂，稀释至1ml，充分混匀，配成血液检测样，分别储存于1.5 ml 离心管中备用。

实验方法与步骤实验方法与步骤〔三〕样品检测1.选定被检测元素，设置检测条件及参数；2.对血铅规范液进展测定，得出吸光度值并拟合规范曲线；3.对样品进展检测，将吸光度值与规范曲线进展比对，得出血液检测液浓度实验方法与步骤实验方法与步骤序号操作步骤温度（°C）持续时间(s)气体流量(L/min)1干燥1601.00.32干燥290400.33干燥3120100.34灰化13500.20.35灰化2650100.36灰化36505.00.07原子化20000.90.08原子化20003.00.09清除26000.30.310清除26005.00.3信信号号搜搜集集读数数样品检测样品检测留意：样品检测前，清洗清洁池及进样管；进样程序开场前，先对石墨管进展空烧，排除上次检测的余样，减少干扰；上样前需将样品充分混匀，减少丈量误差实验方法与步骤实验方法与步骤结果分析1.绘制血铅的规范曲线，得出规范方程式2.样品的吸光度值减去试剂空白的吸光度值，由规范曲线算得的浓度即为稀释血样中的铅浓度c0〔μg/L〕3.血样中铅的浓度：c= c0 * s本卷须知本卷须知l一切实验运用的器皿都用20%硝酸浸泡48h，然后依次用去离子水和高纯水冲洗，晾干备用；l血样采集、运输、保管及配置过程中也应防止铅污染；l操作时，防止实验器皿触碰到皮肤及桌面，以防止外源的铅污染，影响实验结果；l正确运用移液枪，精准加样；l 假设血样含铅量超出规范曲线的测定范围，可添加稀释倍数。

实验分组及分工实验分组及分工全班分两个组〔12人/组〕组1：基体改良剂1         基体改良剂1作为溶剂的血铅规范液及被测血样的稀释         组2：基体改良剂2         基体改良剂2作为溶剂的血铅规范液及被测血样的稀释注：每组2份被测血样，分别来自不同的受检个体实验结果全班共享，两组对实验结果进展整合及比较，完成结果讨论及分析         实验报告实验报告l实验目的l实验方法：简单表达操作步骤l实验结果l1.绘制规范曲线，计算样品含铅浓度；l2.根据国家职业卫生规范对被测者血铅浓度进展初步评价及诊断；假设要确诊，还需哪些资料的补充？l3.讨论：参与基体改良剂对血铅的测定有什么影响？实验试剂的配制实验试剂的配制l基体改良剂l基体改良剂1l   100 ml溶液含0.1% Triton X-100〔WS/T 20-2019〕，0.1% 硝酸l基体改良剂2l   100 ml溶液含0.2%磷酸二氢铵，0.3% Triton X-100，0.1% 硝酸l检测样品配制l      汲取100 μl血样参与基体改良剂，稀释至1ml，充分混匀，配成血液检测样，分别储存于1.5 ml 离心管中备用Pb标准溶液浓度（μg/L）010204080血液（μl）100100100100100Pb标准应用液I（μl）00040 80 Pb标准应用液II（μl）0100 200 00基体改进剂（μl）900800700860820l血铅规范品配制谢   谢！。