双歧杆菌V9发酵液功能性成分研究.docx

       双歧杆菌V9发酵液功能性成分研究                     关键词：发酵液；有机酸；氨基酸；维生素双歧杆菌作为有益于人体健康的益生菌，渐渐成为微生态制剂研究的一大热点趋势，且广泛应用于食品、畜禽养殖、医疗保健和基因工程等领域[1]双歧杆菌还具有降低胆固醇和血脂的功能，主要的作用机制包括共沉淀作用、吸附结合作用以及抑制肠道中胆酸的重新吸收等[5]1 材料与方法1.1 材料与试剂双歧杆菌V9菌株由内蒙古普泽生物制品有限责任公司提供，本试验所用试剂部分为分析纯，部分离密度发酵所用原料为食品级测定主要依据国标，试剂和试剂的配制均由内蒙古普泽生物制品有限责任公司提供1.2 实验方法称取5 g发酵液（精确至0.01 g）均匀试样，放入25 mL容量瓶中，加水至刻度经0.45 pm水相滤膜过滤，注入高效液相色谱仪分析，以保留时间定性，外标法定量，得到峰及峰面积之后，根据标准曲线得到发酵液中有机酸的浓度2 结果与分析2.1 发酵液有机酸含量分析色谱图如图1所示，从左到右依次为标准有机酸出峰顺序，分别为，甲酸、乳酸、乙酸、柠檬酸、琥珀酸、丙酸和丁酸样品的浓度如表1所示，其中乙酸的含量最高，其次为甲酸和乳酸。

采用益生菌双歧杆菌V9作为发酵剂制作的产品，产生的有机酸可以在提升胃肠道免疫功能、抑制病原菌生长繁殖、改善消化功能、降低血浆胆固醇浓度乃至抑制肿瘤发生等方面起到重要作用图1 发酵液有机酸色谱图表1 发酵液有机酸回归方程、相关系数R2和样品含量样品回归方程相关系数R2样品含量甲酸y=495090x-5241R2=0.99997.22 mg/ml乳酸y=222481x-3825.9R2=0.99984.99 mg/ml乙酸y=463082x-3749.3R2=0.99997.29 mg/ml柠檬酸y=1E+06x+38726R2=0.99912.35 mg/ml琥珀酸y=465720x+1880.6R2=0.99993.11 mg/ml丙酸y=222481x-3825.9R2=0.99981.53 mg/ml丁酸y=420930x-370923R2=0.9973.26 mg/ml2.2 发酵液氨基酸含量分析游离氨基酸是既含有氨基（-NH2）又含有羧基（-COOH）的一类有机化合物，是重要的生物活性物质游离氨基酸可为人体活动提供能量，对合成蛋白质起着至关重要的作用发酵液中含有丰富的游离氨基酸，为人体提供必需和非必需氨基酸，通过测定其含量可以为人们的日常饮食提供数据依据。

结果表明（表1），双歧杆菌V9发酵液中氨基酸种类丰富，多达16种，且含量丰富，1 L发酵液中氨基酸总量达到4.05 g/100；超过0.2g/100的氨基酸达到9种其中含量最高的氨基酸为谷氨酸，可以参与人体脑内蛋白质和糖类代谢，促进发生氧化，在人体中可以与氨结合生成谷酰胺，从而降低血氨，表1 双歧杆菌V9发酵液中氨基酸含量（含量由高到低）氨基酸含量（g/100g）谷氨酸（Glu）0.37甘氨酸（Gly）0.21脯氨酸（Pro）0.19亮氨酸（Leu）0.16天冬氨酸（Asp）0.14赖氨酸（Lys）0.135丙氨酸（Ala）0.13缬氨酸（Val）0.11精氨酸（Arg）0.1丝氨酸（Ser）0.09异亮氨酸（Ile）0.08苏氨酸（Thr）0.08酪氨酸（Tyr）0.08苯丙氨酸（Phe）0.08组氨酸（His）0.05蛋氨酸（Met）0.022.3 发酵液维生素含量分析VB5（泛酸）是人体脂肪酸合成类固醇所必需的物质，还可减轻抗生素等药物引起的毒副作用，参与多种营养成分的吸收和利用泛酸也是植物乳杆菌生长所必需的营养素，在一定控制条件下，将植物乳杆菌接种到含有发酵液的培养液中，测定其吸光值，并根据标准曲线计算出泛酸的含量。

表2 双歧杆菌V9发酵液中维生素的含量维生素含量维生素B2/（mg/100 g）0.00225维生素B1/（mg/100 g）0.364维生素B6/（mg/100 g）2.12维生素B5/μg/100 mL74.53 结论双歧杆菌V9发酵液的营养成分，如有机酸、氨基酸还是维生素含量丰富，可以扩大生产进行制备生产日用品、调味品、食品添加剂及饲料添加剂等从生产规模、产品周期和产生的经济效益角度分析，发酵液具有一定的发展前景此外，再接下来生产的过程中，可向发酵液投入一定量的微量元素，并调节加入时间和加入量，具有更好的功能性，并加以市场化参考文献：1.  2. 陈霞. 具有益生功能的Bifidobacterium animalis subsp.lactisV9 的安全性评估,生理功效及其全基因组学研究[D]. 内蒙古农业大学, 2010.3. Ma C , Huo D , You Z , et al. Differential pattern of indigenous microbiome responses to probiotic Bifidobacterium lactis V9 consumption across subjects[J]. Food Research International, 2020, 136:109496. -全文完-。