抗ra33抗体的检测及其在类风湿关节炎中的意义.doc

抗抗 RA33RA33 抗体的检测及其在类风湿关节炎中的意义抗体的检测及其在类风湿关节炎中的意义抗 RA33 抗体的检测及其在类风湿关节炎中的意义2010-01-13 刘建平 曾庆馀 周修国 肖征宇 许杰洲 黄少弼 为了解抗 RA33 抗体在类风湿关节炎(RA)诊断、早期诊断和预后估计的意义，为治疗个体化提供线索〔1〕 ，我们用 Hassfeld 等的方法对 RA 等 280 例进行检测，结果如下 1 资料与方法 1.1 研究对象 病人组：RA 患者 125 例，男 42 例，女 83 例，年龄 18 岁～76岁，平均 46.1 岁其中早期 37 例未使用过慢作用抗风湿药或使用时间短于 1 个月者(下简称未用药者)66 例诊断均符合 1987 年美国风湿病学会(ARA)RA 分类标准 对照组：共 155 例，其中各种风湿病 111 例，包括系统性红斑狼疮(SLE)54 例、强直性脊柱炎(AS)47 例、系统性硬化症(SSc)10例，诊断均符合相应的国际通用诊断标准；另 44 例为正常对照组 1.2 方法 1.2.1 收集血清标本，记录患者同期一般情况、关节表现(压痛关节数、肿胀关节数、关节指数)、病情严重性(Strinbrocker 分期分级)、关节外表现、医师和病人对病情活动性的评价等。

关节表现采用 28 个关节计分法〔2〕 ，手足关节 X 线病情进展采用改进 Sharp 评分标准评价 1.2.2 培养收集约 2×109 个 HeLa 细胞，按 Hassfeld 等方法提取RA33 抗原，经 12%十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)凝胶电泳分离，再电泳转移至硝酸纤维膜，封闭非特异位点后，与病人血清进行免疫印迹反应病人血清 1∶20 稀释，标记抗体为 1∶200 稀释的辣根过氧化物酶标记的羊抗人 IgG 抗体，用标准分子量标记物半对数作图法，判定检测标本的结果 1.2.3 其它血清学指标包括抗鼠食管角质层抗体(AKA)、血沉(ESR)、C-反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)、抗核抗体(ANA)等 2 结 果 125 例 RA 病人中，42 例为抗 RA33 阳性，抗 RA33 对 RA 诊断敏感性为 33.6%，特异性为 96.2%；未用药者抗 RA33 阳性率为43.9%(29/66)，用药者为 15.7%(13/59)(P＜0.01)；抗 RA33 抗体阳性者 69%(29/42)病程小于三年；阳性者 RF 阳性率比阴性者低(54.8%，23/42 对 81.9%，68/83)(P＜0.001)；而 AKA 阳性率则显著高于阴性组(45%、19/42 对 3.6%、3/83，P＜0.001)。

病人年龄、性别、关节表现、实验室指标及关节外表现等，总体上阳性组均较阴性组或轻或低，但差异无统计学意义 在 Steionbrocker 疾病进展分期和功能分级方面，同期、同级内，阳性组第Ⅰ期、Ⅱ期和第 1 级、2 级所占比例高，第Ⅲ期、Ⅳ期和第 3 级、4 级则阴性组比例较高 对 104 例 RA 病人 X 线手足正位相的 Sharp 评分结果，抗 RA33抗体阳性者平均值(36.2±7.5)显著低于阴性者(64.0±7.3)(P＜0.001) 37 例病情短于 1 年、骨质无明显破坏的早期 RA，抗 RA33 阳性率为 51.4%(19/37)，显著高于非早期病例(20.5%，23/88)(P＜0.001)除阳性组 AKA 阳性率高于阴性组(31.6%、6/19 对5.6%、1/18)外，其它实验室各项指标和病情进展分期、功能分级等方面阳性组与阴性组均无显著性差异 本对照组中，10 例抗 RA33 阳性，其中 SLE 8 例(14.8%)，SSc 2 例(2/10)，均为女性抗 RA33 阳性 SLE 患者临床检测抗 dsDNA 抗体、抗 Sm 抗体、抗 RNP 抗体以及 ANA 均为阳性，与 RA 有明显差别。

3 讨 论 抗 RA33 对 RA 诊断敏感性国内外结果不一，大多介于 20%～40%之间，最高 61%，最低仅为 6%本文结果为 33.6%，与北京协和医院报告相近其特异性最初报道为 99.6%〔3〕 但后来研究表明在10%～40%的 SLE 等疾病也可检测到该抗体由于 RA33 是异质性核糖核蛋白体(hnRNP)的核心蛋白 A2，有人认为 SLE 等疾病中针对小核糖核蛋白体(snRNP)成分如 u1-RNP 的自身免疫反应可以针对 hnRNP-snRNP 复合体中的 hnRNP 成分如 A2 产生交叉反应，从而导致这些疾病中抗 RA33 阳性率高，而 RA 病人则只针对 RA33/A2 产生反应因此，同时检测抗 Sm、抗 RNP、ANA 等抗体，有助于鉴别抗 RA33 阳性的意义，提高对 RA 的特异性，本文结果特异性为 96.2%，对照组阳性者与抗 Sm、抗 RNP 和 ANA、抗 dsDNA 显著相关，支持上述看法 本组 RA33 阳性病例手、足 X 线相的病情进展评分显著低于RA33 阴性者，病情进展分期分级也较轻，RF 阳性率低这些情况提示抗 RA33 阳性者病情较轻，但是否提示具有自限性、预后良好，尚待进一步研究。

另外，本组未用药 RA 病人抗 RA33 阳性率显著高于用药病人，提示慢性作用抗风湿药可能影抗 RA33 阳性率 Cordonnier 等报告抗 RA33 阳性有早期提示 RA 作用，本组 37例早期病人中，抗 RA33 的阳性率为 51.4%，支持抗 RA33 有早期诊断意义 本文抗 RA33 阳性者 RF 阳性率较低，可能与早期检出率高有关AKA 与抗 RA33 相关性较明显，二者结合可提高对 RA 诊断敏感性，也有助于早期诊断 其它风湿病抗 RA33 阳性率以 SLE 较高，本组为 14.8%，均为女性有报告该抗体阳性的 SLE 病人多有侵蚀性关节炎，皮肤受累则较少见本组未发现该抗体与这些临床特征有相关性，但这些病人在血清学方面则与抗 Sm、抗 RNP、ANA 显著相关这有助于 RA 的鉴别诊断至于抗 RA33 阳性病例是否与这些病的某些临床特点有什么联系，有待进一步探讨 作者单位：515031 汕头大学医学院〔刘建平(现在广东省粤北人民医院)、曾庆馀、周修国〕 ，汕头大学医学院第一附属医院(肖征宇、许杰洲、黄少弼) 参 考 文 献 1 曾庆馀.类风湿关节炎治疗要高度个体化.中华内科杂志，1996，35(7)：437 2 Sharp JT,Young DY,Bluhm GB,et al.How many joints in the hands and wrists should be included in a score of radiologic abnormalities used to assess rheumatoid arthritis?Arthritis Rheum,1985,28(12):1326～1333 3 Hassfeld W,Steiner G,Hartmuth K,et al.Demonstration of a new anti-nuclear antibody (anti-RA33) that is highly specific for rheumatoid arthritis.Arthritis Rheum.1989,32:1515～1520。