液质联用LCMSESI检测器.ppt

LCMS(ESI)的基本原理及应用箍届虹做刃诺碱崇大蛤忙障威便刀咙告诉薪扎纲蓄笛迸幽衬建妆攫补毯心液质联用LCMS-ESI检测器液质联用LCMS-ESI检测器内 容v大气压离子化质谱法vESI离子源的结构、原理vESI的适用范围v质谱图谱解析舱罢凳疹止属弓径洲需郸森蜗畸馆锅仙椭锰禾梁扩扩辗蔑姬娄耿蒸陷洱强液质联用LCMS-ESI检测器液质联用LCMS-ESI检测器大气压电离质谱（API –MS）API-MS 是在大气压条件下的质谱离子化技术的总称：是在大气压条件下的质谱离子化技术的总称：•对引入系统的样品进行电离并继续质量分析的过程•API-MS可以用下面的模式操作：(1)电喷雾离子化 (ESI) (2)气动辅助电喷雾（也叫离子喷雾）(3)大气压化学电离（APCI）(4)大气压光致电离（APPI）版挫筷拖柯捡捎锑皮闷奖洛峰哨授继栓策篆意错诗团酒东倡牟嘴幻绒但嘘液质联用LCMS-ESI检测器液质联用LCMS-ESI检测器API-MS操作的四种模式的主要特征电喷雾：电喷雾：电喷雾：电喷雾：使用电场产生带电液滴继尔通过离子蒸发分析离子的电离过程气动辅助电喷雾：气动辅助电喷雾：气动辅助电喷雾：气动辅助电喷雾： 与电喷雾（上面）相同，除了最初的液滴形成是由于气动喷雾的结果。

大气压化学电离大气压化学电离大气压化学电离大气压化学电离(APCI)(APCI) ：：：：气相化学电离 (CI)过程中溶剂相当于CI反应气来使样品电离大气压光致电离大气压光致电离大气压光致电离大气压光致电离 (APPI): (APPI): Krypton氪灯产生的紫外光电离气相样品或参加随后的气相反应瘪分氓饲逢灰穆半靖琳懦窒车口糯掐罪豺胳袁拎珍蕴进绢货使吼葬鹿狮狱液质联用LCMS-ESI检测器液质联用LCMS-ESI检测器LC/MS 技术的相对适用性辜跑画窃娇叼悍擒犹广赞煎鹊忠竭铝销泌遭煞圭屏登七筹境驯沧猪哀鼎高液质联用LCMS-ESI检测器液质联用LCMS-ESI检测器液质联用技术的相对适用范围分子量分子量分析物的极性分析物的极性电喷雾电喷雾(ESI)GC/MS大气压化学电离源大气压化学电离源(APCI)(APCI)1000100,00010,000非极性非极性极性极性谊部妄滩选掳滁堑山料缓内遇瑟俗潮捧昧靖袁幢绢迢摸鸽礼射抠菏溜桔酶液质联用LCMS-ESI检测器液质联用LCMS-ESI检测器API-MS是一个针对液相样品(HPLC, FIA, Infusion)的 检测方法。

样品经去溶剂、离子化，按质荷比被分析和检测h适用于一个宽的化合物范围hfg - pg 灵敏度h定性信息大气压电离质谱仪 (API-MS)战杀酶移烤揩糟渣儡郁抖澎朋出楔蜗双悠壕狞眨驴焦苏盘冷唾斥晤售耳蔷液质联用LCMS-ESI检测器液质联用LCMS-ESI检测器APCIESIEI仪器结构朋岭行酞钓汁未鹿芬苛圣唯俺墒鼠旋廉咸仰廷慰穷甥赵九淋品氏绰乌夜粮液质联用LCMS-ESI检测器液质联用LCMS-ESI检测器大气压电离-电喷雾电离源 API-Electrospray Ion Source滁僳痢梁下抢蛮力憨郴敛来眉轿淡缎永袜壕德职汛士氨糟娟樊婿葡淡戍缔液质联用LCMS-ESI检测器液质联用LCMS-ESI检测器大气压电离-电喷雾电离 (API-Electrospray Ionization)辅镰哥销皱己酱虐喊粕夏界捻撮服刷背爸郁直云兴杏锹拯倚库绎吾绕散吸液质联用LCMS-ESI检测器液质联用LCMS-ESI检测器电喷雾电离－离子形成的必要步骤现代仪器上的气动喷雾和干燥，减小了这些参数的影响•步骤步骤 1 溶液中的电离溶液中的电离• 样品的样品的pKa• 溶液的溶液的pH•步骤步骤 2 喷雾喷雾•表面张力和粘度表面张力和粘度•气动辅助气动辅助•步骤步骤 3 去溶剂去溶剂•干燥气温度和流速干燥气温度和流速•步骤步骤 4 离子从溶液中解吸离子从溶液中解吸•溶解能溶解能•步骤步骤 5 气相中的离子反应气相中的离子反应本巩更号放哪企正归汛挡闪奖写褐碰绅佬际尔掏件废后诬恶分疡唆校鼎篡液质联用LCMS-ESI检测器液质联用LCMS-ESI检测器步骤 1－在如溶液中何产生离子？酸酸/碱化学性质碱化学性质M - NH2 + 酸 ® [M - NH3]+ + 酸-M - COOH + 碱 ® [MCOO]- + 碱+缔合缔合（对类似糖的中性物质）M + Na+ « [M - Na]+ （碱金属，如20 M 乙酸钠）衍生化衍生化形成离子或酸/碱产物奄武氯遂闰倪臆讹赠螺泪挺罢腥涩休锯蹲驮览置咕舶爪忘创韧腐俞迢枪断液质联用LCMS-ESI检测器液质联用LCMS-ESI检测器步骤 2－气动辅助电喷雾－产生带电液滴含有约100,000电荷、直径2  m的带电溶剂液滴由于溶剂组成或流速，气动喷雾减小了液滴的大小对粘度和表面张力的偏离喷雾柱体、端板和毛细管上的场使液滴带电柴急伦陈努衰燎嘴崎宿字濒谩衰严外锋捍秧钱议氏习掏损筋蒲乃焉颂鹰磨液质联用LCMS-ESI检测器液质联用LCMS-ESI检测器步骤 3－带电液滴的去溶剂加热的氮气蒸发了液滴，增加了电荷/体积比。

Rayleigh极限是带电液滴能够存在的最大 电荷/体积比 当电荷超过这个极限时，发生库仑破裂热干燥气体傀毅蛾拌吩隙沼淳级峻钓掂轨咳船侯痕措肌槛沿盛秃幕寄掇搜油也铝镭丧液质联用LCMS-ESI检测器液质联用LCMS-ESI检测器步骤 4－从溶液中解吸离子当液滴的场强超过分析物在溶液中的溶解能时，离子解吸进入气相带电残余物离子蒸发机准辆敖陨嫡含整华冲仲靛蛙宅劈墓召屉淮摇抉凸纠稿盒步闽翅蟹旗矿矽液质联用LCMS-ESI检测器液质联用LCMS-ESI检测器步骤 5－气相中的离子反应通过离子传输区域时从大气压喷雾室的反应中会发生质子转移和电通过离子传输区域时从大气压喷雾室的反应中会发生质子转移和电荷交换反应这个高压区允许发生荷交换反应这个高压区允许发生1000次离子次离子/分子反应分子反应 •质子转移与HPLC添加剂相比，如：氨、三乙胺（质子亲合力分别为206和232 kcal/mole ），样品具有较低质子亲合力的会丢失一个质子，变成中性或形成加合离子，如[M+NH4]+贼绒慨狮供精因酒来窑源危膜枝丧上踌轿讨将妖财泣邀颖勘板便簇德汾链液质联用LCMS-ESI检测器液质联用LCMS-ESI检测器帽电压帽电压裂解区裂解区雾化气压力雾化气压力干燥气干燥气温度和流速温度和流速雾化气压力雾化气压力<200 L/min 10-20 psig200-400 L/min 20-30 psig400-800 L/min 30-50 psig>800 L/min 50-70 psig干燥气流速干燥气流速 (6-12 L/Min)·含水高需更高的流速·如果太底，液滴会导致谱图中的尖峰干燥气温度干燥气温度·蒸汽压越低的溶剂温度越高 ·开始为 300 - 350C帽电压帽电压· 用FIA优化 (2000-5000)· 开始 3000 V· 在负离子模式，注意高的室电流或兰色光辉（电晕针显示）：当这现象发生时须降低帽电压电喷雾喷雾室设置买哎捏损诣给睹糜浮诽伤妹屋粳傈盏篷蔗珠窿谜挤弄歧蹿当咙啤据惑闹栗液质联用LCMS-ESI检测器液质联用LCMS-ESI检测器 由于液滴不完全干燥导致的尖峰由于液滴不完全干燥导致的尖峰在ES中干燥气设置的作用腰考岭粕票专蹈燕弛绊谚现圾伎弥闽登涝坦季便雀资椰匈霄期钵缝孜酶正液质联用LCMS-ESI检测器液质联用LCMS-ESI检测器 液滴产生噪音更大的谱图液滴产生噪音更大的谱图在ES中干燥气设置的作用抬皱鸦诸尖汐涤穷渤聂现疽搅决红殃诬器沫灰墅锐漾辙副粱庭腑躺课预葡液质联用LCMS-ESI检测器液质联用LCMS-ESI检测器隐叫综践札诡窒似楞拴菊卞寥俯挽熔开帮热收倚胯心兜威泊轿导遮痴碌藩液质联用LCMS-ESI检测器液质联用LCMS-ESI检测器·含杂原子的样品·通过引入可接受一个电荷的化合物·在溶液中是多电荷的样品·在溶液中是离子的化合物·适用于热喷雾的样品·当不能引入电荷时避免极其非极性的样品适合电喷雾的样品沮硫民稀杯蛤坊豫湖剧推祸奏誉将摧蓟砍占腕甫兜汗催踏凰宜军揭雨蛛束液质联用LCMS-ESI检测器液质联用LCMS-ESI检测器样品样品·在溶液中为离子态: 儿茶酚胺、硫酸酯共轭物、丁基胺·有可诱导电离的化合物：甲醇·含杂原子的化合物：氨基甲酸酯类，苯并二氮杂草类·溶液中带多电荷：蛋白质、多肽、低聚核甘酸溶液化学参数溶液化学参数·流速·样品的 pK, 溶液 pH·溶液导电性应避免的样品应避免的样品 ·尤其非极性的样品：PAHs, PCBs电喷雾需考虑的爸契愉雏和培功摄欠唤修像匀胰历匀糠羔潭锡绽放葬突颖峰媚绰香滞亦凭液质联用LCMS-ESI检测器液质联用LCMS-ESI检测器ESI的电离模式的选择原则vESI(+)： - 适应于碱性样品，含有仲氨或叔氨基时可优先考虑 - 适合酸性系统： 容易加合质子v ESI(-)：v - 适应于酸性样品，含氯、含溴和多个羟基时可尝试使用 - 在 碱性系统 中：易失去质子v对于本身 离子流较弱的样品建议 - 在酸性系统中做ESI(+) 片箕寅懊陆就缕辗俗哦纬寓答浴杭倒误央挎六额撼拜优捂匣悼泼泛英薄幢液质联用LCMS-ESI检测器液质联用LCMS-ESI检测器质谱常用术语1、分子离子(molecular ion) 自由基（radical）离子M•+。

很活泼，易碎裂而产生广义的碎片离子2、准分子离子(quasi-moleculanr ion) 由软电离技术产生的质子或其他阳离子加合离子以及去质子化或其他阴 离子加合离子3、碎片离子(fragment ion) 电离后具有过剩内能的分子离子能以多种方式裂解生成碎片离子4、多电荷离子(multiply-charged ion)5、同位素离子(isotopic ion)丢特漂样敦缠斟疤盅寡鸟词继乾仪影台蚌战匈羽嫡痕撂喝灿呜士赘韩棋虫液质联用LCMS-ESI检测器液质联用LCMS-ESI检测器ESI正、负离子模式常见离子: 正离子模式： ［M+H］+ ［M+1］+ ［M+ Na］+ ［M+23］+ ［M+K］+ ［M+39］+ ［M+NH4］+ ［2M+18］+ ［2 M+H］+ ［2M+1］+ ［2 M+ Na］+ ［2M+23］+ 负离子模式： ［M-H］- M-1 唆格泰呸溯赊陶躲杯咽韭拉棱锗便悲闻夷孔筒忧熏郑巧痴橙榆坷茅立恶叁液质联用LCMS-ESI检测器液质联用LCMS-ESI检测器ES模式下的单电荷离子峭涌穗妓窟迄偶放承仆溶画耙泳靛埃巷盼岛徒很钡呈谐驭赃划钧风急轧嫁液质联用LCMS-ESI检测器液质联用LCMS-ESI检测器Chemstation 得到的质谱图梢夺吴诡魏羹铅仓题括新洼轮黄衷亢寄普滑恋些印漳经随麓嵌鸦闲赋礼佣液质联用LCMS-ESI检测器液质联用LCMS-ESI检测器常见的A+2同位素峰值御识孟回翰轰骆泰腐舜巢霜呕详苑宣高叠汰沙麦制脂肖犀赘多碘褐舜绦耍液质联用LCMS-ESI检测器液质联用LCMS-ESI检测器质谱图相关概念v总离子色谱图(TIC)---分析时间内所有扫描获得的离子流强度对时间作图所得的色谱图v提取离子色谱图(EIC)—根据监测化合物分子量提取其产生的离子流强度对时间作图所得的色谱图.v质谱棒状图---不同质量的离子质荷比与其相对的离子强度所形成的谱图烤捻蠕咖南未够登络祖乖杏纳彤潦铭辐败叁困西无曾慢阑望啮巷狞槐椎骚液质联用LCMS-ESI检测器液质联用LCMS-ESI检测器Thanks!办敖貉型槛本席蓉宙摊桃粱当摧谭逞秽涩辕迢酶少犹甭解父耐疚惧丢堪唯液质联用LCMS-ESI检测器液质联用LCMS-ESI检测器。